余 濤，曾 陽，孫玉俠，宋永朋，唐 勛

(1. 青海師范大學，西寧 青海 810008；2. 甘肅農(nóng)業(yè)大學，蘭州 甘肅 730070；3. 青海省輕工業(yè)研究所，西寧，青海 810000)

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一種小鼠尾靜脈注射的操作方法

余 濤1，曾 陽1，孫玉俠1，宋永朋3，唐 勛2

(1. 青海師范大學，西寧 青海 810008；2. 甘肅農(nóng)業(yè)大學，蘭州 甘肅 730070；3. 青海省輕工業(yè)研究所，西寧，青海 810000)

目的 為小鼠尾靜脈注射提供一種實用的裝置與使用方法。方法 利用自制裝置上的恒溫部分、照明部分以及固定部分進行小鼠尾靜脈注射操作，對比使用裝置進行操作前后注射的難易程度及完成時間的差別。結(jié)果 使用自制裝置進行尾靜脈注射更準確更快速。結(jié)論 該自制裝置在小鼠尾靜脈注射操作過程中能明顯提高注射成功率,縮短注射時間。

小鼠；尾靜脈注射；自制裝置

小鼠為最常用的實驗動物之一，常被用于藥理、毒理、腫瘤實驗以及各種急、慢性實驗。小鼠的給藥方式主要有灌胃給藥、腹腔注射、皮下注射、尾靜脈注射等。尾靜脈注射是一項重要的給藥方法。目前用來進行小鼠尾靜脈注射一般都是采用筒形結(jié)構(gòu)的裝置，利用溫水浸泡或者酒精擦拭等方法舒張尾靜脈再進行注射的方法[1-5]。由于小鼠體型較小，容易扭動身軀，加之小鼠尾部靜脈血管較細，這就導致了常規(guī)固定裝置難以準確完成尾靜脈注射。本文中，作者根據(jù)小鼠習性以及小鼠尾靜脈注射的一些心得，在現(xiàn)有的小鼠固定器的基礎(chǔ)上對其進行了一些改進，能夠顯著提高小鼠尾靜脈注射的準確率，減少操作時間。

1 材料和方法

1.1 材料

本方法使用到的材料為自制小鼠尾靜脈注射裝置、成年昆明種小鼠、1 mL注射器和脫脂棉。

1.2 小鼠尾靜脈注射裝置的結(jié)構(gòu)

本方法所涉及到的一種小鼠尾靜脈注射裝置，其結(jié)構(gòu)見圖1和圖2。

1.3 小鼠尾靜脈注射裝置的操作

(1)使用前檢查本裝置加熱隔層中是否注滿導熱液體(如蒸餾水)，檢查無誤后打開本裝置電源開關(guān)，設(shè)定溫度為(40～45)℃[5,6]，打開恒溫系統(tǒng)開關(guān)，對裝置進行預熱(15～20)min；(2)將裝入小鼠的固定器嵌入箱體，調(diào)節(jié)限位條的螺旋桿將小鼠固定，同時將小鼠尾部用固定簧片固定在注射臺斜面上，使小鼠一側(cè)的尾靜脈朝上；(3)打開照明系統(tǒng)開關(guān)，觀察小鼠尾靜脈舒張狀況，調(diào)整小鼠尾巴的位置待其尾靜脈在燈光照射下清楚可見時，進行尾靜脈注射操作；(4)完成1只小鼠的尾靜脈注射后，將小鼠固定器取下，另一個裝好小鼠的固定器重新嵌入箱體，重復上述步驟1～3。

圖1 裝置主體結(jié)構(gòu)示意圖Fig.1 Schematic diagram of the atructure of the device

圖2 小鼠固定器結(jié)構(gòu)示意圖Fig.2 Schematic diagram of the atructure of the mouse holder

2 結(jié)果

在室溫相同的情況下，自然光照射下的小鼠尾靜脈不能清楚看見，對于注射位置不能準確把握，如圖3；采用本裝置對小鼠尾靜脈進行保溫及集中照明，可以清楚地看到尾靜脈，如圖4，這對于注射操作提供了極大的便利，提高了注射準確性及速度。

3 討論

采用傳統(tǒng)方式進行尾靜脈注射操作時，環(huán)境溫度對于小鼠尾靜脈舒張程度有很大的影響，通常用(40～45)℃的溫水浸泡[7]小鼠尾部或者用70% 左右的乙醇[3]擦拭來擴張小鼠的尾靜脈，然后需要將小鼠尾部擦干再進行注射操作。采用本裝置對小鼠進行尾靜脈注射時，只需提前預熱好裝置，然后將小鼠尾部直接嵌入到注射凹槽里，利用斜面下部的固定簧片對小鼠尾巴根部進行輕微壓迫，既起到了固定作用，也能對血管中的血液流動形成一定的阻礙，使尾靜脈舒張；在恒溫系統(tǒng)和照明系統(tǒng)的輔助下能清楚地看到小鼠尾靜脈，操作快速簡單，對于環(huán)境溫度沒有很大的要求。

圖3 自然光線下的小鼠尾部Fig.3 The mouse tail seen under normal light

圖4 使用本裝置時的小鼠尾部Fig.4 The mouse tail seen in the device

在注射操作前對小鼠進行牢固可靠的固定是尾靜脈注射成功的一個重要條件。傳統(tǒng)的固定方式一般是采用筒形容器來限制小鼠的軀體，在筒形容器的兩端分別開口作為小鼠的呼吸孔和尾部預留孔。該方法容易導致小鼠軀干扭動，易對其尾部造成傷害進而影響尾靜脈注射的操作。本裝置借鑒傳統(tǒng)固定方式，在小鼠固定器中內(nèi)置了一個小鼠限位條，通過一側(cè)的螺桿來對其進行高度調(diào)節(jié)，對小鼠的胸腹部進行限位固定，能適應(yīng)不同體型的小鼠同時又能避免小鼠軀體扭動造成的傷害；此外，在小鼠固定器的后部還設(shè)有一個30°～40°傾角的注射臺，注射臺的斜面上有順尾部方向的注射凹槽，斜面下部有一個固定簧片，配合上部的另一個固定簧片，能對小鼠尾部進行可靠的固定。需要注意的是在固定小鼠尾部時需將小鼠尾部輕微翻轉(zhuǎn)以使一側(cè)的尾靜脈朝斜上的角度，該角度既能讓尾靜脈在燈光照射下清楚顯現(xiàn)又能使尾靜脈注射操作順利進行。

一般進行小鼠尾靜脈注射操作時，在使用筒形容器固定了小鼠軀體之后，實驗操作者用左手的手指相互配合將小鼠尾部拉直并固定，右手持1 mL注射器使針頭和小鼠尾靜脈呈近平行(小于15°)角度，從小鼠尾部1/3處進入其中，回抽注射器有回血后表明刺入成功即可進行藥物推注[5,8-9]。應(yīng)用該方法進行尾靜脈操作時手指拉拽小鼠尾部的力度不好掌握，容易對小鼠尾部造成傷害，且尾部與注射器針頭的角度不好控制，尤其對于新手來說更是如此。角度不合適容易造成針頭穿透血管而導致注射失敗。通過多次試驗，最終確定本裝置注射臺的傾角在30°～40°為宜，該角度最適合手持注射器進行注射操作。加之注射臺中的注射凹槽、固定簧片以及改進的小鼠固定器多方位地對小鼠進行固定，使得注射操作更加穩(wěn)定快速。

傳統(tǒng)注射操作時，1只小鼠注射完后從固定器中釋放出來，再用同一個固定器固定下1只小鼠，在連續(xù)操作方面有諸多不便。改進后的小鼠固定器設(shè)計成嵌入式，能夠快速從該裝置的面板上固定或取下，在實驗過程中準備多個小鼠固定器就能實現(xiàn)小鼠尾靜脈注射操作的快速連續(xù)進行，進一步地提高了實驗效率。

[1] 余濤, 曾陽, 孫玉俠, 等. 一種小鼠尾靜脈注射裝置 [P]. 中國, 201520319833.4[P].2015-11-04.

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A new device and method for tail vein injection in mice

YU Tao1, ZENG Yang1, SUN Yu-xia1, SONG Yong-peng3,TANG Xun2

(1. Qinghai Normal University, Xining, 810008, China; 2. Gansu Agricultural University, Lanzhou, 730070； 3. Qinghai Light Industry Institute, Xining 810000)

Objective To provide a device and an effective method for tail vein injection in mice. Methods Doing the tail vein injection in mice with the self-designed device which is consisted of constant temperature part, lighting part and holding part. The difficulty and time of injection with and without the device were compared. Results It was faster and more accurate to perform the tail vein injection in mice with this self-designed device. Conclusion Using this self-designed device can significantly improve the efficiency and save the injection time.

Mice; Intravenous injection; Tail vein injection device

國家自然科學基金(編號：81460652)；青海省自然科學基金(編號：2015-ZJ-907)；青藏高原藥用動植物資源重點實驗室(2014-z-y25)。

余濤(1992-)，男，在讀研究生，研究方向：藥物植物資源。E-mail：214989260@qq.com。

曾陽( 1964- )，男，教授，研究方向: 高原藥用動植物資源研究與開發(fā)。E-mail: zy-3@263.net。

R-33

A

1671-7856(2016)10-0082-03

10.3969.j.issn.1671-7856. 2016.10.016

2016-06-20