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        中藥特征圖譜技術(shù)在中藥鑒定中的應(yīng)用

        2016-12-17 07:25:35張偉毅
        北方藥學(xué) 2016年10期
        關(guān)鍵詞:山藥圖譜光譜

        張偉毅

        (廣東省羅定市中醫(yī)院羅定527200)

        中藥特征圖譜技術(shù)在中藥鑒定中的應(yīng)用

        張偉毅

        (廣東省羅定市中醫(yī)院羅定527200)

        目的:分析討論中藥的特征圖譜技術(shù)對于不同種類的中藥的真?zhèn)?、?yōu)劣和產(chǎn)地等鑒定的實(shí)際應(yīng)用。方法:搜集關(guān)于特征圖譜技術(shù)的研究資料并且統(tǒng)計(jì)在不同種類的中藥的鑒定中的準(zhǔn)確率。結(jié)果:特征圖譜的鑒別法準(zhǔn)確率較高,且不受中藥呈現(xiàn)的形態(tài)及部位的影響。結(jié)論:研究人員需要加強(qiáng)特征圖譜技術(shù)與計(jì)算機(jī)軟件的開發(fā),構(gòu)建較為完善的中藥特征圖譜的數(shù)據(jù)庫,使其在中藥鑒定中系統(tǒng)化和規(guī)范化,增加應(yīng)用的廣度和寬度。

        中藥特征圖譜技術(shù) 中藥鑒定 實(shí)際應(yīng)用

        伴隨生物科技和新型的化學(xué)儀器的產(chǎn)生與發(fā)展,中藥的特征圖譜技術(shù)日益完善,各種中藥的特征圖譜建立了相對全面的系統(tǒng)[1],為各類中藥準(zhǔn)確快速的鑒別提供了依據(jù)。中藥的特征圖譜技術(shù)是中藥在經(jīng)過比較特殊的前期加工和處理后,經(jīng)儀器檢測出其中含有的特定成分的特征圖譜,并與已知確定的數(shù)據(jù)庫中的中藥圖譜進(jìn)行對照分析,從而判斷其真?zhèn)蔚亩康蔫b別技術(shù)手段[2]。該技術(shù)的鑒別效率高,穩(wěn)定性高,實(shí)際的應(yīng)用廣泛,共包括生物與化學(xué)兩種特征圖譜[3]。生物的特征圖譜是應(yīng)用分子的標(biāo)記技術(shù)檢驗(yàn)各類中藥的遺傳學(xué)特性,化學(xué)的特征圖譜是應(yīng)用液相色譜技術(shù)和光譜技術(shù)檢測各類中藥的化學(xué)特征[4]。

        1 中藥的生物特征圖譜的應(yīng)用

        生物的特征圖譜包括蛋白質(zhì)電泳與DNA兩類特征圖譜,在中藥的鑒別方面DNA圖譜的應(yīng)用效率更高,范圍更廣[3]。DNA的特征圖譜是按照每種生物特有的DNA序列的特征進(jìn)行區(qū)分,使用先進(jìn)的生物技術(shù),以具備特異性的DNA顯示該圖譜。DNA排序的信息量極大,而且其序列是單獨(dú)唯一而且穩(wěn)定的,這種鑒別方法不被生物生長發(fā)育形態(tài)的改變以及鑒別部位的不同等外在的因素影響。該種鑒別方法不但能夠鑒別中藥的物種的類別,而且可以從獲取的DNA序列中判斷中藥是否出現(xiàn)變異,防止變異的中藥的潛在危害??傊?,DNA的特征圖譜在中藥的鑒別中的效率較高,其應(yīng)用前景廣闊。

        1.1隨機(jī)擴(kuò)增DNA的應(yīng)用:隨機(jī)擴(kuò)增性的DNA技術(shù)是采取合成的方法在低溫條件中,隨機(jī)應(yīng)用一個(gè)引物配對擴(kuò)增DNA序列的模板,從而獲取某種中藥的DNA特征圖譜[4],最后對圖譜結(jié)果的基因進(jìn)行動(dòng)態(tài)整合研究。研究人員應(yīng)用該技術(shù)獲取植物類中藥厚樸的DNA特征圖譜,然后憑借檢測結(jié)果的DNA條帶的特征完全準(zhǔn)確地區(qū)分出偽品厚樸和易混淆厚樸。該技術(shù)進(jìn)行中藥的鑒別的誤差較小,準(zhǔn)確性較高,在中藥鑒別中的應(yīng)用非常廣泛,能有效地鑒別各類中藥的真假。

        1.2直接測序法的應(yīng)用:DNA的直接測序法是將從待檢測的中藥中獲取的少量的DNA的樣本使用PCR擴(kuò)增技術(shù)增加其數(shù)量,然后將擴(kuò)增后的DNA使用DNA電泳及DNA染色技術(shù)進(jìn)行標(biāo)記,通過紫外燈進(jìn)行照射觀察檢測擴(kuò)增后的DNA的特征條帶,再用Sanger的末端終止法檢測出DNA的序列,分析比較待檢的中藥與真實(shí)中藥、偽造中藥的特征[5]。該方法常選取的序列有12Sr RNA、18sr RNA以及26sr RNA,常用來判斷中藥的真假。研究人員應(yīng)用該技術(shù)采集到我國包括懷山藥在內(nèi)的幾種不同產(chǎn)地的山藥的12Sr RNA,檢測并比較各自的序列后準(zhǔn)確地鑒別出不同的品種[4]。因此,DNA的直接測序法還可區(qū)分近源異種植物類中藥,用于辨別中藥的產(chǎn)地。

        2 中藥的化學(xué)特征圖譜的應(yīng)用

        化學(xué)特征圖譜技術(shù)是指在中藥鑒別的操作過程中,利用多種先進(jìn)的化學(xué)儀器、方法與統(tǒng)計(jì)學(xué)的分析軟件檢測分析中藥的不同組分的含量,根據(jù)不同種類中藥的特征峰峰值的面積、變化情況和比值等特性的差別,判斷中藥的真假、品種與產(chǎn)地[6]。該技術(shù)包括色譜技術(shù)與光譜技術(shù)兩種方法,色譜技術(shù)的鑒別方法最為常用[7],色譜技術(shù)的鑒別中最常用的、且準(zhǔn)確度最高的是高效液相色譜技術(shù)(HPLC)。該技術(shù)屬于封閉式的分析方法,受外界因素的干擾少,圖像的穩(wěn)定性高,應(yīng)用于中藥鑒別的準(zhǔn)確度高,分離及鑒別的效果好。研究人員應(yīng)用該技術(shù)判斷植物類中藥紅蓼中的化學(xué)物質(zhì)乙酸乙酯,結(jié)果真紅蓼的相似值超過了0.95,偽紅蓼都沒有達(dá)到0.9,鑒別真?zhèn)蔚男Ч@著[5]。光譜技術(shù)可分為紅外光譜技術(shù)與核磁共振光譜技術(shù),紅外光譜技術(shù)是中藥鑒別中較為常用的方法,將待檢中藥中的化學(xué)組分的紅外光譜進(jìn)行疊加,當(dāng)某種成分的含量穩(wěn)定時(shí),該光譜保持穩(wěn)定。研究人員應(yīng)用該技術(shù)不僅判斷中藥中待檢山藥的真?zhèn)?,還能鑒別山藥的優(yōu)劣等級[1]。

        3 問題與展望

        同傳統(tǒng)的依靠人工的鑒別經(jīng)驗(yàn)積累等中藥鑒別的手段相比,中藥的特征圖譜技術(shù)因其不被中藥的形態(tài)(粉末或切片等)、部位(根部或種子等)和中藥的數(shù)量多少干擾,準(zhǔn)確性與穩(wěn)定性均較高。但是在我國進(jìn)行中藥鑒別的現(xiàn)代化技術(shù)仍處在探索和研究階段,還沒有建立系統(tǒng)化的鑒別流程以及較為完整的中藥數(shù)據(jù)庫。為了推動(dòng)中藥的特征圖譜技術(shù)的完善,我們未來的研究重點(diǎn)應(yīng)集中在形成系統(tǒng)化的理論體系、開發(fā)優(yōu)質(zhì)的分類軟件以及建造特征圖譜的完整數(shù)據(jù)庫等幾個(gè)方面。

        [1]孫素琴,白雁.道地山藥紅外指紋圖譜和聚類分析的鑒別研究[J].光譜學(xué)與光譜分析,2013,23(12):258-261.

        [2]黃金春,陳世革,何報(bào)作,等.中藥葉形態(tài)-脈序圖譜鑒別法數(shù)據(jù)庫系統(tǒng)的構(gòu)建[J].世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化,2013,(9):1928-1932.

        [3]胡妮娜,田淑琴,于景偉,等.傳統(tǒng)中藥鑒定方法的研究發(fā)展概況[J].中醫(yī)藥信息,2012,21(3):789-791.

        [4]劉玉萍,何報(bào)作,曹暉.基因測序技術(shù)在中藥質(zhì)量研究中的應(yīng)用—山藥基原的DNA測序鑒[J].中草藥,2011,32(11):126-130.

        [5]李淼,樓一層,林鑫,等.紅蓼花、葉莖醋酸乙酯部位的高效液相色譜特征圖譜[J].中國醫(yī)院藥學(xué)雜志,2012,15(1):234-236.

        [6]朱秀卿,閻克里,趙麗.白術(shù)揮發(fā)油中極性和非極性成分的高效液相色譜法特征圖譜研究[J].中國藥物與臨床,2011,31(8):83-84.

        [7]張永鑫,劉曉,楊欣文,等.黃連4種飲片特征圖譜研究及生物堿含量測定[J].藥物分析雜志,2012,39(11):126-128.

        R284.1

        B

        1672-8351(2016)10-0155-01

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