， ，

(1.南華大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院環(huán)境醫(yī)學(xué)與放射衛(wèi)生研究所，湖南 衡陽 421001；2.南華大學(xué)后勤服務(wù)中心醫(yī)務(wù)所)

·基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)·

PFOS致SH-SY5Y細(xì)胞凋亡及可能機(jī)制

全小青1,2，李武1，曾懷才2*

(1.南華大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院環(huán)境醫(yī)學(xué)與放射衛(wèi)生研究所，湖南 衡陽 421001；2.南華大學(xué)后勤服務(wù)中心醫(yī)務(wù)所)

目的探討全氟辛烷磺酸鹽(PFOS)對成人神經(jīng)母瘤細(xì)胞(SH-SY5Y)的凋亡效應(yīng)及可能的機(jī)制。

全氟辛烷磺酸鉀鹽； 成人神經(jīng)母瘤細(xì)胞； 氧化應(yīng)激； 凋亡

全氟辛烷磺酸鹽(Perfluorooctane Sulfonates，PFOS)是近十年出現(xiàn)具有環(huán)境持久性有機(jī)污染物，因其疏水疏油的特殊性質(zhì)而被廣泛的應(yīng)用于工業(yè)、農(nóng)業(yè)和日常生活的各種材料如潤濕劑、抗腐蝕制劑、泡沫滅火劑以及皮革、造紙、服裝等產(chǎn)品中[1-2]。研究表明PFOS不但存在于水體、空氣、食品和乳汁等多種環(huán)境介質(zhì)中，而且也存在于野生動物和人體內(nèi)[3-4]。PFOS在職業(yè)暴露人群和非職業(yè)人群血液中的平均含量分別是33.46 ng/mL和34.16 ng/mL[5]。由于PFOS在人體通過與血清白蛋白牢固結(jié)合并且半衰期長達(dá)5.4年[6]，遠(yuǎn)大于PFOS在大鼠體內(nèi)的半衰期(100天)[7]，所以其對人體的健康效應(yīng)備受關(guān)注。研究報道PFOS能夠通過血腦屏障[8]和胎盤屏障[9]，故發(fā)育中的神經(jīng)系統(tǒng)容易受到PFOS暴露。PFOS在人體內(nèi)主要蓄積在肝臟、血液和大腦，并且在大腦中的蓄積濃度也可達(dá)到血液中PFOS濃度的32%[10]，因此，關(guān)于PFOS的神經(jīng)系統(tǒng)毒性備受關(guān)注。

Johansson 等[11]用PFOS處理10天齡新生小鼠后，成年小鼠的認(rèn)知和行為功能受到了影響，說明PFOS 致新生小鼠學(xué)習(xí)記憶行為的損傷具有持續(xù)性。Chang和王玉等[10,12]報道，產(chǎn)前和泌乳期暴露PFOS 導(dǎo)致了子代大鼠的運(yùn)動增加和認(rèn)知功能的損傷?？傊?，PFOS能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)動物活動增加、記憶功能和認(rèn)知能力損傷等神經(jīng)毒性。但是目前對PFOS引起神經(jīng)毒性的潛在機(jī)制尚不清楚。本研究用PFOS處理SH-SY5Y細(xì)胞后檢測氧化應(yīng)激損傷相關(guān)指標(biāo)變化來探討其可能的神經(jīng)毒性機(jī)制。

1 材料與方法

1.1材料人源神經(jīng)母瘤細(xì)胞(SH-SY5Y)購自中國科學(xué)院上海細(xì)胞庫。PFOS購自美國Sigma公司，溶于二甲基亞砜(Dimethyl Sulfoxide，DMSO)中，配置成200 mmol/L的儲存液，再用DMSO分別稀釋成150、100、50、10、1 mmol/L儲存液。實(shí)驗(yàn)中PFOS劑量設(shè)置為200、150、100、50、10、1 μmol/L和DMSO(對照組)。

1.2細(xì)胞培養(yǎng)和染毒SH-SY5Y細(xì)胞生長于含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基中(內(nèi)含終濃度為100 U/mL的青霉素和100 μg/mL的鏈霉素)，于37 ℃恒溫、CO2濃度為5%的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，待細(xì)胞處于對數(shù)生長期并生長至60%融合度時，開始染毒。染毒時間為24 h和48 h。

1.3主要儀器與試劑細(xì)胞培養(yǎng)箱，熒光倒置顯微鏡，ELX-800酶標(biāo)儀，CCK8細(xì)胞活性檢測試劑，AV-FITC/PI雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒，總谷胱甘肽檢測試劑盒，脂質(zhì)氧化產(chǎn)物(Malondialdehyde，MDA)檢測試劑盒，總SOD活性檢測試劑盒(WST-8法)，活性氧檢測試劑盒。

1.4細(xì)胞活性檢測和細(xì)胞凋亡檢測細(xì)胞活性檢測：細(xì)胞活性檢測采用CCK8法。將SH-SY5Y細(xì)胞接種于96孔板，每組設(shè)5個復(fù)孔，接種密度為5.0×103個/孔，經(jīng)培養(yǎng)、染毒等步驟后，酶標(biāo)儀450 nm波長處檢測吸光度值，細(xì)胞活性計算公式為：細(xì)胞活性(%)=[A(加藥)-A(空白)]/[A(對照)-A(空白)]×100%；A(加藥)：具有細(xì)胞、CCK8溶液和毒物溶液的孔的吸光度；A(空白)：具有培養(yǎng)基和CCK8溶液而沒有細(xì)胞的孔的吸光度；A(對照)：具有細(xì)胞、CCK8溶液而沒有毒物溶液的孔的吸光度。細(xì)胞凋亡檢測：將SH-SY5Y細(xì)胞接種于6孔板，接種密度為2×104個/mL，待細(xì)胞貼壁并長至50%融合度時開始染毒，染毒48 h后，1×PBS洗滌2～3遍，用0.25%胰蛋白酶消化1～2 min(消化時間不要過長，以免引起假陽性)，用無血清培養(yǎng)基吹打至懸液，室溫離心收集細(xì)胞，用PBS洗滌細(xì)胞兩次，按照凋亡試劑盒說明書進(jìn)行操作。將細(xì)胞重懸Binding Buffer 500 μL，加入5 μL AV-FITC 混勻后再加入5 μL碘化丙啶(PI)，輕輕混勻，溫室避光反應(yīng)10 min，在1 h內(nèi)經(jīng)流式細(xì)胞儀器檢測。

1.5氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)檢測細(xì)胞總活性氧(Reactive oxygen species,ROS)、總超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)活性、丙二醛(MDA)含量和細(xì)胞中總谷胱甘肽(Glutathione,GSH)含量的測定嚴(yán)格按照試劑盒說明書提供的操作步驟進(jìn)行測定。

2 結(jié) 果

2.1 PFOS暴露對SH-SY5Y細(xì)胞活性和細(xì)胞形態(tài)的影響SH-SY5Y細(xì)胞暴露于不同的PFOS劑量組和DMSO(對照組)24 h和48 h后，相對于對照組，SH-SY5Y細(xì)胞分別在50 μmol/L和10 μmol/L劑量組出現(xiàn)細(xì)胞活性顯著降低(圖1A)；同時將PFOS處理時間和PFOS處理濃度對SH-SY5Y細(xì)胞活性的影響進(jìn)行雙因素方差分析，發(fā)現(xiàn)PFOS處理濃度(F=10.69,P<0.05)和PFOS處理時間(F=6.96,P<0.05)都能顯著降低了SH-SY5Y細(xì)胞活性，且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。由于SH-SY5Y細(xì)胞倍增時間為48 h，故余下實(shí)驗(yàn)中均用48 h作為處理時間點(diǎn)。

PFOS處理SH-SY5Y細(xì)胞48 h后，在10 μmol/L劑量組時，SH-SY5Y細(xì)胞形態(tài)和對照組尚無區(qū)別，然而隨著PFOS劑量增加至50 μmol/L時，SH-SY5Y細(xì)胞胞體萎縮、細(xì)胞輪廓模糊、神經(jīng)突起逐漸減少并且不規(guī)則形態(tài)細(xì)胞和漂浮在培養(yǎng)基中的死亡細(xì)胞逐漸增多，見圖1B。由于SH-SY5Y在PFOS劑量為100 μmol/L時細(xì)胞活性已經(jīng)低于60%，故余下實(shí)驗(yàn)用100 μmol/L作為余下實(shí)驗(yàn)的PFOS最高劑量組。

圖1 PFOS暴露對SH-SY5Y細(xì)胞活性和細(xì)胞形態(tài)的影響 A：不同濃度PFOS暴露24h和48h對SH-SY5Y細(xì)胞活性的影響.與對照組比較，*:P<0.05；B：不同濃度PFOS暴露48 h對SH-SY5Y細(xì)胞形態(tài)的影響

2.2 PFOS對SH-SY5Y細(xì)胞凋亡的影響PFOS處理SH-SY5Y細(xì)胞48 h后用Annexin-V FITC/PI雙染法結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)檢測，結(jié)果顯示PFOS處理明顯的誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞發(fā)生了凋亡，并且隨著染毒劑量的上升，發(fā)生凋亡的細(xì)胞比例越來越大(圖2A)。對流式結(jié)果進(jìn)一步比較分析發(fā)現(xiàn)，在低濃度10 μmol/L的PFOS處理時，SH-SY5Y細(xì)胞凋亡即有增加，隨著PFOS染毒濃度逐漸增加，SH-SY5Y細(xì)胞發(fā)生凋亡逐漸增多，特別在高濃度時(50 μmol/L和100 μmol/L)，細(xì)胞凋亡更為明顯，見圖2B，PFOS主要引起SH-SY5Y細(xì)胞發(fā)生晚期凋亡為主，而早期凋亡細(xì)胞比例并沒有發(fā)生明顯變化，并且隨著染毒劑量的增加，PFOS引起SH-SY5Y細(xì)胞發(fā)生壞死的比例也逐漸增加。

圖2 PFOS暴露對SH-SY5Y細(xì)胞的凋亡影響 A：流式細(xì)胞儀檢測圖，a：對照組，b：PFOS 10 μmol/L組，c：PFOS 50 μmol/L組，d：PFOS 100 μmol/L組；B：不同狀態(tài)細(xì)胞的分布情況，a：晚期凋亡細(xì)胞；b：早期凋亡細(xì)胞；c：壞死細(xì)胞；d：正常細(xì)胞

2.3 PFOS對SH-SY5Y細(xì)胞中氧化應(yīng)激指標(biāo)變化的影響

2.3.1 PFOS對GSH、SOD和MDA含量的影響 用濃度為0、10、50、100、150、200 μmol/L PFOS作用SH-SY5Y細(xì)胞48 h后，分別采用顯色法、WST-8法、比色法對SH-SY5Y細(xì)胞中的總谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量進(jìn)行檢測；結(jié)果顯示：隨著PFOS染毒劑量的逐漸增加，SH-SY5Y細(xì)胞中的SOD和GSH水平逐漸降低，而SH-SY5Y細(xì)胞中的MDA水平隨著PFOS染毒劑量的增加而顯著升高，說明PFOS降低了SH-SY5Y細(xì)胞中的抗氧化物質(zhì)(GSH和SOD)的含量，升高了SH-SY5Y細(xì)胞中氧化物質(zhì)(MDA)的含量，因此PFOS對SH-SY5Y細(xì)胞產(chǎn)生了氧化損傷(見表1)。

表1PFOS暴露對SH-SY5Y細(xì)胞SOD、MDA和GSH蛋白含量的影響(n=3)

PFOS(μmol/L)SOD(U/g)GSH(nmol/mg)MDA(nmol/mg)08．50±0．848．00±0．121．92±0．17104．67±0．72a7．45±0．21a2．19±0．06504．28±0．49a6．95±0．37a2．18±0．17a1003．79±0．50a7．00±0．19a3．13±0．10a1503．50±1．02a6．56±0．29a3．41±0．12a2001．19±0．63a5．89±0．90a6．95±0．26a

與對照組0 μmol/L PFOS組相比，a：P<0.05

2.3.2 PFOS對SH-SY5Y細(xì)胞ROS含量的影響 用濃度為0、10、50、100、150、200 μmol/L PFOS作用SH-SY5Y細(xì)胞48 h后，采用DCFH-DA熒光探針法對SH-SY5Y細(xì)胞中總活性氧(ROS)進(jìn)行檢測；實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：與對照組相比，隨著PFOS染毒劑量的逐漸增加，SH-SY5Y細(xì)胞中ROS水平逐漸升高，活性氧產(chǎn)生的熒光值從對照組的141.8±12.9上升至最高劑量組的643.9±20.5，兩者的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義；說明PFOS顯著促進(jìn)了SH-SY5Y細(xì)胞中活性氧的產(chǎn)生(見表2)。

表2PFOS暴露對SH-SY5Y細(xì)胞ROS含量的影響(n=3)

PFOS(μmol/L)ROS(熒光強(qiáng)度)0141．8±12．910182．1±19．950213．1±6．4a100240．9±11．1a150290．7±29．2a200643．9±20．5a

與對照組0 μmol/L PFOS組相比，a：P<0.05

3 討 論

人類在日常生產(chǎn)生活中都會接觸到PFOS；因其在生物體內(nèi)不易發(fā)生代謝降解故具有明顯的生物蓄積性。由于大腦、血液和肝臟作為PFOS在哺乳動物體內(nèi)蓄積的三大蓄積器官，所以PFOS對神經(jīng)系統(tǒng)的毒性作用一直受到廣泛關(guān)注。王玉等[12]發(fā)現(xiàn)通過飲水使妊娠大鼠接觸PFOS，觀察發(fā)現(xiàn)仔鼠學(xué)習(xí)記憶能力隨著PFOS染毒濃度的增加而下降，且胚胎期染毒PFOS對新生小鼠的學(xué)習(xí)能力影響更加明顯。Zeng等[13]的研究發(fā)現(xiàn)孕期雌鼠進(jìn)行0.1、0.6和2.0 mg/kg PFOS暴露即可誘導(dǎo)仔鼠海馬和皮層的膠質(zhì)纖維酸性蛋白和酸性鈣結(jié)合蛋白S100B的表達(dá)[13]。一項(xiàng)流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)孕期PFOS暴露將會影響神經(jīng)發(fā)育，特別是對2周歲時的運(yùn)動行為發(fā)育[14]。本研究以SH-SY5Y為體外受試對象，經(jīng)不同濃度的PFOS處理后檢測SH-SY5Y細(xì)胞活性、凋亡效應(yīng)和氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)的水平變化。

本文結(jié)果發(fā)現(xiàn)PFOS顯著的降低了細(xì)胞活性，呈明顯時間劑量效應(yīng)關(guān)系，并隨著染毒劑量的逐漸增加細(xì)胞形態(tài)出現(xiàn)不規(guī)則，神經(jīng)突起逐漸消失等形態(tài)變化。流式細(xì)胞術(shù)檢測發(fā)現(xiàn)PFOS引起了細(xì)胞發(fā)生凋亡，細(xì)胞凋亡以晚期凋亡為主。說明PFOS對SH-SY5Y細(xì)胞產(chǎn)生體外毒性，并引起SH-SY5Y細(xì)胞發(fā)生凋亡和壞死。

過去對PFOS神經(jīng)毒性機(jī)制研究主要集中在PFOS對神經(jīng)元Ca2+穩(wěn)態(tài)、神經(jīng)遞質(zhì)、甲狀腺激素和神經(jīng)元miRNA水平的影響[15-16]。大量研究發(fā)現(xiàn)氧化應(yīng)激也廣泛地參與了外源性化合物引起的神經(jīng)毒性效應(yīng)。例如銀納米顆粒和金屬鉛離子導(dǎo)致的神經(jīng)毒性都與氧化應(yīng)激有關(guān)[17-18]。而氧化應(yīng)激指標(biāo)主要包括超氧化物歧化酶(SOD)、還原性谷胱甘肽(GSH)、活性氧族(ROS)和丙二醛(MDA)，其中GSH通過谷胱甘肽過氧化物酶的催化作用以清除ROS，SOD是清除體內(nèi)自由基的首要物質(zhì)；而MDA是指不飽和脂肪酸過氧化產(chǎn)物，其含量的多少可反映氧化應(yīng)激損傷的程度。

在本研究中，與對照組相比，PFOS處理SH-SY5Y細(xì)胞48 h后引起全部實(shí)驗(yàn)組SH-SY5Y細(xì)胞中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽還原酶(GSH)水平顯著性下降；同時10 μmol/L以上劑量PFOS染毒引起SH-SY5Y細(xì)胞總活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)水平顯著性上升。本實(shí)驗(yàn)中PFOS引起細(xì)胞中抗氧化物質(zhì)SOD和GSH含量的減少可降低細(xì)胞的抗氧化能力和自我保護(hù)能力；而PFOS引起SH-SY5Y細(xì)胞中的ROS水平的上升將會加重細(xì)胞的氧化應(yīng)激損傷。另外，PFOS還引起了細(xì)胞中脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA含量的上升，這可能是抗氧化物質(zhì)減少和活性氧大量產(chǎn)生繼而產(chǎn)生氧化損傷的后果。PFOS暴露對SH-SY5Y細(xì)胞產(chǎn)生了嚴(yán)重的氧化應(yīng)激損傷，并且PFOS也正可能通過產(chǎn)生氧化應(yīng)激損傷進(jìn)而對SH-SY5Y細(xì)胞產(chǎn)生毒性和促進(jìn)細(xì)胞發(fā)生凋亡。

[1] Giesy JP,Kannan K.Perfluorochemical surfactants in the environment[J].Environ Sci Technol,2002,36(7):146A-152A.

[2] Beach SA,Newsted JL,Coady K,et al.Ecotoxicological evaluation of perfluorooctanesulfonate (PFOS)[J].Rev Environ Contam Toxicol,2006,186(186):133-174.

[3] Giesy JP,Kannan K.Global Distribution of Perfluorooctane Sulfonate in Wildlife[J].Environ Sci Technol,2001,35(7):1339-1342.

[4] K?rrman A,Lindstr?m G.Exposure of perfluorinated chemicals through lactation:levels of matched human milk and serum and a temporal trend,1996-2004,in Sweden[J].Environ Health Per,2007,115(2):226-230.

[5] Wang J,Zhang Y,Zhang W,et al.Association of perfluorooctanoic acid with HDL cholesterol and circulating miR-26b and miR-199-3p in workers of a fluorochemical plant and nearby residents[J].Environ Sci Technol,2012,46(17):9274-9281.

[6] Olsen GW,Burris JM,Ehresman DJ,et al.Half-life of serum elimination of perfluorooctanesulfonate,Perfluorohexanesulfonate,and Perfluorooctanoate in retired fluorochemical production workers[J].Environ Health Per,2007,115(9):1298-1305.

[7] Lau C,Anitole K,Hodes C,et al.Perfluoroalkyl acids:a review of monitoring and toxicological findings[J].Toxicol Sci,2007,99(2):366-394.

[8] Austin ME,Mohankumar SMJ.Neuroendocrine effects of perfluorooctane sulfonate in rats.[J].Environ Health Per,2003,111(12):1485-1499.

[9] Apelberg BJ,Goldman LR,Calafat AM.et al.Determinants of Fetal Exposure to Polyfluoroalkyl Compounds in Baltimore,Maryland[J].Environ Sci Technol,2007,41(11):3891-3897.

[10] Chang SC,Ehresman DJ,Bjork JA,et al.Gestational and lactational exposure to potassium perfluorooctanesulfonate (K+PFOS) in rats:toxicokinetics,thyroid hormone status,and related gene expression[J].Reprod Toxicol,2009,27(3-4):387-399.

[11] Johansson N,Fredriksson A,Eriksson P.Neonatal exposure to perfluorooctane sulfonate (PFOS) and perfluorooctanoic acid (PFOA) causes neurobehavioural defects in adult mice[J].Neurotoxicology,2008,29(1):160-169.

[12] 王玉,張倩,劉薇,等.胚胎期和哺乳期全氟辛烷磺酸(PFOS)暴露致大鼠學(xué)習(xí)記憶能力下降[J].生態(tài)毒理學(xué)報,2013,8(5):671-677.

[13] Zeng HC,Zhang L,Li YY,et al.Inflammation-like glial response in rat brain induced by prenatal PFOS exposure[J].Neurotoxicology,2011,32(1):130-139.

[14] Chen MH,Ha EH,Liao HF,et al.Perfluorinated compound levels in cord blood and neurodevelopment at 2 years of age[J].Epidemiology,2013,24(6):800-808.

[15] 劉曉暉,胡宏,李雙月,等.全氟辛烷磺酸神經(jīng)發(fā)育毒性機(jī)制研究進(jìn)展[J].生態(tài)毒理學(xué)報,2013,8(5):643-649.

[16] Liu X,Wei L,Jin Y,et al.Effects of subchronic perfluorooctane sulfonate exposure of rats on calcium-dependent signaling molecules in the brain tissue[J].Arch Toxicol,2010,84(6):471-479.

[17] 李平,李芬,葉昉,等.Nrf 2信號通路在鉛致SH-SY5Y細(xì)胞氧化應(yīng)激中作用[J].中國公共衛(wèi)生,2012,28(7):933-935.

[18] Sun C,Yin N,Wen R,et al.Silver nanoparticles induced neurotoxicity through oxidative stress in rat cerebral astrocytes is distinct from the effects of silver ions[J].Neurotoxicology,2015,52(1):210-221.

TheStudyofSH-SY5YCellsApoptosisInducedbyPFOSandItsMechanism

QUAN Xiaoqin，LI Wu，ZENG Huaicai
(InstituteofEnvironmentalMedicineandRadiationHealth,SchoolofPublicHealth,UniversityofSouthChina,Hengyang,Hunan421001,China)

ObjectiveExplore the apoptosis effects of PFOS on SH-SY5Y cells and its mechanism.MethodsThe experiment was divided into seven groups,the control (DMSO) and the PFOS groups (1,10,50,100,150,200 μmol/L).The cell viability and time-efficiency of SH-SY5Y were determined by CCK8,the apoptosis rate were detected by Annexin-V FITC/PI double-staining,respectively.The effects of PFOS on oxidative stress damage in SH-SY5Y cells were detected by UV spectrophotometry and fluorescence methods.ResultsPFOS treatment significantly decreased SH-SY5Y cell viability in a dose dependent manner.The apoptosis effects were observed in SH-SY5Y cells obviously after PFOS exposure 48 h;The results of UV and fluorescence spectrophotometry showed that PFOS induced SH-SY5Y cell superoxide dismutase (SOD) and glutathione reductase (GSH) decreased,compared with the control,and the highest group of PFOS decreased GSH from 8±0.12 nmol/mg protein to 5.89±0.9 nmol/mg protein.While the total reactive oxygen species (ROS) and malondialdehyde (MDA) levels increased,compared with the control,the highest group of PFOS elevated MDA from 1.92±0.17 nmol/mg protein to 6.95±0.26 nmol/mg protein.ConclusionPFOS produced oxidative stress damage in SH-SY5Y cells,which may be the mechanisms of neurotoxicity induced by PFOS.

PFOS; SH-SY5Y cells; oxidative stress; apoptosis

10.15972/j.cnki.43-1509/r.2016.04.009

2016-03-03；

2016-06-28

國家自然科學(xué)基金(81273026)，湖南省衛(wèi)生廳(B2011-044)，衡陽市科技局(2011KS9).

*通訊作者，E-mail：zenghuaicai@126.com

方法實(shí)驗(yàn)中PFOS劑量設(shè)置為200、150、100、50、10、1 μmol/L和DMSO(對照組)。體外培養(yǎng)SH-SY5Y細(xì)胞，以不同濃度PFOS(1、10、50、100、150、200 μmol/L)處理細(xì)胞。染毒24 h和48 h后用CCK8法檢測SH-SY5Y細(xì)胞活性，應(yīng)用Annexin-V FITC/PI雙染法結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡，紫外和熒光分光光度法檢測SH-SY5Y細(xì)胞超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽還原酶(GSH)、總活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)的影響。結(jié)果PFOS暴露降低了SH-SY5Y細(xì)胞活性，并呈明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系；PFOS導(dǎo)致SH-SY5Y細(xì)胞凋亡；紫外和熒光分光光度法結(jié)果顯示PFOS引起SH-SY5Y細(xì)胞中SOD和GSH水平下降，與對照組相比，最高劑量組PFOS引起GSH含量從8.00±0.12 nmol/mg蛋白降至5.89±0.90 nmol/mg蛋白；同時引起總活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)水平上升，與對照組相比，最高劑量組PFOS引起MDA含量從1.92±0.17 nmol/mg蛋白顯著上升至6.95±0.26 nmol/mg蛋白。結(jié)論P(yáng)FOS可能通過對SH-SY5Y細(xì)胞產(chǎn)生氧化應(yīng)激損傷從而對SH-SY5Y細(xì)胞產(chǎn)生毒性效應(yīng)。

R329.25

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蔣湘蓮)