李天芝，于新友，王金良，沈志強(qiáng)

（1.山東綠都生物科技有限公司，山東濱州256600；2.山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院，山東濱州256600）

2015年魯北地區(qū)豬病毒病檢測(cè)結(jié)果與分析

李天芝1，于新友1，王金良2，沈志強(qiáng)2

（1.山東綠都生物科技有限公司，山東濱州256600；2.山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院，山東濱州256600）

為了準(zhǔn)確把握魯北地區(qū)豬病毒性疾病的發(fā)病情況，指導(dǎo)養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）做好疫苗免疫與防控工作，依托魯北獸醫(yī)診斷中心，對(duì)2015年魯北地區(qū)各豬場(chǎng)送檢的病料檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析，主要包括豬瘟病毒（CSFV）、豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）、豬偽狂犬病病毒（PRV）、豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）、豬細(xì)小病毒（PPV）、豬流行性腹瀉病毒（PEDV）、豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）、豬A群輪狀病毒（PARV）等8種疫病病原的檢測(cè)情況。

1 材料與方法

1.1 病料

2015年從魯北地區(qū)不同規(guī)模發(fā)病豬場(chǎng)采集病死豬的扁桃體、肺臟、淋巴結(jié)、脾臟、腎臟、腦、腸、腸內(nèi)容物等，共采集212個(gè)場(chǎng)次。采樣豬場(chǎng)和數(shù)量詳見(jiàn)表1。其中規(guī)模場(chǎng)為有自繁自養(yǎng)50頭母豬，或者單批肥育160頭豬以上場(chǎng)（戶），凡達(dá)不到上述標(biāo)準(zhǔn)的視為散養(yǎng)場(chǎng)（戶）。

表12015 年檢測(cè)病料來(lái)源豬場(chǎng)分類統(tǒng)計(jì)份

1.2 試劑盒

AxyPrep體液病毒DNA/RNA小量試劑盒購(gòu)自愛(ài)思進(jìn)生物技術(shù)（杭州）有限公司，豬瘟一步法RT-PCR檢測(cè)試劑盒、豬繁殖與呼吸綜合征一步法RT-PCR檢測(cè)試劑盒、豬圓環(huán)病毒病PCR檢測(cè)試劑盒、豬偽狂犬病PCR檢測(cè)試劑盒、豬細(xì)小病毒病PCR檢測(cè)試劑盒、豬流行性腹瀉一步法RT-PCR檢測(cè)試劑盒、豬傳染性胃腸炎一步法RT-PCR檢測(cè)試劑盒、豬A群輪狀病毒一步法RT-PCR檢測(cè)試劑盒均為山東綠都生物科技有限公司產(chǎn)品。

1.3 病料采集與送檢

解剖病死豬，觀察病變情況，無(wú)菌采集新鮮病料，按要求標(biāo)注相關(guān)信息，送魯北地區(qū)濱州畜牧獸醫(yī)研究院預(yù)防獸醫(yī)學(xué)與動(dòng)物生物技術(shù)重點(diǎn)開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)病原。

1.4 DNA、RNA提取

按照AxyPrep體液病毒DNA/RNA小量試劑盒說(shuō)明進(jìn)行，提取病毒核酸樣品。

1.5 病毒的核酸檢測(cè)

對(duì)每份病料樣品檢測(cè)CSFV、PRRSV、PRV、PCV2、PPV、PEDV、TGEV、PARV的病毒核酸，按照檢測(cè)試劑盒說(shuō)明操作。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 各病毒的檢測(cè)情況

對(duì)2015年魯北地區(qū)212份病料8種病毒檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2。結(jié)果顯示，CSFV陽(yáng)性檢出率為25.5%，其中散養(yǎng)場(chǎng)（戶）CSFV陽(yáng)性檢出率高達(dá)26.9%，相比規(guī)模場(chǎng)的24.8%高出2.1個(gè)百分點(diǎn)。PRRSV陽(yáng)性檢出率為46.7%，其中散養(yǎng)場(chǎng)（戶）與規(guī)模場(chǎng)陽(yáng)性檢出率分別為47.8%、46.2%。PRV陽(yáng)性檢出率為24.5%，其中散養(yǎng)場(chǎng)（戶）與規(guī)模場(chǎng)陽(yáng)性檢出率分別為25.4%、24.1%。PCV2陽(yáng)性檢出率為20.3%，其中散養(yǎng)場(chǎng)（戶）與規(guī)模場(chǎng)陽(yáng)性檢出率分別為22.4%、19.3%。PPV陽(yáng)性檢出率為7.5%，其中散養(yǎng)場(chǎng)（戶）與規(guī)模場(chǎng)陽(yáng)性檢出率分別為10.4%、6.2%。PEDV陽(yáng)性檢出率為16.0%，其中散養(yǎng)場(chǎng)（戶）與規(guī)模場(chǎng)陽(yáng)性檢出率分別為16.4%、15.9%。TGEV陽(yáng)性檢出率為2.8%，其中散養(yǎng)場(chǎng)（戶）與規(guī)模場(chǎng)陽(yáng)性檢出率分別為3.0%、2.8%。PARV陽(yáng)性檢出率為4.2%，其中散養(yǎng)場(chǎng)（戶）與規(guī)模場(chǎng)陽(yáng)性檢出率分別為4.5%、4.1%。

2.2 不同病毒混合感染情況

檢測(cè)統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，無(wú)論是散養(yǎng)豬場(chǎng)還是規(guī)模豬場(chǎng)均存在不同程度的混合感染，CSFV、PRRSV雙重混合感染陽(yáng)性率為10.8%，其中散養(yǎng)場(chǎng)和規(guī)模場(chǎng)分別為11.9%和10.3%。CSFV、PRV雙重混合感染陽(yáng)性率為4.2%，其中散養(yǎng)場(chǎng)和規(guī)模場(chǎng)分別為4.5%和4.1%。PRRSV、PRV雙重混合感染陽(yáng)性率為5.7%，其中散養(yǎng)場(chǎng)和規(guī)模場(chǎng)分別為6.0%和5.5%。PRRSV、PCV2雙重混合感染陽(yáng)性率為9.9%，其中散養(yǎng)場(chǎng)和規(guī)模場(chǎng)分別為10.4%和9.7%。PRV、PPV雙重混合感染陽(yáng)性率為2.8%，其中散養(yǎng)場(chǎng)和規(guī)模場(chǎng)分別為3.0%和2.8%。PRV、PCV2雙重混合感染陽(yáng)性率為4.2%，其中散養(yǎng)場(chǎng)和規(guī)模場(chǎng)分別為4.5%和4.1%。PCV2、PPV雙重混合感染陽(yáng)性率為1.9%，其中散養(yǎng)場(chǎng)和規(guī)模場(chǎng)分別為3.0%和1.4%。PEDV、PARV雙重混合感染陽(yáng)性率為2.4%，其中散養(yǎng)場(chǎng)和規(guī)模場(chǎng)分別為3.0%和2.1%。PRRSV、PCV2、PRV多重混合感染陽(yáng)性率為1.4%，其中散養(yǎng)場(chǎng)和規(guī)模場(chǎng)分別為1.5%和1.4%。CSFV、PRRSV、PRV多重混合感染陽(yáng)性率為2.4%，其中散養(yǎng)場(chǎng)和規(guī)模場(chǎng)分別為3.0%和2.1%。PEDV、TGEV、PARV多重混合感染陽(yáng)性率為1.4%，其中散養(yǎng)場(chǎng)和規(guī)模場(chǎng)分別為1.5%和1.4%（表3）。

表2 病毒檢測(cè)結(jié)果

表3 混合感染陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果

3 討論

疫病是威脅養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的主要原因之一，給養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失，應(yīng)充分發(fā)揮實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)在豬病防控中作用，將檢測(cè)結(jié)果與豬群免疫情況和臨床實(shí)際情況結(jié)合起來(lái)。豬病多種多樣，有細(xì)菌性的、病毒性的、寄生蟲(chóng)性的、還有各種病原混合感染的情況[1]，在混合感染的疾病中80%是病毒病[2]，且目前對(duì)病毒性疾病的治療仍無(wú)有效的藥物，無(wú)有力防治手段，由此可見(jiàn)，病毒性疾病已經(jīng)占據(jù)首要位置，值得關(guān)注。很多專家均認(rèn)為在眾多病毒性疾病中，豬瘟、豬藍(lán)耳病、豬偽狂犬病和豬圓環(huán)病毒病、豬細(xì)小病毒病、豬病毒性腹瀉等仍是影響?zhàn)B豬業(yè)的主要疫病[3-5]。倪嬌等[6]對(duì)來(lái)自20個(gè)省市的病料調(diào)查結(jié)果顯示，CSFV陽(yáng)性率為43.21%、PRRSV陽(yáng)性率為64.10%、PCV2陽(yáng)性率為89.69%、PRV陽(yáng)性率為38.67%。楊漢春等對(duì)不同地區(qū)規(guī)?；i場(chǎng)死亡豬只57份病料的檢測(cè)結(jié)果顯示，豬繁殖與呼吸綜合征和豬圓環(huán)病毒2型二重感染占54.4%（31/57），豬繁殖與呼吸綜合征和豬偽狂犬病二重感染占10.5%（6/57），豬圓環(huán)病毒2型與豬偽狂犬病的二重感染占14%（8/57），豬繁殖和呼吸綜合征、豬圓環(huán)病毒2型和豬偽狂犬病的三重感染占10.5%（6/57）。田小艷等[7]對(duì)廣東豬場(chǎng)樣品的檢測(cè)結(jié)果顯示，PEDV陽(yáng)性率為33.7%，PRoV陽(yáng)性率為20%，TGEV陽(yáng)性率為4.2%。田云等[8]為進(jìn)一步確診導(dǎo)致豬群腹瀉疫病的病原，對(duì)236份腸道和糞便樣品進(jìn)行PEDV、TGEV和PRoV病原學(xué)檢測(cè)，結(jié)果236份樣品PEDV的陽(yáng)性率為33.05%，PRoV的陽(yáng)性率為17.8%，未檢測(cè)到TGEV。故有學(xué)者認(rèn)為，當(dāng)前造成生豬病毒性腹瀉的最主要病原是PEDV，本研究也證實(shí)了這一點(diǎn)。豬群腹瀉的發(fā)生與豬場(chǎng)的生物安全狀況有一定的相關(guān)性。部分豬場(chǎng)衛(wèi)生環(huán)境較差，飼養(yǎng)管理措施不到位，消毒不嚴(yán)格，特別是產(chǎn)房消毒不徹底是導(dǎo)致腹瀉發(fā)生的重要原因之一。本次的調(diào)查結(jié)果顯示，散養(yǎng)場(chǎng)（戶）發(fā)病率高于規(guī)模場(chǎng)，混合感染問(wèn)題嚴(yán)重。在養(yǎng)豬過(guò)程中養(yǎng)豬戶需更新養(yǎng)殖理念，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理與衛(wèi)生消毒措施，規(guī)范引種和隔離措施，加強(qiáng)生物安全體系建設(shè)，及時(shí)采用有效的檢測(cè)方法以便及時(shí)了解豬場(chǎng)發(fā)病情況，做到早發(fā)現(xiàn)早預(yù)防，特別是定期開(kāi)展疫病監(jiān)測(cè)對(duì)疾病的防控有指導(dǎo)意義。

[1]于新友，李天芝，沈志強(qiáng).實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)在豬病防控中的應(yīng)用[J].養(yǎng)豬，2016（1）:126-128.

[2]孫友德，王玉東，張學(xué)忍.當(dāng)前主要豬病的流行趨勢(shì)及流行原因分析[J].山東畜牧獸醫(yī)，2010（10）：33-35.

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[4]萬(wàn)遂如.2009年我國(guó)主要豬病流行概況與防控對(duì)策[J].養(yǎng)豬，2009（6）：49-54.

[5]崔尚金.2005年我國(guó)豬病流行現(xiàn)狀及特點(diǎn)[J].豬業(yè)科學(xué)，2006（1）：34-35.

[6]倪嬌，隋軍鋒，焦連國(guó)，等.4種病毒性豬病流行病學(xué)調(diào)查與分析[J].中國(guó)獸藥雜志，2012，46（6）：8-10.

[7]田小艷，孫華，鄧雨修，等.3種致豬腹瀉病毒的多重RT-PCR檢測(cè)[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2009，30（9）：54-57.

[8]田云，孫彥偉，王福廣，等.2012年廣東豬群腹瀉流行病學(xué)調(diào)查[J].廣東畜牧獸醫(yī)科技，2015，40（3）：19-22.

（編輯：柳青）

S

A

1002-1957(2016)03-0121-02

2016-03-01

山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系生豬產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目（SDAIT-06-022-15）；山東省自然科學(xué)基金青年基金項(xiàng)目（ZR2013 CQ006）；山東省自然科學(xué)基金青年基金項(xiàng)目（ZR2014CQ010）

李天芝（1985-），女，山東菏澤人，助理研究員，碩士，主要從事動(dòng)物傳染病診斷與防控研究.E-mail：517493935@qq.com