易 斌，曾 瑜，李佳萌

（樂(lè)山市人民醫(yī)院感染科，四川樂(lè)山614000）

胸水ADA、IFN-γ及TB-DNA的聯(lián)合檢測(cè)對(duì)結(jié)核性胸膜炎的診斷價(jià)值

易 斌，曾 瑜，李佳萌

（樂(lè)山市人民醫(yī)院感染科，四川樂(lè)山614000）

目的 探討胸水腺苷脫氨酶（adenosine deaminase，ADA）、干擾素γ（interferon gamma，IFN-γ）及結(jié)核分歧桿菌脫氧核苷酸（mycobacterium tuberculosis DNA，TB-DNA）的聯(lián)合檢測(cè)對(duì)結(jié)核性胸膜炎的診斷價(jià)值。方法 選取2014年11月至2015年12月期間到我院就診的出現(xiàn)胸疼、發(fā)熱及胸膜腔積液的160例患者作為研究對(duì)象，經(jīng)診斷分為結(jié)核組72例，對(duì)照組（非結(jié)核組）88例，對(duì)兩組患者的胸水樣本均進(jìn)行ADA、IFN-γ及TB-DNA的單項(xiàng)檢測(cè)及聯(lián)合檢測(cè)。結(jié)果 兩組患者中ADA的靈敏度、特異性分別為74.4%和47.6%，IFN-γ的靈敏度、特異性分別為73.8%和43.7%，TB-DNA的敏感度、特異性分別為82.5%和63.3%。結(jié)核組患者ADA、IFN-γ及TB-DNA水平均顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。ADA、IFN-γ及TB-DNA三個(gè)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)具有較高的特異度，顯著高于兩個(gè)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果（P＜0.05）。結(jié)論 ADA、IFN-γ及TB-DNA聯(lián)合檢測(cè)具有較高的特異度，是一種快速準(zhǔn)確診斷結(jié)核性胸膜炎的有效方法。

腺苷脫氨酶； 聯(lián)合檢測(cè)； 結(jié)核性胸膜炎； 診斷價(jià)值

結(jié)核性胸膜炎是臨床常見(jiàn)病，多發(fā)于青少年群體和老年群體。近年來(lái)，該病的發(fā)病率呈上升趨勢(shì)［1］。該病在臨床上并無(wú)典型的病征，而常用的細(xì)菌培養(yǎng)法檢測(cè)敏感度較低，胸膜活檢又對(duì)患者造成創(chuàng)傷，胸水對(duì)于抗酸桿菌的檢出率較低，因此該病的臨床診斷較為困難［2］。近年來(lái)，ADA、IFN-γ及 TB-DNA是常用的診斷指標(biāo)［1］。本研究分析了單獨(dú)檢測(cè)胸水ADA、IFN-γ和TB-DNA及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)結(jié)核性胸膜炎診斷的敏感度、特異度，探討胸水ADA、IFN-γ及TB-DNA聯(lián)合檢測(cè)對(duì)結(jié)核性胸膜炎的診斷價(jià)值。

材料和方法

1 一般資料

選取2014年11月至2015年12月期間到我院就診的出現(xiàn)胸疼、發(fā)熱及胸膜腔積液的160例患者作為研究對(duì)象。所有患者入院后均進(jìn)行X線和B超檢查，經(jīng)胸膜活檢、病理、實(shí)驗(yàn)室生化檢查（PPD/ PHA）、血結(jié)核抗體等確診后，分為結(jié)核性胸膜炎患者（n=72）和非結(jié)核性胸膜炎患者（n=88）。結(jié)核性胸膜炎診斷標(biāo)準(zhǔn)［3-4］：①胸膜活檢為結(jié)核性肉芽腫或干酪樣壞死；②胸水涂片找到抗酸桿菌；③胸水常規(guī)及生化檢查為淋巴細(xì)胞滲出液；④結(jié)核菌素試驗(yàn)結(jié)果呈強(qiáng)陽(yáng)性。結(jié)核組有72例患者，男性有50例，女性有22例，年齡在20～87歲，平均年齡43.5± 6.3歲；對(duì)照組有88例患者，男性有69例，女性有19例，年齡在21～88歲，平均年齡44.2±6.1歲，其中有肝硬化胸腔積液32例、肺癌胸腔積液27例、心力衰竭引起胸腔積液20例，感染性胸腔積液9例。兩組患者的一般資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），具可比性。

2 檢測(cè)方法

所有患者進(jìn)行常規(guī)胸腔穿刺抽液，抽取5mL胸腔積液送檢化驗(yàn)室，ADA和IFN-γ于當(dāng)天檢測(cè)；ADA采用連續(xù)監(jiān)測(cè)法檢測(cè)，儀器采用Bayer-1650生化分析儀，試劑由浙江東甌公司提供；胸水IFN-γ采用夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）進(jìn)行檢測(cè)，試劑由上海萬(wàn)疆生物科技有限公司提供。在無(wú)菌環(huán)境下收集5mL胸腔積液于帶蓋無(wú)菌管中，進(jìn)行TB-DNA檢測(cè)，胸水 TB-DNA采用FQ-PCR技術(shù)檢測(cè)，試劑盒來(lái)自廣州達(dá)安基因診斷中心。所有操作步驟嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

所有結(jié)果均采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)方法進(jìn)行分析；計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)方法進(jìn)行分析。以雙側(cè) P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 兩組患者中ADA、IFN-γ及TB-DNA單項(xiàng)檢測(cè)的診斷學(xué)指標(biāo)

兩組患者 ADA的靈敏度、特異性、準(zhǔn)確度及約登指數(shù)分別為68.1%、79.5%、74.4%及 47.6%，IFN-γ的靈敏度、特異性、準(zhǔn)確度及約登指數(shù)分別為52.8%、90.9%、73.8%及43.7%，TB-DNA的靈敏度、特異性、準(zhǔn)確度及約登指數(shù)分別為73.6%、89.8%、82.5%及63.3%。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 兩組患者中ADA、IFN-γ及TB-DNA單項(xiàng)檢測(cè)的診斷學(xué)指標(biāo)比較

2 兩組患者 ADA、IFN-γ及 TB-DNA水平

結(jié)核組患者ADA、IFN-γ及TB-DNA水平均顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 兩組患者中ADA、IFN-γ及TB-DNA水平的比較

3 兩組患者ADA、IFN-γ及TB-DNA聯(lián)合檢測(cè)的診斷學(xué)指標(biāo)

ADA、IFN-γ及TB-DNA三個(gè)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)具有較高的特異性，顯著高于兩個(gè)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 ADA、IFN-γ及TB-DNA聯(lián)合檢測(cè)的診斷學(xué)指標(biāo)比較

討 論

目前臨床上對(duì)于診斷結(jié)核性胸膜炎，主要采用細(xì)菌學(xué)、免疫學(xué)及分子生物學(xué)等實(shí)驗(yàn)技術(shù)。胸水性質(zhì)的準(zhǔn)確鑒別有利于疾病的治療和預(yù)后［5］。引起胸水的最常見(jiàn)原因是結(jié)核和惡性腫瘤，而針對(duì)這兩種不同性質(zhì)的胸水癥狀，臨床治療和預(yù)后差異較大，因

此需要快速準(zhǔn)確的診斷。隨著分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的快速發(fā)展，胸水的免疫學(xué)檢查日益受到臨床學(xué)者的重視，有研究表明細(xì)胞因子IFN-γ對(duì)于胸水的鑒別診斷具有較高的臨床價(jià)值；另外即使很微量的TB-DNA，仍然可以通過(guò)分子生物學(xué)技術(shù)聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）檢測(cè)到，并且時(shí)間較短［6］。

有研究發(fā)現(xiàn)，在嘌呤核苷代謝途經(jīng)中，ADA是一種重要催化酶，其主要功能是將腺苷轉(zhuǎn)化為氨、黃嘌呤等。氨會(huì)引起機(jī)體中性粒細(xì)胞升高，且發(fā)生侵潤(rùn)，導(dǎo)致機(jī)體發(fā)生內(nèi)毒素血癥，損害細(xì)胞膜［7］。在結(jié)核性胸膜炎機(jī)體中，結(jié)核桿菌會(huì)對(duì)細(xì)胞免疫產(chǎn)生刺激作用，引起淋巴細(xì)胞的增生，因此胸水中的ADA水平顯著上升，進(jìn)而導(dǎo)致ADA酶活升高。

結(jié)核桿菌及其代謝產(chǎn)物會(huì)造成病變部位發(fā)生局部的炎癥反應(yīng)，甚至引起全身反應(yīng)，在結(jié)核性胸膜炎的病變部位會(huì)聚集大量免疫細(xì)胞。IFN-γ是重要的免疫調(diào)節(jié)因子，具有抗細(xì)胞毒、抗病毒及免疫調(diào)節(jié)等特性，還可促使巨噬細(xì)胞激活、釋放細(xì)胞因子，進(jìn)一步提高巨噬細(xì)胞的吞噬作用［8］。在早期結(jié)核性胸膜炎中，在結(jié)核桿菌及其代謝產(chǎn)物的刺激作用下，病變部位被活化的T細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生IFN-γ，進(jìn)而使局部巨噬細(xì)胞等免疫細(xì)胞活化，從而激活免疫防護(hù)機(jī)制，以阻止感染的擴(kuò)散。有研究發(fā)現(xiàn)，結(jié)核桿菌及其代謝產(chǎn)物能夠使局部淋巴細(xì)胞活化，進(jìn)而產(chǎn)生大量的IFN-γ，導(dǎo)致其水平顯著升高［9］。

胸水TB-PCR技術(shù)是對(duì)提取出的樣本進(jìn)行結(jié)核桿菌DNA的體外擴(kuò)增，能夠快速準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)核性胸膜炎，將TB-DNA的檢測(cè)與其他檢測(cè)方法聯(lián)合應(yīng)用能夠有效提高結(jié)核性胸膜炎的診斷率。

本文研究結(jié)果表明，結(jié)核組ADA、IFN-γ及TBDNA水平均顯著高于非結(jié)核性對(duì)照組，且三個(gè)指標(biāo)均具有一定的敏感度和特異度，說(shuō)明ADA、IFN-γ及TB-DNA可以作為診斷診斷結(jié)核性胸膜炎的特異性指標(biāo)。另外研究結(jié)果顯示，相比于兩個(gè)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)法，ADA、IFN-γ及TB-DNA三個(gè)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)具有較高的特異度，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

綜上，ADA、IFN-γ及 TB-DNA聯(lián)合檢測(cè)具有較高的特異度，是一種快速準(zhǔn)確診斷結(jié)核性胸膜炎的有效方法。

［1］馮爽，劉樹(shù)業(yè)，張立，等.胸水ADA、TB-DNA和IFN-γ的聯(lián)合檢測(cè)對(duì)結(jié)核性胸膜炎的診斷價(jià)值評(píng)估.山東醫(yī)藥，2011，51（48）：53-55.

［2］尉艷霞，童朝暉，龔娟妮，等.腺苷脫氨酶診斷結(jié)核性胸膜炎價(jià)值的再評(píng)價(jià).中華結(jié)核和呼吸雜志，2010，33（4）：273-275.

［3］Kalantri Y，Hemvani N，Chitnis D S.Evaluation of real-time polymerase chain reaction，interferon-gamma，adenosine deaminase，and immunoglobulinAfortheefficientdiagnosisofpleural tuberculosis.Int J Infect Dis，2011，15（4）：e226-231.

［4］王愛(ài)民，王小軍，董雪松.血清和胸水中的乳酸脫氫酶、腺苷脫氨酶水平及比值在結(jié)核性胸膜炎診斷中的價(jià)值.西部醫(yī)學(xué)，2016，28（1）：90-93.

［5］邵俊國(guó)，葉迎賓，黃秀香，等.結(jié)核性胸膜炎患者腺苷脫氨酶與總蛋白、乳酸脫氫酶及其比值的相關(guān)性分析.標(biāo)記免疫分析與臨床，2015，22（4）：317-319.

［6］羅虎，宮亮，周向東.胸腔積液ADA值在結(jié)核性胸膜炎中的診斷價(jià)值及臨界值探討.重慶醫(yī)學(xué)，2012，41（35）：3718-3719.

［7］王娟，李德憲，顧玉紅，等.多項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)在結(jié)核性胸膜炎診斷中的臨床價(jià)值.實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2015，31（3）：407-409.

［8］馮爽，劉樹(shù)業(yè)，張立，等.代謝組學(xué)分析技術(shù)篩選結(jié)核性胸膜炎患者胸腔積液生物標(biāo)志物的研究.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2015，38（4）：262-266.

［9］施健，周麗榮，孫寶華，等.結(jié)核性胸膜炎胸膜組織病理學(xué)檢查及胸水檢測(cè)的診斷價(jià)值.西部醫(yī)學(xué)，2015，27（1）：27-28.

（潘子昂編輯）

The Diagnostic Value of Combined Detection of Pleural Effusion ADA，IFN-γ and TB-DNA in the Diagnosis of Tuberculous Pleurisy

YI Bin，ZENG Yu，LI Jia-meng
（Department of Infectious Diseases ofLeshan People’s Hospital，Leshan 614000，China）

Objective To explore the value of combined detection of pleural effusion ADA，IFN-γ and TBDNA in diagnosis of tuberculous pleurisy.Methods We enrolled 160 patients from Nov 2014 to Dec 2015，who got chest pain，fever and pleural effusion as research objects.They were divided into tuberculosis group and control group（non-tuberculosis group）.ADA，IFN-γ and TB-DNA of pleural effusion in two groups were detected，The test was run individually and jointly.Results The sensitivity and specificity of ADA were 74.4%and 47.6%.The sensitivity and specificity of IFN-γ were 73.8%and 43.7%.The sensitivity and specificity of TB-DNA were 82.5%and 63.3%.ADA，IFN-γ and TB-DNA levels of the tuberculosis group were significantly higher than those in the control group（P＜0.05）.The specificity of combined detection of ADA，IFN-γ and TB-DNA was significantly higher than any two of them combined（P＜0.05）.Conclusion The joint detection of ADA，IFN-γ and TB-DNA has high specificity.It is an effective，rapid and accurate method for diagnosis of tuberculous pleurisy.

ADA； Joint detection； Tuberculous pleurisy； Diagnosis

10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2016.11.029

2016-05-20；

2016-06-17