呂紅瓊 謝 玲 倪明立

(鄭州大學(xué)附屬洛陽中心醫(yī)院腫瘤二科，河南 洛陽 471000)

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肺鱗癌中磷脂酶Cε和核因子-κB p65的表達及意義

呂紅瓊 謝 玲 倪明立

(鄭州大學(xué)附屬洛陽中心醫(yī)院腫瘤二科，河南 洛陽 471000)

目的 應(yīng)用免疫組化方法檢測肺鱗癌術(shù)后組織中磷脂酶Cε1(PLCE1)、核因子(NF)-κB p65的表達，探討其臨床價值。方法 63例行肺鱗癌根治手術(shù)患者的臨床資料及術(shù)后蠟塊組織作為研究組，無腫瘤的支氣管斷端22例作為對照組。應(yīng)用免疫組化方法檢測兩組中PLCE1和NF-κB p65的表達。結(jié)果 研究組PLCE1和NF-κB p65表達的陽性率明顯高于對照組。研究組PLCE1和NF-κB p65的表達均與分化程度、腫瘤最大徑和增殖細胞核抗原(PCNA)標記的增殖指數(shù)密切相關(guān)。研究組NF-κB p65的表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移明顯相關(guān)性，而PLCE1與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無明顯相關(guān)性。相關(guān)分析顯示研究組PLCE1和NF-κB p65的表達無相關(guān)性。結(jié)論 肺鱗癌術(shù)后組織中PLCE1和NF-κB p65高表達，二者對腫瘤的形成和進展可能具有一定作用。PLCE1和NF-κB p65之間無明顯協(xié)同作用。

肺鱗癌；磷脂酶Cε(PLCE)1；核因子(NF)-κB p65；免疫組化

肺鱗癌病變的形成與多種蛋白表達失調(diào)有關(guān)。磷脂酶Cε1(PLCE1)是PLC基因編碼的一種正向同源蛋白，是磷脂酰肌醇信號通路中的關(guān)鍵酶〔1,2〕；近年研究發(fā)現(xiàn)其在腫瘤中異常表達，可能對腫瘤的多種功能有一定的調(diào)節(jié)作用〔3,4〕。核因子(NF)-κB p65的異常表達對促進腫瘤進展有一定作用〔5,6〕。本研究觀察肺鱗癌中PLCE1和NF-κB p65的表達，分析其臨床價值及相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2012年1月至2015年12月我院行肺鱗癌根治手術(shù)的患者作為研究組，共63例，術(shù)后留取蠟塊組織，臨床資料完整。其中男34例，女29例；年齡43～85歲，平均61.3歲。均經(jīng)再次切片并經(jīng)病理醫(yī)師證實。無腫瘤的支氣管斷端的22例黏膜組織作為對照組，其中男11例，女11例；年齡46～78歲，平均59.8歲。兩組常規(guī)資料無明顯差別。

1.2 免疫組化方法檢測PLCE1和NF-κB p65的表達 應(yīng)用免疫組化SP法進行檢測，應(yīng)用二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色，操作中做好質(zhì)量控制工作。

1.3 PLCE1和NF-κB p65結(jié)果判定方法 PLCE1和NF-κB p65的陽性定位在細胞質(zhì)，選擇上皮細胞集中且染色密集的區(qū)域進行觀察，共選擇5個高倍視野(400倍)。陽性根據(jù)以下兩個方面：①陽性細胞數(shù)：<5%為0分；5%～25% 1分，26%～50% 2分，51%～75% 3分，≥76% 4分。②染色強度：無色為0分，淺棕黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。兩者相乘作為最終判定結(jié)果。0～4分為陰性，5～12分為陽性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SAS6.12統(tǒng)計軟件進行χ2檢驗、線性相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1 兩組中PLCE1和NF-κB p65表達的比較 兩組中PLCE1和NF-κB p65表達的陽性率差別有統(tǒng)計學(xué)意義。見表1。

表1 兩組中PLCE1和NF-κB p65表達的比較〔n(%)〕

2.2 研究組中PLCE1和NF-κB p65在不同臨床特征中的比較 研究組中PLCE1和NF-κB p65的表達均與分化程度、腫瘤最大徑和增殖細胞核抗原(PCNA)標記的增殖指數(shù)密切相關(guān)。研究組中NF-κB p65的表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，而PLCE1與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無明顯相關(guān)性。見表2。

表2 研究組中PLCE1和NF-κB p65在不同臨床特征中的比較〔n(%)〕

2.3 研究組中PLCE1和NF-κB p65的相關(guān)性 研究組中PLCE1和NF-κB p65的表達無明顯相關(guān)性(P>0.05)。

3 討 論

肺鱗癌是最具代表性的多發(fā)生于吸煙人群的惡性腫瘤。目前的研究對鱗癌分子病理學(xué)改變及相關(guān)調(diào)控蛋白的認識遠遠落后于腺癌〔7〕。近來研究已發(fā)現(xiàn)了少數(shù)具有潛在臨床指導(dǎo)意義基因和蛋白〔8〕。PLCE1是磷脂酶C家族的一種同工酶，具有位于C端的RAS結(jié)構(gòu)域和位于N端的CDC25結(jié)構(gòu)域〔9,10〕。PLCE1其激活后可能在胞膜到胞核的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中發(fā)揮作用，并有效調(diào)節(jié)細胞的生長、分化和增殖，同時細胞骨架也有一定的影響〔11,12〕。有研究認為PLCE1能通過催化多磷酸肌醇如磷脂酰肌醇4,5-二磷酸鹽水解，產(chǎn)生第二信使三磷酸肌醇和二脂酰甘油，促進鈣離子從細胞內(nèi)釋放，并能引起蛋白激酶C的過度表達，實現(xiàn)細胞信號的轉(zhuǎn)導(dǎo)，調(diào)控基因的表達〔13,14〕。NF-κB最初是從B細胞核的抽提物中發(fā)現(xiàn)的免疫球蛋白，是Rel蛋白家族的成員，其家族共有5個成員，包括P65、RelB、C-Rel、P50/P105、P52/P100，這些蛋白質(zhì)都有一個大約由300個氨基酸組成的氨基末端〔15,16〕。NF-κB p65是家族中的典型功能蛋白，也是轉(zhuǎn)錄復(fù)合體。有研究認為NF-κB p65結(jié)合位點可以接受多種免疫刺激，并通過一個或多個信號途徑激活蛋白激酶，同時激活相關(guān)級聯(lián)基因〔17〕。NF-κB p65在部分腫瘤中高表達〔5〕。 本研究提示PLCE1和NF-κB p65異常表達可以促進腫瘤的發(fā)生。肺鱗癌的發(fā)生與腺上皮的鱗化有關(guān)，鱗化主要源于多種外源性刺激，如吸煙、粉塵吸入等，腺上皮鱗化后，上皮異型增生，發(fā)生鱗癌，此過程伴有PLCE1和NF-κB p65異常表達的調(diào)節(jié)。本文結(jié)果提示PLCE1和NF-κBp65二者參與腫瘤的分化進程、腫瘤生長及細胞增殖〔18,19〕。PLCE1包含幾種Ras的結(jié)合區(qū)，此區(qū)域可以結(jié)合Ras家族的小G蛋白，成為GTP的效應(yīng)器，進而有效地調(diào)節(jié)腫瘤細胞的增殖、分化、凋亡和血管再生〔20〕。分化是腫瘤內(nèi)在的因素，因此二者高表達可以在一定程度上阻止細胞的成熟進程，腫瘤處于幼稚分化的某一階段，此時腫瘤細胞異型性增加，腫瘤失控性增生明顯，腫瘤處于活躍狀態(tài)中。NF-κB p65異常表達可能是轉(zhuǎn)移相關(guān)的蛋白，而PLCE1可能與轉(zhuǎn)移的關(guān)系不明顯。Cui等〔21〕認為PLCE1上調(diào)后可以促進NF-κB p65的高表達，二者是否具有協(xié)同作用可能與腫瘤的特異性有關(guān)。也有研究認為PLCE1可能與P53等基因表達的作用具有相關(guān)性〔22〕，但是PLCE1的具體調(diào)節(jié)有待更多實驗證實。

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〔2015-03-25修回〕

(編輯 苑云杰)

呂紅瓊(1978-)，女，碩士，主治醫(yī)師，主要從事惡性腫瘤研究。

R734

A

1005-9202(2016)22-5626-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.22.060