郭曉林劉文雪丁 慧郭世彪.濰坊醫(yī)學(xué)院，山東濰坊 26053；2.山東省濰坊市益都中心醫(yī)院內(nèi)分泌科，山東青州262500

原發(fā)性甲狀腺功能減退癥患者尿足細(xì)胞及腎小管相關(guān)指標(biāo)的變化

郭曉林1劉文雪1丁 慧1郭世彪2▲
1.濰坊醫(yī)學(xué)院，山東濰坊 261053；2.山東省濰坊市益都中心醫(yī)院內(nèi)分泌科，山東青州262500

目的 觀察原發(fā)性甲狀腺功能減退癥患者尿足細(xì)胞及腎小管相關(guān)指標(biāo)的變化，以了解甲狀腺功能減退對(duì)足細(xì)胞及腎小管的影響。方法 選取80例原發(fā)性甲狀腺功能減退癥患者作為觀察組（n=80），80例體檢健康者作為對(duì)照組（n=80）。兩組均監(jiān)測(cè)尿足細(xì)胞標(biāo)志蛋白Podocalyxin（PCX）、尿白蛋白（ALB）、尿N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶（NAG）、尿中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)轉(zhuǎn)載蛋白（NGAL）、尿可滴定酸（TA）、尿銨離子（NH4+）的含量，并對(duì)其含量的變化進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果 觀察組與對(duì)照組相比，尿PCX/CR、ALB/ CR均有所偏高（P＜0.05）；尿NAG/CR、NGAL/CR均明顯為高（P＜0.01）；而TA和NH4+相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論 原發(fā)性甲狀腺功能減退癥患者足細(xì)胞及近端腎小管均有不同程度的損傷，但遠(yuǎn)端小管損傷不明顯。

原發(fā)性甲狀腺功能減退癥；腎小管；尿足細(xì)胞；標(biāo)志蛋白

甲狀腺功能減退癥是內(nèi)分泌科常見(jiàn)疾病，主要表現(xiàn)為甲狀腺釋放到血液中的甲狀腺素減少或甲狀腺素抵抗[1-2]，而引起的全身代謝紊亂性疾病。其中原發(fā)性甲狀腺功能減退占絕大多數(shù)，中樞性或周圍性甲減較少見(jiàn)。甲狀腺功能減退會(huì)導(dǎo)致全身多系統(tǒng)、多器官的功能紊亂。Gopinath等[3]研究報(bào)道，甲狀腺激素水平低下對(duì)腎臟產(chǎn)生不利影響，甚至導(dǎo)致腎功能減退，出現(xiàn)蛋白尿。Levey Andrew等的研究[4-5]均發(fā)現(xiàn)蛋白尿與足細(xì)胞損傷相關(guān)。目前國(guó)內(nèi)甲狀腺功能減退對(duì)腎小球損傷研究較多[6]，但對(duì)足細(xì)胞及腎小管的影響報(bào)道較少，為此我們觀察了原發(fā)性甲狀腺功能減退癥患者尿足細(xì)胞及腎小管相關(guān)指標(biāo)的變化，以期了解原發(fā)性甲狀腺功能減退癥患者對(duì)尿足細(xì)胞及腎小管的損傷情況。

1　資料與方法

1.1一般資料

觀察組選取2015年2月～2016年1月于本院收治的原發(fā)性甲狀腺功能減退癥患者80例，其中男20例，女60例，年齡20～60歲，平均（44±10.5）歲。入選標(biāo)準(zhǔn)：（1）甲狀腺功能減退癥診斷均符合甲狀腺功能減退的診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]；（2）實(shí)驗(yàn)室檢查TSH升高、FT4降低、FT3正?；蚪档?。對(duì)照組80例，年齡20～75歲，平均（46±8.5）歲，其中男42例，女38例，全部為同期我院體檢健康者（無(wú)甲狀腺疾病、甲功正常）。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）腎病綜合征、各種腎小球腎炎、糖尿病腎病、高血壓腎病、狼瘡性腎炎、泌尿系感染等腎臟疾病；（2）嚴(yán)重高血壓、心肌梗死等心腦血管疾??；（3）垂體、下丘腦等內(nèi)分泌疾病。觀察組與對(duì)照組一般資料指標(biāo)的比較均無(wú)明顯差異（P＞0.05）。

1.2觀察方法

觀察與對(duì)照兩組，在24h內(nèi)無(wú)劇烈運(yùn)動(dòng)情況下，清晨留取中段尿液 10mL，2000r/min 離心10min，棄上清后留取尿沉渣，檢測(cè)尿足細(xì)胞標(biāo)志蛋白Podocalyxin（PCX）、白蛋白（ALB）、N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶（N-acetyl-β-D-glucosaminidase，NAG）、中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂 質(zhì) 轉(zhuǎn) 載 蛋 白（neutrophil gelatinase-associated lipocalin，NGAL），測(cè)定結(jié)果以相同尿液標(biāo)本的尿肌酐值（CR）進(jìn)行校正,同時(shí)測(cè)尿可滴定酸（titratable acid，TA）、尿銨離子（NH4+）的含量。

1.3儀器與試劑

1.3.1尿足細(xì)胞標(biāo)志蛋白PCX定量采用ELISA法，使用美國(guó)生產(chǎn)的Micro Reder 4型酶標(biāo)儀，上海越研生物科技有限公司提供試劑盒。

1.3.2尿ALB、CR采用比色法，由日本的日立7600型生化檢測(cè)儀檢測(cè)。

1.3.3尿NAG、NGAL應(yīng)用ELISA法，用美國(guó)生產(chǎn)的Micro Reder 4型酶標(biāo)儀，上海太陽(yáng)公司提供試劑盒。

1.3.4尿TA、NH4+由上海醫(yī)療設(shè)備廠的ZD-2型自動(dòng)電位滴定儀檢測(cè)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用樣本（）表示，兩組間比較采用兩均數(shù)樣本的t檢驗(yàn)。以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1觀察組與對(duì)照組尿PCX/CR及ALB/CR變化比較

觀察組與對(duì)照組相比，觀察組PCX/CR及ALB/ CR較對(duì)照組明顯升高，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1　兩組患者治療前后尿PCX/CR及ALB/CR 的變化比較

表1　兩組患者治療前后尿PCX/CR及ALB/CR 的變化比較

組別　n　PCX/CR　ALB/CR觀察組　80　4.01±1.59　31.78±8.59對(duì)照組　80　3.42±1.41　28.44±9.72 t 2.483　2.303 P＜0.05　?。?.05

2.2觀察組與對(duì)照組尿NAG/CR及NGAL/CR變化比較。

觀察組與對(duì)照組相比，觀察組尿NAG/CR及NGAL/CR較對(duì)照組明顯升高，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。見(jiàn)表2。

表2　觀察組與對(duì)照組尿NAG/CR及NGAL/CR的變化比較

表2　觀察組與對(duì)照組尿NAG/CR及NGAL/CR的變化比較

組別　n　NAG/CR 　NGAL/CR觀察組　80　45.91±14.66　6.92±3.31對(duì)照組　80　38.42±15.90　5.49±2.71 t 3.098　2.990 P＜0.01　?。?.01

2.3觀察組與對(duì)照組尿TA及NH4+變化比較。

觀察組與對(duì)照組相比，兩組的尿TA及NH4+差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表3。

表3　觀察組與對(duì)照組尿TA及NH4+的變化比較

表3　觀察組與對(duì)照組尿TA及NH4+的變化比較

組別　n　TA　NH4+觀察組　80　23.14±8.54　28.39±12.56對(duì)照組　80　25.06±9.65　31.13±11.65 t 1.333　1.431 P＞0.05　　＞0.05

3　討論

原發(fā)性甲狀腺功能減退癥是臨床上常見(jiàn)的內(nèi)分泌疾病，常引起全身多個(gè)系統(tǒng)功能紊亂。在泌尿系統(tǒng)中，可引起腎功能減退，甚至腎小球過(guò)率降低[8]，具體的機(jī)制大致有以下幾個(gè)方面。（1）高脂血癥：甲狀腺功能減退患者脂代謝紊亂[9]，血液中總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、載脂蛋白B、脂蛋白α升高，導(dǎo)致體內(nèi)的一些促炎癥因子被激活，及脂質(zhì)過(guò)氧化增強(qiáng)，兩者共同造成損傷腎臟。腎臟血循環(huán)中的一氧化氮合酶在高膽固醇血癥時(shí)，活性下降，引起腎小球損傷。（2）動(dòng)脈粥樣硬化：甲狀腺功能減退時(shí)，脂質(zhì)代謝紊亂及高血壓兩者共同損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，引起腎血管動(dòng)脈粥樣硬化[10]。（3）細(xì)胞因子：甲狀腺功能減退患者，腎臟缺血，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β增加，促進(jìn)了腎臟的纖維化。（4）腎灌注減少：甲狀腺功能減退引起黏液性水腫時(shí)，有效循環(huán)血量減少，RAS系統(tǒng)激活，加重腎臟的缺血損傷。（5）自身免疫因素：原發(fā)性甲狀腺功能減退患者中，可檢出甲狀腺球蛋白抗體、甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體及甲狀腺微粒體抗體等，其可形成原位免疫復(fù)合物及循環(huán)免疫復(fù)合物，引起腎臟損傷。

孫珉丹等[11-12]的研究報(bào)道，甲狀腺功能異常引起的腎臟損傷，其病理類型以膜性腎病及微小病變型腎病為最多見(jiàn)，可能與足細(xì)胞損傷有關(guān)[13]。足細(xì)胞是在腎小球基底膜外附著的分化細(xì)胞，是腎小球?yàn)V過(guò)膜重要的組成部分，表面覆蓋著濾過(guò)裂隙膜，能抵抗腎小球內(nèi)的壓力，維持腎小球基底膜的結(jié)構(gòu)和功能[14]，極易受到損害。PCX是位于足細(xì)胞的胞膜和裂隙膜表面的唾液酸糖蛋白，能阻止大分子蛋白濾過(guò)[15]，是足細(xì)胞的標(biāo)志蛋白。當(dāng)足細(xì)胞受到損傷時(shí)，尿液中PCX的含量明顯增加。在生理狀態(tài)下，尿液中的白蛋白極少，腎小球的濾過(guò)膜損傷時(shí)，尿液中的白蛋白會(huì)明顯增加，臨床上通過(guò)檢測(cè)尿微量白蛋白來(lái)發(fā)現(xiàn)腎臟的損傷，白蛋白尿的發(fā)生與足細(xì)胞損傷明顯相關(guān)[4-5]。本臨床研究發(fā)現(xiàn)，原發(fā)性甲狀腺功能退癥患者的PCX及ACR比正常者明顯升高（P＜0.05），表明甲狀腺功能低下會(huì)造成足細(xì)胞的損傷引起蛋白尿。

NAG是一種細(xì)胞內(nèi)的溶酶體酶，存在于腎近端小管，正常時(shí)，NAG由腎小管上皮細(xì)胞向尿中分泌極少，尿中可測(cè)到微量NAG，血液中的NAG不能被腎小球?yàn)V過(guò)，因此尿液中的NAG為判斷腎小管損傷的指標(biāo)。NGAL最早是在激活中性粒細(xì)胞被發(fā)現(xiàn)的一種分泌性蛋白，調(diào)控腎臟細(xì)胞的生理活動(dòng)。NGAL表達(dá)于近曲小管，正常生理狀態(tài)時(shí)，腎臟很少表達(dá)NGAL，當(dāng)腎小管上皮細(xì)胞受損時(shí)，尿液中的NGAL濃度迅速升高，現(xiàn)代研究表明 NGAL是診斷近端腎小管的生物標(biāo)志物之一[16]。本臨床研究顯示，原發(fā)性甲狀腺功能減退患者的NAG及NGAL比正常者明顯升高（P＜0.01），表明甲狀腺功能低下可引起近端腎小管的損傷。

尿TA和NH4+主要由遠(yuǎn)端腎小管分泌，反映腎小管的酸化功能[15]，當(dāng)遠(yuǎn)端小管功能出現(xiàn)損傷時(shí)，尿TA和NH4+會(huì)明顯降低。本研究中發(fā)現(xiàn)，原發(fā)性甲狀腺功能減退癥患者與正常者比較，尿TA及NH4+的比較無(wú)顯著性差異，甲狀腺功能減退對(duì)遠(yuǎn)端腎小管無(wú)損傷作用。

綜上所述，原發(fā)性甲狀腺功能減退對(duì)腎臟的足細(xì)胞及近端腎小管有明顯損傷，但對(duì)遠(yuǎn)端腎小管的損傷不明顯。

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Changes in related indicators of urinary tract and renal tubule of patients with primary hypothyroidism

GUO Xiaolin1LIU Wenxue1DING Hui1GUO Shibiao2
1.Weifang Medical University, Weifang 261053， China;2.Department of Endocrine, Yidu Central Hospital, Qingzhou 262500， China

Objective To observe the changes in related indicators of urinary tract and renal tubule of patients with primary hypothyroidism. And to know the influence of thyroid dysfunction to foot cell and renal tubule. Methods 80 cases of patients with primary hypothyroidism were selected as observation group （n=80）, and 80 cases of physical health person were selected as control group （n=80）. The contents of podocalyxin （PCX）, urinary albumin（ALB）, urinary N- acetyl beta -D amino （NAG）, Urinary neutrophil gelatinase associated protein （NGAL） lipid reprint,urinary neutrophil gelatinase associated protein （NGAL） lipid reprint, urine acid （TA）, and urine ammonium ion （NH4+） of the two groups were detected. And the change of the content was analyzed statistically. Results Urine PCX/CR、ALB/CR of observation group were higher than those of vontrol group (P＜0.05). Urine NAG/CR、NGAL/ CR of observation group were significantly higher than those of control group (P＜0.05). And there were no statistical significance on TA and NH4+(P＞0.05). Conclusion There were different degrees of damage in the cells of the foot and the proximal end of the kidney of patients with primary hypothyroidism. But distal tubule damage is not obvious.

Primary hypothyroidism; Renal tubule; Urinary Podocyte; Marker protein

R581.2

A

2095-0616（2016）17-17-03

山東省濰坊市科學(xué)技術(shù)進(jìn)步獎(jiǎng)項(xiàng)目（266-1）?！?/p>

（2016-07-01）