吳會玲，宋 希

（南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京醫(yī)院感染性疾病科，江蘇南京210000）

乙型肝炎病毒感染與肝癌相關(guān)性多因素研究

吳會玲，宋 希

（南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京醫(yī)院感染性疾病科，江蘇南京210000）

目的 研究分析乙型肝炎病毒（HBV）感染與肝癌相關(guān)性的多種因素。方法 將該院2013年1月至2015年12月收治的68例HBV感染伴肝癌患者設(shè)為觀察組，將120例僅為HBV感染患者設(shè)為對照組，采集患者空腹肘靜脈血檢測前c區(qū)nt1896位點(diǎn)基因型、血清腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、HBV感染血清標(biāo)志物等。結(jié)果 觀察組患者中HBV表面抗原陽性[HBsAg（＋）]伴HBVe抗原陽性[HbeAg（＋）]伴抗HBV e抗體陽性[HBeAb（＋）]伴抗HBV核心抗體陽性[HbcAb（＋）]、前c區(qū)nt1896位點(diǎn)為隱性模型（CC＋GC）百分比及血清TNF-α水平均明顯高于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。HBV感染與肝癌的相關(guān)因素包括HBsAg（＋）伴HbeAg（＋）伴HBeAb（＋）伴HbcAb（＋）、血清TNF-α水平升高、前c區(qū)nt1896位點(diǎn)為隱性模型（CC＋GC）。結(jié)論 通過聯(lián)合檢測前c區(qū)nt1896位點(diǎn)基因型、TNF-α、HBV感染血清標(biāo)志物可有效診治該類疾病。

肝炎病毒，乙型； 感染； 肝腫瘤

肝癌屬一種常見惡性肝臟疾病，病死率極高，目前，醫(yī)學(xué)上一直在研究如何有效檢測并治療該類疾病。就目前肝癌的發(fā)病機(jī)制而言，仍然不夠明確，但相關(guān)研究表明，肝癌發(fā)病率與乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）感染密切相關(guān)[1]。HBV感染是目前造成慢性肝炎、肝硬化與肝癌發(fā)生的主要原因之一。目前，在全球范圍內(nèi)已存在將近4億慢性HBV攜帶者，其中亞洲范圍內(nèi)慢性HBV攜帶者占75.00%。我國2006年乙型肝炎流行病學(xué)血清檢測調(diào)查結(jié)果顯示，我國59歲以下人群中HBV表面抗原（hepatitis B virus surface antigen，HBsAg）陽性率較以往出現(xiàn)降低情況，目前推算，大概為7.19%[2]。在HBV感染者中發(fā)生肝癌者所占比例較高。而HBV感染者病情發(fā)生、發(fā)展又與基因突變存在一定聯(lián)系，表明基因突變是HBV感染伴肝癌的影響因素之一[3]。為證實(shí)這一觀點(diǎn)，本研究分析了HBV感染與肝癌相關(guān)性的多種因素，旨在為相關(guān)研究提供幫助，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 資料

1.1.1 一般資料 將本院2013年1月至2015年12月收治的68例HBV感染伴肝癌患者設(shè)為觀察組，將120例僅為HBV感染患者設(shè)為對照組。觀察組患者中男30例，女38例，平均年齡（48.5±4.3）歲。對照組患者中男61例，女59例；平均年齡（47.3±3.2）歲。兩組患者性別、年齡比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)[4]（1）確診為HBV感染，血清甲胎蛋白大于400 μg/L；（2）經(jīng)B超或CT檢查肝臟存在占位性病變；（3）細(xì)胞學(xué)、病理學(xué)檢查確診為肝癌（觀察組患者）。

1.2 方法 兩組患者均空腹接受檢查：（1）詳細(xì)記錄患者基本信息；（2）采集患者空腹肘靜脈血2 mL，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測HBV感染血清標(biāo)志物，即HBsAg、抗HBV表面抗體（anti-hepatitis B virus surface antibody，HBsAb）、HBV e抗原（hepatitis B virus e antigen，HBeAg）、抗HBV e抗體（anti-hepatitis B virus e antibody，HBeAb）、抗HBV核心抗體（anti-hepatitis B virus core antibody，HbcAb），檢測陽性表示為（＋）；并檢測血清腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）水平。采用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性內(nèi)切酶片段多態(tài)性分析檢測前c區(qū)nt1896位點(diǎn)基因型。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以±s表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率或構(gòu)成比表示，采用χ2檢驗(yàn)；采用多因素非條件logistic回歸模型分析HBV感染與肝癌相關(guān)性的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組患者HBV感染血清標(biāo)志物檢查結(jié)果比較188例患者HBV感染血清標(biāo)志物檢查出現(xiàn)5種模式：（1）HBsAg（＋）伴HBsAb（＋）；（2）HBsAg（＋）伴HbcAb（＋）；（3）HBsAg（＋）伴HBeAg（＋）伴HbcAb（＋）；（4）HBsAg（＋）伴HbeAg（＋）伴HBeAb（＋）伴HbcAb（＋）；（5）HBsAg（＋）伴HBeAb（＋）。其中觀察組患者中HBsAg（＋）伴HbeAg（＋）伴HBeAb（＋）伴HbcAb（＋）百分比明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=6.713，P=0.001 0），見表1。

2.2 兩組患者血清TNF-α水平比較 觀察組患者血清TNF-α水平[（28.3±11.3）pg/mL]明顯高于對照組[（18.9± 10.4）pg/mL]，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=8.897，P=0.001）。

2.3 兩組患者前c區(qū)nt1896位點(diǎn)基因型及基因頻率比較 觀察組患者中前c區(qū)nt1896位點(diǎn)為隱性模型（CC＋GC）百分比明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=4.209，P=0.040 0），見表2。

表1 兩組患者HBV感染血清標(biāo)志物檢查結(jié)果比較

表2 兩組患者前c區(qū)nt1896位點(diǎn)基因型及基因頻率比較

表3 HBV感染與肝癌相關(guān)性的多因素分析

2.4 HBV感染與肝癌相關(guān)性的多因素分析 HBsAg（＋）伴HbeAg（＋）伴HBeAb（＋）伴HbcAb（＋）、血清TNF-α水平升高、前c區(qū)nt1896位點(diǎn)為隱性模型（CC＋GC）3個(gè)因素是HBV感染伴肝癌的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。

3 討 論

肝癌是目前臨床常見惡性腫瘤，主要分為繼發(fā)性和原發(fā)性2種，無論是哪種肝癌發(fā)病機(jī)制均很復(fù)雜，繼發(fā)性肝癌多由全身其他惡性腫瘤侵犯肝臟所致，病因相對較為明確，但目前對原發(fā)性肝癌的病因尚不明確，發(fā)病過程較為復(fù)雜，病因較多[5]。主要包括HBV感染、丙型肝炎病毒感染等，還與黃曲霉素、酒精等致癌化學(xué)物質(zhì)有關(guān)。HBV感染的發(fā)病機(jī)制主要是HBV侵犯肝細(xì)胞從而引發(fā)肝癌，一旦HBV侵入人體肝臟后會在肝細(xì)胞中定居并復(fù)制，從而形成免疫復(fù)合物。若想深入研究原發(fā)性肝癌的實(shí)際情況就必須對其進(jìn)行針對性的影像學(xué)檢查和肝癌血清標(biāo)志物等檢測[6]。相關(guān)研究表明，HBsAg可抑制T細(xì)胞活性，缺少了HBsAg，宿主免疫則不能對變異株有效進(jìn)行識別，導(dǎo)致HBV繼續(xù)留存宿主體內(nèi)，缺失了HBsAg的干細(xì)胞增生后會增加癌變風(fēng)險(xiǎn)[7-9]。因此，本研究針對多種因素研究了HBV感染血清標(biāo)志物，由于DNA指標(biāo)不能很好地預(yù)測療效，故本研究未進(jìn)行DNA載量相關(guān)研究。

本研究對兩組患者血清TNF-α水平進(jìn)行了檢測分析，觀察組患者血清TNF-α水平明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。說明血清TNF-α水平是HBV感染引發(fā)肝癌的危險(xiǎn)因素之一。血清TNF-α參與了HBV感染的免疫應(yīng)答發(fā)生過程。此外，目前尚確切判定單一HBsAg（＋）、HbeAg（＋）、HbsAb（＋）、HbcAb（＋）是HBV感染引發(fā)肝癌發(fā)生的相關(guān)因素，單一因素研究存在一定局限性，需進(jìn)行HBsAg（＋）、HbeAb（＋）、HbcAb（＋）等多因素相關(guān)分析。本研究結(jié)果顯示，觀察組患者中HBsAg（＋）伴HbeAg（＋）伴HBeAb（＋）伴HbcAb（＋）百分比明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。說明如果這幾項(xiàng)血清標(biāo)志物均陽性時(shí)需高度重視，應(yīng)將其列為肝癌高危警報(bào)。本研究兩組患者等位基因頻率、基因型、顯性模型比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），而觀察組患者中前c區(qū)nt1896位點(diǎn)為隱性模型（CC＋GC）百分比明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。多因素非條件logistic回歸明顯分析也表明，前c區(qū)nt1896位點(diǎn)為隱性模型（CC＋GC）是HBV感染伴肝癌的獨(dú)立危險(xiǎn)因素之一。

上述研究結(jié)果與陳雪莉等[10]研究結(jié)果相近。陳雪莉等[10]為探究HBV與肝癌的相關(guān)性，選取住院并診斷為HBV感染伴肝癌患者64例作為觀察組，選取HBV感染但無肝癌112例患者作為對照組，檢查兩組患者血清TNF-α水平、HBV感染血清標(biāo)志物與前c區(qū)nt1896位點(diǎn)基因型，結(jié)果顯示，觀察組患者血清TNF-α水平[（28.4± 11.2）pg/mL]明顯高于對照組[（18.8±10.5）pg/mL]，觀察組患者中HBsAg（＋）伴HbcAb（＋）伴HbeAb（＋）例數(shù)明顯

高于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。而兩組患者基因型、顯性模型、等位基因頻率等比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。但兩組患者隱性模型比較，則差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。多因素回歸分析發(fā)現(xiàn)，患者血清TNF-α水平、前c區(qū)nt1896位點(diǎn)隱性模型均與HBV相關(guān)肝癌發(fā)生存在相關(guān)性，是肝癌發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。證實(shí)HBV相關(guān)肝癌的發(fā)生與血清TNF-α水平升高及nt1896位點(diǎn)檢測為隱性模型（CC＋GC）密切相關(guān)，對HBV感染患者進(jìn)行血清TNF-α水平檢測，有條件者可行HBV前c區(qū)nt1896位點(diǎn)基因型檢測，有助于降低HBV相關(guān)肝癌發(fā)生率。該結(jié)論驗(yàn)證了本研究結(jié)果，與本研究結(jié)論相呼應(yīng)，說明本研究結(jié)果及結(jié)論存在一定研究價(jià)值。

綜上所述，HBV感染與肝癌發(fā)生的相關(guān)性因素包括HBsAg（＋）伴HbeAg（＋）伴HBeAb（＋）伴HbcAb（＋）、血清TNF-α水平升高、前c區(qū)nt1896位點(diǎn)為隱性模型（CC＋GC）等。對肝癌患者進(jìn)行前c區(qū)nt1896位點(diǎn)基因型、TNF-α、HBV感染血清標(biāo)志物檢測可有效判斷肝癌發(fā)生的病因。但本研究仍不夠全面，尚需進(jìn)行更加細(xì)致的檢測、研究分析包括加強(qiáng)對DNA載量等因素的研究。

[1] 蒲蕊，丁一波，侯曉玫，等.乙型肝炎病毒感染者中病毒基因型與對應(yīng)的病毒變異對肝癌發(fā)生的影響：隊(duì)列研究[J].上海預(yù)防醫(yī)學(xué)，2015，27（7）：374-380.

[2] 沈小雷，王海捷，施啟生，等.乙型肝炎病毒感染與肝癌關(guān)系的26年前瞻性定群觀察[J].江蘇預(yù)防醫(yī)學(xué)，2015，26（5）：11-13.

[3] 付廣雙，張晶芬，程海濤，等.乙、丙型肝炎病毒感染與原發(fā)性肝癌預(yù)后相關(guān)性研究[J].中國醫(yī)師雜志，2014，16（3）：326-329.

[4] 郭鐵志，韓立新，羅研，等.乙型肝炎病毒感染患者肝癌發(fā)病的影響因素研究[J].國際病毒學(xué)雜志，2016，23（1）：26-28.

[5] 劉力偉，李嘉嘉，朱立新，等.臍血和合并乙型肝炎病毒感染肝癌患者來源CIK細(xì)胞的增殖及殺傷活性[J].中國腫瘤生物治療雜志，2014，21（6）：690-692.

[6] 魯笑欣，張春燕，黃天壬，等.2004～2013年廣西6201例原發(fā)性肝癌患者乙肝和丙肝病毒感染情況分析[J].山東醫(yī)藥，2015，55（14）：35-37.

[7] 王波，曹磊，嚴(yán)蘇，等.晚期原發(fā)性肝癌患者慢性乙型肝炎病毒感染索拉非尼耐藥的臨床研究[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2015，25（19）：4466-4468.

[8] 賈淑芳，程君，蘇倩，等.慢性乙型肝炎病毒感染胸苷激酶1表達(dá)差異及其對原發(fā)性肝癌早期診斷價(jià)值研究[J].中國實(shí)用內(nèi)科雜志，2015，35（12）：1015-1018.

[9] 李海鷹，教波，王小艷.肝癌組織中乙型肝炎病毒感染與甲基化轉(zhuǎn)移酶表達(dá)的關(guān)系[J].中國腫瘤臨床與康復(fù)，2015，22（2）：136-138.

[10]陳雪莉，楊宏強(qiáng)，季榕.乙型肝炎病毒感染與肝癌相關(guān)性的多因素分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2014，24（17）：4288-4289.

10.3969/j.issn.1009-5519.2016.22.028

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1009-5519（2016）22-3493-03

2016-08-08）