田 耕 騰 河 李 芳 呼 和 張國(guó)威 呂 廣

(內(nèi)蒙古民族大學(xué)醫(yī)學(xué)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000)

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頭頸部鱗狀上皮細(xì)胞癌組織中連接黏附分子A的表達(dá)及意義

田 耕 騰 河 李 芳1呼 和 張國(guó)威 呂 廣

(內(nèi)蒙古民族大學(xué)醫(yī)學(xué)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000)

目的 探討連接黏附分子A(JAM-A)在頭頸部鱗狀上皮細(xì)胞癌組織中的表達(dá)及其意義。方法 選取22例原發(fā)于頭頸部的鱗狀上皮細(xì)胞癌組織及20例頭頸部健康的上皮組織。采用蛋白質(zhì)印跡方法檢測(cè)各樣本組織中JAM-A蛋白的表達(dá)。結(jié)果 對(duì)照組及鱗狀上皮細(xì)胞癌組織中均有一定水平JAM-A的表達(dá)。但鱗狀上皮細(xì)胞癌組織中JAM-A表達(dá)顯著高于對(duì)照組。結(jié)論 JAM-A在頭頸部鱗狀上皮細(xì)胞癌組織中高度表達(dá)。JAM-A過度表達(dá)可能參與了頭頸部鱗狀上皮細(xì)胞癌組織的細(xì)胞增殖及轉(zhuǎn)移。

鱗狀上皮細(xì)胞腺；連接黏附分子A

連接黏附分子(JAM)-A屬于免疫球蛋白IgG的超家族，是上皮細(xì)胞和內(nèi)皮屏障功能相關(guān)的緊密連接分子之一。相關(guān)研究表明，JAM-A的表達(dá)也與惡性腫瘤，如乳腺癌，肺癌和胰腺癌的增殖和轉(zhuǎn)移密切相關(guān)〔1〕。然而目前，對(duì)于JAM-A在頭頸部鱗狀上皮細(xì)胞癌中的表達(dá)及細(xì)胞增殖、腫瘤遷移等方面未見相關(guān)研究。本研究擬通過免疫印跡檢測(cè)對(duì)照組織及鱗狀上皮細(xì)胞癌組織中JAM-A蛋白表達(dá)差異，探討JAM-A在頭頸部鱗狀上皮細(xì)胞癌增殖及轉(zhuǎn)移的作用機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 病例資料 內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院2011年3月至2012年3月，經(jīng)病理診斷為鱗狀上皮細(xì)胞癌的頭頸部惡性腫瘤22例，中位年齡65.2歲。女10例，男12例。所有病例術(shù)前均未接受過放射治療。年齡：>60歲15例，≤60歲7例，原發(fā)部位：喉7例，口咽及舌8例，下咽7例，臨床分期：T1+T2 10例，T3+T4 12例。選取手術(shù)獲得的正常鼻咽組織，軟腭組織及扁桃體組織共20例作為對(duì)照組織。結(jié)合超聲結(jié)果及術(shù)后病理結(jié)果進(jìn)行臨床分期判定。

1.2 蛋白質(zhì)印跡方法 將健康對(duì)照組織及頭頸部鱗狀上皮細(xì)胞癌組織標(biāo)本加入RIPA細(xì)胞裂解液，隨后加入基甲基磺酸氟(PMSF)，在干冰上進(jìn)行超聲裂解。離心后檢測(cè)蛋白含量，獲得蛋白質(zhì)樣品。然后將蛋白樣品進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)。將電泳結(jié)果進(jìn)行轉(zhuǎn)膜，封閉。以1∶1 000鼠抗人JAM-A抗體對(duì)完成轉(zhuǎn)膜后的PVDF膜進(jìn)行孵育，1∶500辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的兔抗鼠IgG二抗反應(yīng)，同時(shí)加入HRP標(biāo)記的抗甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)單抗，采用化學(xué)發(fā)光試劑盒(康成生物)及X線膠片曝光，進(jìn)行成像分析。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS13.0軟件行t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

如圖1所示，對(duì)照組組織中JAM-A表達(dá)水平較低，頭頸部鱗狀上皮細(xì)胞癌組織中JAM-A表達(dá)顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。

圖1 兩組JAM-A的相對(duì)表達(dá)量

可見，頭頸部鱗狀上皮細(xì)胞癌組織中JAM-A表達(dá)上調(diào)有著重要意義，可能參與了頭頸部鱗狀上皮細(xì)胞癌組織的細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移。

3 討 論

JAM-A屬于一種跨膜蛋白，在維持正常組織連接結(jié)構(gòu)以及創(chuàng)傷的修復(fù)中有著重要作用。近來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，JAM-A還參與了炎癥反應(yīng)、免疫應(yīng)答以及腫瘤浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移等多種人體內(nèi)病理生理過程〔2〕。JAM-A結(jié)構(gòu)上包括跨膜結(jié)構(gòu)和胞外的兩個(gè)V型的具有識(shí)別結(jié)合功能的結(jié)構(gòu)域,執(zhí)行多種重要的生物學(xué)功能。有關(guān)JAM-A在包括肺癌等不同惡性腫瘤細(xì)胞增殖及轉(zhuǎn)移中作用的研究近來(lái)較多〔3〕。本研究發(fā)現(xiàn)JAM-A蛋白的高表達(dá)在頭頸部鱗癌組織中，包括口咽、喉和下咽。這些結(jié)果表明，JAM-A是頭頸部惡性腫瘤重要的生物標(biāo)記物，可能有助于頭頸部惡性腫瘤的早期診斷。此外，JAM-A的過度表達(dá)可能參與了GATA-3細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)通路的調(diào)節(jié)，進(jìn)一步參與了鱗狀上皮細(xì)胞癌的細(xì)胞增殖及轉(zhuǎn)移〔4〕。由此可見，JAM-A也是潛在的頭頸部鱗狀細(xì)胞癌組織可能的分子靶向治療靶點(diǎn)。

1 Zhao C,Lu F,Chen H,etal.Dysregulation of JAM-A plays an important role in human tumor progression〔J〕.Int J Clin Exp Pathol,2014;7(10):7242-8.

2 Ohta H,Chiba S,Ebina M,etal.Altered expression of tight junction molecules in alveolar septa in lung injury and fibrosis〔J〕.Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol,2012;302(2):L193-205.

3 Mitchell LA,Ward C,Kwon M,etal.Junctional adhesion molecule A promotes epithelial tight junction assembly to augment lung barrier function〔J〕.Am J Pathol,2015;185(2):372-86.

4 周 童，仵敏娟.連接黏附分子A的研究進(jìn)展〔J〕.生命科學(xué),2013;25(9):865-70.

〔2015-12-17修回〕

(編輯 袁左鳴)

田 耕(1968-)，男，實(shí)驗(yàn)師，主要從事解剖學(xué)、免疫學(xué)研究。

R73

A

1005-9202(2016)22-5636-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.22.065

1 內(nèi)蒙古民族大學(xué)附屬醫(yī)院