楊世俊

楚雄州人民醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)科，云南楚雄 675000

囊胚培養(yǎng)及移植在體外受精周期中的應(yīng)用

楊世俊

楚雄州人民醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)科，云南楚雄 675000

目的 探討囊胚培養(yǎng)及移植在體外受精周期中的應(yīng)用。 方法 整群選取2012年1月—2014年12月期間來(lái)該院接受體外受精-胚胎移植的64例患者作為該次研究對(duì)象，按照選擇胚胎培養(yǎng)及移植時(shí)期的不同將64例體外受精-胚胎移植患者分成研究組和對(duì)照組，研究組為選擇囊胚期胚胎培養(yǎng)及移植的患者，共33例，對(duì)照組為選擇卵裂期胚胎培養(yǎng)及移植的患者，共31例。受精成功后采用G1進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)，采用G2進(jìn)行囊胚培養(yǎng)。 結(jié)果 兩組患者中各有1例消移植周期病例，實(shí)際移植周期數(shù)分別為32個(gè)和30個(gè)，研究組患者的胚胎植入率為37.1%，妊娠率為53.1%，與對(duì)照組患者的19.4%和33.3%比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。兩組患者的流產(chǎn)率和異位妊娠率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），但對(duì)照組患者的多胎率明顯高于研究組患者（P<0.05）。結(jié)論 選擇囊胚期胚胎培養(yǎng)及移植可有效提高胚胎植入率和妊娠率，降低不良妊娠結(jié)局發(fā)生率和移植周期取消率。

囊胚培養(yǎng)；移植；卵裂期；體外受精周期；胚胎植入率；妊娠結(jié)局

臨床研究發(fā)現(xiàn)胚胎植入率在較大程度上影響著體外受精-胚胎移植的成功率，如何有效提高體外受精胚胎植入率，一直以來(lái)都是我國(guó)臨床重點(diǎn)研究課題之一[1]。近年來(lái)伴隨著我國(guó)醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步，體外受精-胚胎移植技術(shù)在胚胎培養(yǎng)方面也取得了較大進(jìn)步，胚胎植入率也得到了明顯提高[2]。該院于2012年開(kāi)始進(jìn)行囊胚培養(yǎng)及移植周期研究，并整群選取2012年1月—2014年12月期間來(lái)該院接受體外受精-胚胎移植的64例患者作為研究對(duì)象，對(duì)囊胚培養(yǎng)及移植在體外受精周期中的應(yīng)用進(jìn)行了分析，現(xiàn)將所得結(jié)果做出以下整理報(bào)道，以期能為臨床對(duì)該項(xiàng)目進(jìn)行深入研究提供參考依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該次研究整群選取2012年1月—2014年12月期

間在該院接受體外受精-胚胎移植的64例患者作為研究對(duì)象，并按照選擇胚胎培養(yǎng)及移植時(shí)期的不同將64例患者分成研究組和對(duì)照組。

研究組33例患者為囊胚期胚胎培養(yǎng)及移植的患者，平均年齡為（31.9±1.1）歲，平均不孕時(shí)間為（5.4± 0.8）年。對(duì)照組31例患者為選擇卵裂期進(jìn)行胚胎培養(yǎng)及移植的患者，平均年齡為（31.5±1.3）歲，平均不孕時(shí)間為（5.5±0.7）年。兩組患者的臨床基本資料比較存在的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 研究方法

兩組患者入院后，該院對(duì)兩組患者實(shí)施相同的促排卵方案，具體促排卵方案為促性腺激素激動(dòng)劑、促卵泡素、尿促性腺激素、人絨毛膜促性腺激素長(zhǎng)周期促排卵。于兩組患者月經(jīng)周期1周后開(kāi)始檢測(cè)兩組患者卵泡發(fā)育情況，并根據(jù)患者卵泡發(fā)育的具體情況適當(dāng)調(diào)整促排卵方案，當(dāng)患者有2個(gè)直徑大于18 mm的卵泡時(shí)，給予患者注射人絨毛膜促性腺激素促進(jìn)排卵，于注射后34 h后經(jīng)陰道超聲取卵。

1.2.1 體外受精 成功取卵后進(jìn)行洗滌，并放入含有人血清白蛋白中的受精液中進(jìn)行培養(yǎng)，4 h后開(kāi)始授精，授精結(jié)束后16～18 h內(nèi)嚴(yán)密觀察受精卵情況，將其中正常的受精卵取出放入G1培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng)。

1.2.2 胚胎移植 取卵后3 h將卵子周?chē)念w粒細(xì)胞清除，根據(jù)卵子成熟情況進(jìn)行單精子顯微注射，然后放入G1培養(yǎng)液中培養(yǎng)，并分別于培養(yǎng)后第2天和第3天對(duì)胚胎質(zhì)量進(jìn)行評(píng)估。若胚胎胞質(zhì)顆粒形態(tài)規(guī)則或形態(tài)稍欠規(guī)則，分布均勻，卵裂速度適中，卵裂球均勻，且卵裂碎片小于20%則判定為優(yōu)質(zhì)胚胎。于受精后2～5 d上午從培養(yǎng)液中挑取2～3個(gè)優(yōu)質(zhì)胚胎進(jìn)行移植。受精后第3天對(duì)接受囊胚培養(yǎng)的患者進(jìn)行常規(guī)胚胎評(píng)估，若出現(xiàn)緊密連接，將G1培養(yǎng)液洗凈，放入G2培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)，從第5天起嚴(yán)密監(jiān)測(cè)囊胚形成情況。采用人類(lèi)囊胚分級(jí)系統(tǒng)對(duì)形成的囊胚進(jìn)行分級(jí)，并選擇2個(gè)或3個(gè)3期以上囊胚進(jìn)行移植，若培養(yǎng)后無(wú)3期以上囊胚，可適當(dāng)延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間，如仍無(wú)3期以上囊胚，則需放棄移植。于囊胚移植后14 d檢查患者是否妊娠，于移植35 d后采用影像學(xué)技術(shù)觀察胎心搏動(dòng)情況，明確患者妊娠結(jié)果。

1.3 觀察指標(biāo)

該次研究觀察兩組患者的胚胎植入率、妊娠率和妊娠結(jié)局。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

使用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)該次研究過(guò)程中所得研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，軟件版本為SPSS 21.0，胚胎植入率、妊娠率等計(jì)數(shù)型對(duì)比資料采用例數(shù)/百分比（n/%）表示，采用χ2進(jìn)行組間差異檢驗(yàn)，P＜0.05代表差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者的胚胎植入率比較

該次研究過(guò)程中研究組患者和對(duì)照組患者中均有1例患者取消移植周期，經(jīng)統(tǒng)計(jì)得出研究組患者的胚胎植入率為37.1%，明顯高于對(duì)照組患者的19.4%（P＜0.05），表1。

表1 2組患者的胚胎植入率比較

2.2 兩組患者的妊娠率比較

研究組未取消移植周期的32例患者中，共17例患者成功妊娠，妊娠率為53.1%，對(duì)照組未取消移植周期的30例患者中，共10例患者成功妊娠，妊娠率為33.3%。兩組患者的妊娠率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=7.836，P=0.004）。

2.3 兩組患者的妊娠結(jié)局比較

經(jīng)統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)兩組患者在流產(chǎn)率和異位妊娠率上存在的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），但對(duì)照組患者的多胎率明顯高于研究組患者（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 2組患者的妊娠結(jié)局對(duì)比分析

3 討論

囊胚培養(yǎng)及移植是人類(lèi)輔助生殖技術(shù)中的重要組成部分，如何提高接受人類(lèi)輔助生殖技術(shù)患者的妊娠率及安全性，已成為現(xiàn)階段我國(guó)臨床生殖醫(yī)學(xué)重點(diǎn)研究?jī)?nèi)容之一[3]。在我國(guó)臨床對(duì)人類(lèi)輔助生殖技術(shù)進(jìn)行研究的初期，多數(shù)研究者認(rèn)為在卵裂期進(jìn)行胚胎培養(yǎng)及移植可獲得較高的妊娠率，但近年來(lái)隨著臨床對(duì)人類(lèi)輔助生殖技術(shù)研究的不斷深入，研究者發(fā)現(xiàn)于囊胚期進(jìn)行胚胎培養(yǎng)和移植所獲得的胚胎植入率和妊娠率均明顯高于卵裂期胚胎培養(yǎng)和移植。出現(xiàn)這一結(jié)果的原因

是因?yàn)槟遗咴谛纬傻倪^(guò)程中，依次經(jīng)歷了細(xì)胞融合、囊胚腔出現(xiàn)及囊胚腔擴(kuò)張等形態(tài)變化，且在基因調(diào)控方面經(jīng)歷了由母型調(diào)節(jié)向胚胎型調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)變的過(guò)程，因此相對(duì)于卵裂期而言，囊胚器期胚胎具有更好的發(fā)育潛能。

該院該次針對(duì)囊胚培養(yǎng)及移植在體外受精周期中的應(yīng)用進(jìn)行了研究，研究過(guò)程中將囊胚期胚胎的培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)后發(fā)現(xiàn)，胚胎植入率和妊娠率分別為37.1%和53.1%，明顯高于卵裂期胚胎培養(yǎng)和移植的19.4%和33.3%。唐永梅等[4]在對(duì)“選擇性囊胚培養(yǎng)和移植的臨床應(yīng)用和效果分析”這一課題進(jìn)行研究時(shí)發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)第2天移植的胚胎植入率和妊娠率明顯低于培養(yǎng)第5天移植的胚胎植入率和妊娠率，與該院該次研究結(jié)果具有一致性。早期，傳統(tǒng)輔助生殖技術(shù)均于取卵后48～72 h之間進(jìn)行移植，盡管獲得了較高的受精率和卵裂率，但胚胎植入率卻難以超過(guò)15%[5-6]。分析出現(xiàn)上述問(wèn)題的原因，主要是由于胚胎在輸卵管內(nèi)發(fā)育至第5～6天時(shí)，囊胚才能移植至宮腔，而胚胎過(guò)早移植至宮腔內(nèi)，會(huì)導(dǎo)致胚胎發(fā)育和內(nèi)膜發(fā)育喪失協(xié)調(diào)性，故不能獲得較高的胚胎植入率。同時(shí)，該次研究還發(fā)現(xiàn)囊胚期進(jìn)行胚胎移植，胚胎發(fā)育與女性生理機(jī)能同步，此時(shí)移植女性宮腔內(nèi)粘液減少，便于醫(yī)師操作，且子宮收縮減少，可避免胚胎排出體外。此外，參與該院該次研究的64例患者中，共有2例患者取消移植周期，研究組和對(duì)照組各1例，2例患者的取消原因均為囊胚質(zhì)量不合格，其中1例患者受培養(yǎng)環(huán)境和卵子質(zhì)量的影響，另1例患者受男方因素的影響，由此可知人類(lèi)輔助生殖技術(shù)并不能確保所有患者均能獲得囊胚移植，這一觀點(diǎn)在汪彩珠[7]等的臨床研究中也有體現(xiàn)。該次研究?jī)山M患者的異位妊娠率和流產(chǎn)率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但對(duì)照組患者的多胎率相對(duì)較高。由此可知不同時(shí)期進(jìn)行胚胎培養(yǎng)及移植可對(duì)妊娠結(jié)局造成不同程度的影響。

總結(jié)該次研究結(jié)果得出于囊胚期進(jìn)行胚胎培養(yǎng)和移植，移植周期取消率低，可有效提高胚胎植入率和妊娠率，降低不良妊娠結(jié)局的發(fā)生率。同時(shí)也提示，對(duì)于由優(yōu)質(zhì)胚胎的患者，臨床應(yīng)優(yōu)先考慮囊胚培養(yǎng)及移植。

[1]周黎明.囊胚培養(yǎng)及移植在體外受精過(guò)程中的臨床應(yīng)用[J].現(xiàn)代實(shí)用醫(yī)學(xué),2008,20(7):553-554.

[2]劉艷麗,楊曉娜,許小燕,等.新鮮周期和復(fù)蘇周期囊胚培養(yǎng)及移植的臨床結(jié)局分析[J].鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版,2015(2): 264-267.

[3]唐永梅,韋繼紅,牟聯(lián)俊,等.不同受精方式對(duì)囊胚培養(yǎng)和移植結(jié)局的影響[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2014(14):2260-2262.

[4]唐永梅,韋立紅,韋繼紅,等.選擇性囊胚培養(yǎng)和移植的臨床應(yīng)用和效果分析[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2014(18):2958-2960.

[5]柳雪琴,檀大羨,王書(shū)佳,等.雙側(cè)輸卵管梗阻患者囊胚移植后的妊娠結(jié)局[J].臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2011,10(17):1348-1349.

[6]王榮,費(fèi)小陽(yáng),王麗卿,等.對(duì)廢棄胚胎行囊胚培養(yǎng)在體外受精-胚胎移植中的意義[J].浙江醫(yī)學(xué),2014(17):1447-1449.

[7]汪彩珠,馮貴雪,張波,等.不同受精方式對(duì)選擇性囊胚培養(yǎng)結(jié)局的影響[J].中華男科學(xué)雜志,2014,20(8):697-701.

Application of Embryo Culture and Transplanting in Blastocyst Stage in the In Vitro Fertilization Cycle

YANG Shi-jun
Department of reproductive medicine,Chuxiong People's Hospital,Chuxiong,Yunnan Province,675000 China

Objective To study the application of culture and transplanting in blastocyst stage in the in vitro fertilization cycle.Methods 64 cases of patients receiving in vitro fertilization-embryo transfer in our hospital from January 2012 to December 2014 were selected as the research object and divided into research group(33 cases)and control group(31 cases) according to the different embryo culture and transplanting stages,patients with embryo culture and transplanting in blastocyst stage were regarded as the research group,patients with embryo culture and transplanting in cleavage stage were regarded as the control group,after the successful fertilization,they received early embryo culture with G1 and blastocyst culture with G2.Results There was 1 case cancelling the transplanting cycle in each group,and the actual numbers of transplanting cycle of the two groups were respectively 32 and 30,the differences in the embryo implantation rate and the pregnancy rate between the two groups were statistically significant(37.1%vs 19.4%)(53.1%vs 33.3%) （P<0.05）,the differences in the abortion rate and ectopic pregnancy rate by comparison were not statistically significant（P>0.05）,however,the multiple pregnancy rate in the control group was obviously higher than that in the research group （P<0.05）.Conclusion Embryo culture and transplanting in blastocyst stage can effectively improve the embryo implantation rate and the pregnancy rate,and can reduce the incidence rate of adverse pregnancy outcome and transfer cycle cancellation rate.

Blastocyst culture;Transplanting;Cleavage Stage;In vitro fertilization cycle;Embryo implantation rate;Pregnancy outcome

R321

A

1674-0742（2016）01（a）－0099-03

10.16662/j.cnki.1674-0742.2016.01.099

2015-10-05）

楊世?。?969-），女，云南云縣人，本科，副主任醫(yī)師，主要從事婦科生殖內(nèi)分泌，輔助生殖技術(shù)及宮腹腔鏡微創(chuàng)手術(shù)方面的工作。