林　欣，何　珂，黃朝芳，陳求薇

多西他賽致大鼠外滲性皮膚損傷的治療研究

林欣，何珂，黃朝芳，陳求薇

目的探討多西他賽致外滲性皮膚損傷的治療效果。方法24只SD大鼠隨機(jī)分為透明質(zhì)酸酶組（n=6）、地塞米松組（n=6）、聯(lián)合組（n=6）及對照組（n=6）。于大鼠雙側(cè)后肢注射6 mg/ml濃度的多西他賽制備外滲性皮膚損傷模型。所有動物在注射后1 w，以注射點(diǎn)為中心，周圍4點(diǎn)分別注射藥物0.1 ml，均注射1次。其中透明質(zhì)酸酶組注射75 U/ml注射用透明質(zhì)酸酶，地塞米松組注射1 mg/ml地塞米松磷酸鈉注射液，聯(lián)合組注射含75 U/ml注射用透明質(zhì)酸酶及1 mg/ml地塞米松磷酸鈉注射液混合液，對照組注射生理鹽水。觀察各組皮膚損傷面積隨治療時間的變化，對比各組14d內(nèi)皮膚愈合率及愈合時間。結(jié)果24只大鼠48個注射部位在注射多西他賽后3～5 min局部形成紅斑、充血、水腫，1 w左右均于注射點(diǎn)周圍形成皮膚潰瘍。各組皮膚損傷面積在治療前均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；各組各損傷部位經(jīng)治療后，皮膚損傷面積均隨治療時間延長而呈逐漸下降趨勢，其中聯(lián)合組下降最快，其次為透明質(zhì)酸酶組、地塞米松組。截止治療后14 d，各組愈合率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），其中聯(lián)合組最高為100.0%，其次為透明質(zhì)酸酶組（75.0%）、地塞米松組（66.7%），對照組最低（33.3%）。平均愈合時間各組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），其中聯(lián)合組愈合時間最短，其次為透明質(zhì)酸酶組、地塞米松組，對照組愈合時間最長。結(jié)論透明質(zhì)酸酶、地塞米松局部注射是治療多西他賽致外滲性皮膚損傷的有效方法，兩者聯(lián)用療效更佳。

多西他賽；外滲皮膚損傷；透明質(zhì)酸酶；地塞米松；大鼠

化療是治療惡性腫瘤的重要方法之一，大多數(shù)化療藥物通過靜脈注射途徑給藥，但在靜脈輸注過程中容易發(fā)生藥物外滲導(dǎo)致皮膚損傷，引起皮膚局部紅腫、破潰、壞死、疼痛等，嚴(yán)重者可造成皮膚組織壞死、甚至損傷神經(jīng)肌腱，導(dǎo)致肢體功能障礙［1-2］。而目前對化療藥物外滲性皮膚損傷的防治尚缺乏統(tǒng)一的指導(dǎo)性意見［3］。多西他賽是一種新型抗腫瘤藥，主要用于卵巢癌、乳腺癌、非小細(xì)胞肺癌及其他惡性實(shí)體瘤的治療，以靜脈給藥為主要途徑。近年來發(fā)現(xiàn)該藥血管外滲漏后引起嚴(yán)重組織壞死、潰瘍形成等不良反應(yīng)，給患者帶來極大的痛苦［4-5］，并且目前尚缺乏有效的防治措施。為了探討多西他賽外滲性皮膚損傷的治療措施，本研究通過制備相關(guān)動物模型，研究透明質(zhì)酸酶及地塞米松對其治療效果，為多西他賽外滲性皮膚損傷的治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1　材料與方法

1.1主要材料SPF級SD大鼠購自第三軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心，雌雄各12只，動物合格證號：SCXK（渝）2015003，體質(zhì)量178～190（180±5）g，周齡8～10 w。多西他賽注射液（江蘇揚(yáng)子江藥業(yè)集團(tuán)有限公司，國藥準(zhǔn)字H20093850）；注射用透明質(zhì)酸酶（上海第一生化制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H31022111）；地塞米松磷酸鈉注射液（吉林敖東藥業(yè)有限公司，國藥準(zhǔn)字H22022889）。

1.2方法

1.2.1實(shí)驗(yàn)動物分組24只SD大鼠按照隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為4組：透明質(zhì)酸酶組、地塞米松組、聯(lián)合組及對照組，每組6只。各組大鼠體質(zhì)量、周齡均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。

1.2.2動物模型的制備將大鼠雙側(cè)后肢祛毛，暴露皮膚，并保證皮膚完好，無破潰、紅腫等表現(xiàn)。于雙側(cè)股骨小頭上方約1 cm處注射6 mg/ml多西他賽注射用0.4 ml，使皮膚隆起［6］。每個注射點(diǎn)為1個觀察部位，注射完畢后，觀察注射點(diǎn)周圍皮膚情況，至出現(xiàn)皮膚紅腫、破損直至潰瘍直徑＞2 mm達(dá)皮膚損傷標(biāo)準(zhǔn)。24只大鼠均在注射后1 w內(nèi)成功制備外滲性皮膚損傷模型。

1.2.3治療方案所有動物均在注射多西他賽1 w后開始治療，以多西他賽注射點(diǎn)為中心，半徑1 cm處上、下、左、右各4點(diǎn)注射藥物0.1 ml，注射1次。其中透明質(zhì)酸酶組注射75 U/ml注射用透明質(zhì)酸酶，地塞米松組注射1 mg/ml地塞米松磷酸鈉注射液，聯(lián)合組注射含75 U/ml注射用透明質(zhì)酸酶及1 mg/ml地塞米松磷酸鈉注射液混合液，對照組注射生理鹽水。

1.3觀察指標(biāo)及評定標(biāo)準(zhǔn)注射藥物治療后，每天觀察并記錄大鼠局部皮膚損傷面積，計(jì)算方法為損傷處最長垂直長度與最長水平長度乘積。觀察周期為14 d，記錄各組14 d內(nèi)皮膚愈合情況及愈合時間。皮膚愈合標(biāo)準(zhǔn)為皮膚無紅腫、充血，潰瘍愈合，毛發(fā)重新長出。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料以均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用One-Way ANOVO；計(jì)數(shù)資料用頻數(shù)和百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1多西他賽致大鼠外滲性皮膚損傷的表現(xiàn)24只大鼠48個注射部位在注射多西他賽后3～5 min，局部形成紅斑、充血、水腫，1 w左右均于注射點(diǎn)周圍形成皮膚潰瘍。皮損面積56～72 mm2，其中透明質(zhì)酸酶組平均為（63.7±5.3）mm2，地塞米松組為（62.3± 5.0）mm2，聯(lián)合組為（63.5±5.5）mm2，對照組為（63.4± 5.2）mm2。各組皮損面積無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。2.2各組治療后皮損面積各組治療后皮損面積均隨治療時間延長而呈逐漸下降趨勢，透明質(zhì)酸酶組、地塞米松組、聯(lián)合組均較對照組下降明顯（P＜0.01），其中聯(lián)合組下降最快，其次為透明質(zhì)酸酶組、地塞米松組。從治療后第4 d起，各組損傷面積相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，其中聯(lián)合組最低，其次為透明質(zhì)酸酶組、地塞米松組，對照組最高，見圖1。

2.3各組愈合率及愈合時間截止治療后14 d，各組愈合率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），其中聯(lián)合組最高為100.0%，其次為透明質(zhì)酸酶組（75.0%）、地塞米松組（66.7%），對照組最低（33.3%）。各組平均愈合時間也顯著不同（P＜0.05），其中聯(lián)合組愈合時間最短，其次為透明質(zhì)酸酶組、地塞米松組，對照組愈合時間最長。見表1。

表1　各組愈合率及愈合時間比較（n=12）

3　討論

不同化療藥物外滲導(dǎo)致皮膚損傷的機(jī)制不同，主要通過化療藥物的溶脂作用使細(xì)胞膜通透性增強(qiáng)，造成細(xì)胞溶解，同時與細(xì)胞DNA結(jié)合引起細(xì)胞壞死［7］。多西他賽為一種新型的細(xì)胞周期特異性抗腫瘤藥物，作用于M期細(xì)胞，抑制細(xì)胞有絲分裂從而殺傷腫瘤細(xì)胞，目前在臨床上應(yīng)用越來越廣泛。多西他賽的給藥途徑為靜脈給藥，與很多化療藥物一樣可引起外滲性皮膚損傷。為了探討多西他賽致外滲性皮膚損傷的治療方法，本研究制備了多西他賽致大鼠外滲性皮膚損傷模型。結(jié)果在大鼠后肢皮下注射多西他賽能夠使大鼠皮膚數(shù)分鐘內(nèi)出現(xiàn)紅斑、水腫等炎癥表現(xiàn)，隨后在1 w內(nèi)形成潰瘍，均達(dá)到外滲性皮膚損傷標(biāo)準(zhǔn)，模型制備成功?？梢?，SD大鼠皮下注射多西他賽制備外滲性皮膚損傷模型操作簡單，可行性強(qiáng)。

透明質(zhì)酸酶能夠降低體內(nèi)透明質(zhì)酸活性，提高組織中液體滲透能力，臨床上常用于加速皮下或肌肉注射藥物的吸收，促進(jìn)手術(shù)或創(chuàng)傷后局部組織水腫的消散。近年來用于治療化療藥物所致的外滲性皮膚損傷的動物實(shí)驗(yàn)及臨床研究發(fā)現(xiàn)，透明質(zhì)酸酶有助于促進(jìn)皮膚損傷的愈合［8-11］。地塞米松是一種糖皮質(zhì)激素類藥物，具有抗炎和抗過敏作用，能夠抑制炎癥細(xì)胞和炎癥介質(zhì)的釋放。研究發(fā)現(xiàn)，地塞米松用于化療藥物引起的外滲性組織損傷具有一定療效［12-13］。本研究對比分析了透明質(zhì)酸酶、地塞米松以及二者聯(lián)合局部注射治療多西他賽所致大鼠皮膚損傷的療效，結(jié)果表明上述治療方法均能促進(jìn)皮膚損傷的愈合，兩者聯(lián)合應(yīng)用使損傷愈合率更高，愈合更快，療效更佳。這與朱其聰?shù)龋?3］報(bào)道的透明質(zhì)酸酶與地塞米松治療長春瑞濱所致的大鼠外滲性皮膚損傷療效相似。其作用機(jī)制目前仍不明確，可能是由于透明質(zhì)酸酶促進(jìn)藥物吸收，地塞米松抑制炎癥反應(yīng)，兩者聯(lián)用起到協(xié)同作用。

總之，本研究發(fā)現(xiàn)大鼠皮下注射多西他賽可成功制備外滲性皮膚損傷模型，透明質(zhì)酸酶、地塞米松局部注射是治療多西他賽致外滲性皮膚損傷的有效方法，兩者聯(lián)用療效更佳。

圖1　各組皮損面積隨治療時間變化曲線

［1］Sakaida E，Sekine I，Iwasawa S，et al.Incidence，risk factors and treatment outcomes of extravasation of cytotoxic agents in an outpatient chemotherapy clinic［J］.Jpn J Clin Oncol，2014，44（2）: 168-171.

［2］Pluschnig U，Haslik W，Bayer G，et al.Outcome of chemotherapy extravasation in a large patient series using a standardised management protocol［J］.Support Care Cancer，2015，23（6）: 1741-1748.

［3］Harrold K，Gould D，Drey N.The management of cytotoxic chemotherapy extravasation:a systematic review of the literature to evaluate the evidence underpinning contemporary practice［J］. Eur J Cancer Care（Engl），2015，24（6）:771-800.

［4］Cifuentes L，Ring J，Brockow K.Extravasation of docetaxel［J］.J Dtsch Dermatol Ges，2012，10（9）:662-663.

［5］Chang PH，Wang MT，Chen YH，et al.Docetaxel extravasation results in significantly delayed and relapsed skin injury:a case report［J］.Oncol Lett，2014，7（5）:1497-1498.

［6］Zhu JJ，F(xiàn)u JF，Yang J，et al.Rat injury model of docetaxel extravasation［J］.Biomed Rep，2014，2（5）:649-652.

［7］Hahn JC，Shafritz AB.Chemotherapy extravasation injuries［J］.J Hand Surg Am，2012，37（2）:360-362.

［8］Beaulieu MJ.Hyaluronidase for extravasation management［J］. Neonatal Netw，2012，31（6）:413-418.

［9］朱其聰，羅榮城，李愛民，等.透明質(zhì)酸酶、喜遼妥軟膏治療多西紫杉醇外滲性大鼠皮膚損傷［J］.臨床腫瘤學(xué)雜志，2007，12（4）:259-263.

［10］朱其聰，羅榮城，繆景霞，等.二甲基亞砜、透明質(zhì)酸酶治療多西紫杉醇外滲性大鼠皮膚損傷［J］.解放軍醫(yī)學(xué)雜志，2007，32（6）:588-590.

［11］朱其聰，李愛民，羅榮城，等.幾丁糖、透明質(zhì)酸酶治療多西紫杉醇外滲性大鼠皮膚損傷［J］.癌癥，2007，26（4）:346-350.

［12］黎逢弟，梁鳳英，陳曉瑩，等.雙柏散聯(lián)合地塞米松濕敷對鉑類化療藥物外滲的療效觀察［J］.中華護(hù)理教育，2015（6）: 470-471，472.

［13］朱其聰，羅榮城，張正義，等.透明質(zhì)酸酶、地塞米松對長春瑞濱外滲性大鼠皮膚損傷的療效［J］.腫瘤研究與臨床，2010，22（10）:678-680.

Study on treatment of exosmosis-induced skin injury in rats caused by docetaxel

Lin Xin，He Ke，Huang Chaofang，Chen QiuweiCancer Center，Central Hospital 187 of PLA，Haikou，Hainan，571159，China

ObjectiveTo explore the treatment outcome of exosmosis-induced skin injury in rats caused by docetaxel. MethodsA total of 24 SD rats were randomly divided into hyaluronidase group（n=6），dexamethasone group（n=6），combination group（n=6）and control group（n=6）.Docetaxel with a concentration of 6 mg/ml was injected into the bilateral posterior limbs of rats to create model of exosmosis-induced skin injury.All rats were injected with 0.1 ml drug at the four points around the previous injection point for one time one week after the injection.The hyaluronidase group was injected with 75 U/ml hyaluronidase for injection，the dexamethasone group with 1 mg/ml dexamethasone sodium phosphate injection，the combination group was injected with the mixed liquor of 75 U/ml hyaluronidase for injection and 1 mg/ml dexamethasone sodium phosphate injection，and the control group with normal saline.The changes in the areas of skin injury in the four groups were observed and the skin healing rates and healing time periods in the four groups within 14 days were compared.ResultsLocal erythema，hyperemia and edema were formed at the 48 injection points of the 24 rats 3-5 min after injection of docetaxel，and skin ulcer was created around the injection points around one week.There was no significant difference among the areas of skin injury in the four groups before treatment（P＞0.05）；after treatment，the areas decreased along the prolonged treatment time；the areas in the combination group decreased the most quickly，followed by the hyaluronidase group and the dexamethasone group.14 days after the treatment，there was significant difference among the healing rates in the four groups（P＜0.05）:the healing rate in the combination group was the highest（100.0%），followed by the hyaluronidase group（75.0%）and the dexamethasone group（66.7%），and that in the control group was the lowest（33.3%）.There was also significant difference among the healing time periods in the four groups（P＜0.05）:the healing time periods in the combination group was the shortest，followed by the hyaluronidase group and the dexamethasone group，and that in the control group was the longest. ConclusionLocal injection of hyaluronidase and dexamethasone is effective for the treatment of exosmosis-induced skin injury. Better effect may be achieved by combining them.

docetaxel；exosmosis-induced skin injury；hyaluronidase，dexamethasone；rat

R 722.142/453

A

1004-0188（2016）08-0841-03

10.3969/j.issn.1004-0188.2016.08.005

571159?？?，解放軍187醫(yī)院腫瘤中心

（2016-05-02）