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        小漿果抗氧化能力的研究

        2016-12-23 06:03:16李佳少王偉宏
        釀酒科技 2016年12期
        關(guān)鍵詞:黑加侖漿果樹莓

        李佳少,王偉宏,苑 偉

        (山東黑尚莓生物技術(shù)發(fā)展股份有限公司,山東煙臺(tái)264000)

        小漿果抗氧化能力的研究

        李佳少,王偉宏,苑 偉

        (山東黑尚莓生物技術(shù)發(fā)展股份有限公司,山東煙臺(tái)264000)

        選取了釀制樹莓(覆盆子)酒的原料紅樹莓、黑莓、桑葚、枸杞、黑加侖、沙棘,市售蘋果、石榴、無花果及常見的幾款葡萄(巨峰、金手指、玫瑰香等),對其清除DPPH·自由基的能力及ABTS+·自由基的能力進(jìn)行了比較,結(jié)果表明,沙棘、桑葚、紅樹莓等小漿果都有較強(qiáng)的清除自由基的能力。沙棘清除DPPH·自由基的能力最強(qiáng),為15.82μmol/g±0.2007μmol/g,紅樹莓清除ABTS+·自由基的能力為86.12μmol/g±0.26μmol/g,位居本研究的幾種小漿果之首。

        沙棘; 紅樹莓; 抗氧化能力; DPPH·自由基; ABTS+·自由基

        抗氧化和抗衰老是近年來食品領(lǐng)域研究的潮流,抗氧化劑主要是通過終止自由基鏈反應(yīng)而清除自由基,許多研究發(fā)現(xiàn),多種蔬菜和水果都對DPPH·自由基ABTS+·自由基有較強(qiáng)的清除能力,原因可能是水果中的生物類黃酮、原花青素等可抑制氧化過程和化學(xué)致癌[1]。

        目前醫(yī)療和食品行業(yè)領(lǐng)域使用較多的是合成抗氧化劑[2],但動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明合成抗氧化劑對生物體有潛在的毒害作用,因此,從天然食材中尋找高效、廉價(jià)、低毒的抗氧化劑逐漸會(huì)成為研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)[3]。

        本研究比較了釀制樹莓(覆盆子)酒的原料小漿果與食用葡萄及蘋果、無花果、石榴等清除自由基的能力,以便為合理膳食提供指導(dǎo)。

        1 材料與方法

        1.1 材料、試劑及儀器

        樹莓、黑加侖凍果:購自黑龍江尚志市;桑葚凍果:購自河北省泊頭市茍村;枸杞干果:購自寧夏中寧縣;無花果、石榴、巨峰、玫瑰香、金手指鮮果:購自煙臺(tái)市芝罘區(qū)鳳凰臺(tái)市場。

        儀器:KQ22000DE型超聲波清洗器,昆山超聲儀器有限公司;T6新世紀(jì)紫外可見分光光度計(jì),上海普析通用儀器有限責(zé)任公司;BS2202S型電子天平,賽多利斯;XW-80A微型渦旋混勻器,上海滬西分析儀器廠有限公司;TG16-WS臺(tái)式高速離心機(jī),湖南湘儀離心機(jī)儀器有限公司。

        試劑:ABTS+·、DPPH·、Trolox試劑(上海源葉生物科技有限公司),其他試劑市售。

        1.2 實(shí)驗(yàn)方法

        1.2.1 漿果提取液的制備

        取漿果果實(shí)可食用部分2~5 g,精密稱定,置于具塞錐形瓶中,加入體積分?jǐn)?shù)95%的乙醇16m L,稱定質(zhì)量,超聲處理30m in,冷卻再稱定質(zhì)量,用體積分?jǐn)?shù)95%的乙醇補(bǔ)足失去的質(zhì)量。于3500 r/m in條件下離心5m in,取上清液稀釋后備用[4-5]。

        1.2.2 DPPH·法測定抗氧化活性

        DPPH·溶液的配制:準(zhǔn)確稱取0.00315 g DPPH,用95%的乙醇溶液定容至100m L(臨用現(xiàn)配)[6]。

        1.2.3 提取液清除DPPH·自由基能力的測定

        (1)取植物提取稀釋液1m L及DPPH·液500μL于10m L具塞試管中,再加入3.5m L 95%乙醇,渦旋混勻,暗處放置40min,于波長517 nm[7]處測定吸光度。根據(jù)下列公式(1)計(jì)算漿果提取稀釋液對DPPH·自由基的抑制率,即:

        其中:Ai為加入樣品的吸光度值,Aj為樣品本底的吸光度值,Ac為不加樣品的吸光度值[8]。

        DPPH·自由基的清除作用是通過抗氧化劑把電子和質(zhì)子傳遞給DPPH·自由基,反應(yīng)如下:

        (2)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:測定濃度分別為60μmol/L、80μmol/L、120μmol/L、160μmol/L、200μmol/L trolox的DPPH·清除率,并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

        (3)抗氧化能力計(jì)算如下:

        其中:c為由trolox標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得的漿果提取液的濃度;V為提取溶劑體積;D為稀釋倍數(shù);m0為樣品質(zhì)量。

        1.2.4 ABTS+·法測定抗氧化活性

        ABTS+·測定溶液的配制:準(zhǔn)確稱取0.384 g ABTS+·溶解定容至100m L;準(zhǔn)確稱取0.066 g過硫酸鉀水溶后定容至100m L;上述兩種溶液按體積比1∶1混合搖勻后,暗處放置12~16 h,用無水乙醇稀釋至吸光度小于0.7。

        1.2.5 提取液清除ABTS+·自由基能力的測定

        (1)吸取樹莓提取液400μL,加入ABTS測定溶液3.6m L,靜置5m in,于波長734 nm[9]處測定吸光度,漿果提取稀釋液對ABTS+·自由基的抑制率參照公式(1)。

        (2)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:測定濃度分別為為20μmol/L、40μmol/L、60μmol/L、80μmol/L、100μmol/L trolox的ABTS+·清除率,并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

        (3)抗氧化能力計(jì)算公式(3)如下:

        其中:c為由trolox標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得的漿果提取稀釋液的濃度,V為提取溶劑體積,D為稀釋倍數(shù),m0為樣品質(zhì)量。

        2 結(jié)果與討論

        2.1 DPPH·自由基能力的測定(見表1)

        樹莓(覆盆子)酒的原料:沙棘、桑葚、黑加侖、紅樹莓、黑莓等凍果清除DPPH·自由基的能力較食用葡萄、無花果等鮮果的強(qiáng),沙棘清除DPPH·自由基的能力為15.82μmol/g±0.2007μmol/g,在本實(shí)驗(yàn)研究的水果中居首位;黑加侖、紅樹莓、黑莓、石榴等清除自由基的能力相當(dāng);葡萄等品種清除自由基的能力較弱,玫瑰香品種清除DPPH·自由基的能力僅為0.57μmol/g±0.006μmol/g,是研究的水果中最低的;枸杞干果清除自由基的能力不強(qiáng),這可能是由于提取方法的限制,超聲波提取30min,并不能充分提取枸杞干果中的抗氧化成分。

        表1 樣品漿果中DPPH·自由基能力的測定 (μmol/g)

        2.2 ABTS+·自由基能力的測定(見表2)

        表2 漿果中ABTS+·自由基能力的測定 (μmol/g)

        作為釀制復(fù)方樹莓(覆盆子)酒的主要原料,紅樹莓凍果清除ABTS+·自由基的能力是本實(shí)驗(yàn)研究的水果中最強(qiáng)的,可達(dá)86.12μmol/g±0.26μmol/g;其他原料如黑加侖、桑葚等的清除能力也較強(qiáng),這可能是由于這三者都含有大量的花青素,有研究表明,花青素是一種強(qiáng)有力的抗氧化劑和自由基清除劑,其清除能力是維生素C的20倍,維生素E的30倍[10]。但市售的葡萄鮮果清除ABTS+·自由基的能力則較弱,金手指葡萄清除自由基的能力僅為5.40μmol/g±0.690μmol/g;無花果清除自由基的能力也一般,為10.28μmol/g±1.62μmol/g。

        3 結(jié)論

        玫瑰香葡萄清除DPPH·自由基的能力在研究的小漿果中最弱,但是清除ABTS+·自由基的能力卻是幾種葡萄中最高的,雖然DPPH·自由基反應(yīng)后的產(chǎn)物都是DPPH2[11],但是不同抗氧化物質(zhì)清除自由基的機(jī)理不同,可能是ET機(jī)制,也可能是HAT機(jī)制,或者是兩者共同作用的結(jié)果[12],因此清除不同自由基的能力也不同,若要評(píng)價(jià)某種水果的抗氧化性不能用單一的指標(biāo)來評(píng)判,要多項(xiàng)指標(biāo)綜合考慮。

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        Antioxidant Ability of Raspberry and Other SmallBerries

        LIJiashao,WANGWeihong and YUANWei
        (HeishangmeiBiotechnology DevelopmentCo.Ltd.,Yantai,Shandong 264000,China)

        In this study,the raw materials of raspberry w ine including red raspberry,blackberry,mulberry,wolfberry,blackcurrant,sea buckthorn,apple,pomegranate,fig and several common grapes(Kyoho,Gold Finger,Muscat)were selected,and their scavenging ability of DPPH· free radical and ABTS+·free radicalwere compared.The results showed that,small berries such as sea buckthorn,red raspberry andmulberry etc.had strong scavenging ability,sea buckthorn had the strongestscavenging ability of DPPH·free radicalof 15.82μmol/g±0.2007μmol/g, and red raspberry had the strongestscavenging ability ofABTS+·free radicalof 86.12μmol/g±0.26μmol/g.

        seabuckthorn;red raspberry;antioxidantability;DPPH·free radical;ABTS+·free radical

        TS262.7;TS261.4

        A

        1001-9286(2016)12-0069-02

        10.13746/j.njkj.2016317

        2016-10-31

        李佳少(1986-),女,助理工程師,碩士研究生。

        優(yōu)先數(shù)字出版時(shí)間:2016-11-21;地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/52.1051.TS.20161121.1714.013.htm l。

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