許清，徐洪衛(wèi)

（無錫市中心血站：1.質管科；2.成分制備科，江蘇214021）

冷沉淀凝血因子質量控制項目的影響因素

許清1，徐洪衛(wèi)2

（無錫市中心血站：1.質管科；2.成分制備科，江蘇214021）

目的探討能夠影響冷沉淀凝血因子質量控制項目的關鍵因素。方法收集該站2014年及2015年冷沉淀制品的外觀、容量、纖維蛋白原含量、FⅧ因子含量和無菌檢查等5個項目的抽檢結果，從冷沉淀制備的每個環(huán)節(jié)分析影響其最終質量的各種因素。結果冷沉淀制品的不合格項主要集中在FⅧ因子的含量上，容量也偶有不合格現(xiàn)象發(fā)生。結論個體差異、采集、融化、制備及檢測過程均可影響冷沉淀凝血因子的最終質量。

沉淀；低溫；血液凝固因子；因子Ⅷ；纖維蛋白原；血漿；質量控制

冷沉淀凝血因子是將保存期內的新鮮冰凍血漿在1～6℃融化后，分離出沉淀在血漿中不溶解的白色沉淀物在1 h內速凍而制成的成分血[1]，含有豐富的Ⅷ因子、纖維蛋白原、纖維結合蛋白、血管性血友病因子及Ⅷ因子[2]。《GB18469-2012全血及成分血質量要求》中規(guī)定，冷沉淀凝血因子的質量控制項目有外觀、容量、纖維蛋白原含量、FⅧ因子含量和無菌檢查等[3]。無錫市中心血站從冷沉淀制備及檢測過程的各環(huán)節(jié)著手，對能夠影響其質量控制項目的關鍵因素做出探討，為提高冷沉淀制品的質量，充分發(fā)揮其臨床功效做出努力。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1材料來源隨機抽取無錫市中心血站及江陰宜興分站的合格品庫內的冷沉淀凝血因子，每月各4袋。2014年及2015年每年共計144袋。

1.1.2儀器恒佳DT-502A電子天平（常熟市佳衡天平儀器有限公司），ACL7000全自動血凝儀（貝克曼公司），BacT/ALERT 3D細菌培養(yǎng)儀（生物梅里埃公司）。

1.2方法將抽檢的冷沉淀凝血因子按照《血站技術操作規(guī)程（2012版）》進行質量檢查。根據(jù)冷沉淀制品的外觀、容量、纖維蛋白原含量、FⅧ因子含量和無菌檢查等5個項目的抽檢結果，從冷沉淀制備的每個環(huán)節(jié)分析影響其最終質量的各種因素。

2　結果

在5個質量控制項目中，外觀、纖維蛋白原含量、無菌檢查的合格率可達100%；容量的不合格率在3%左右；而FⅧ因子含量的不合格率接近10%。見表1。

表1　2014年及2015年冷沉淀凝血因子抽檢結果（不合格數(shù)/總數(shù)）

3　討論

近年來，隨著人們對成分輸血認識的不斷提高和對冷沉淀研究的不斷深入，冷沉淀的臨床應用也越來越廣泛。現(xiàn)不僅適用于傳統(tǒng)的各種原因引起的凝血因子缺乏的患者如血友病、大出血等，還適用于燒傷、腫瘤、皮膚黏膜疾病、彌散性血管內凝血、多發(fā)傷和手術創(chuàng)傷等領域[4]。臨床上常出現(xiàn)供不應求的狀態(tài)。

冷沉淀中含有多種凝血因子，《GB18469-2012全血及成分血質量要求》中僅對FⅧ因子及纖維蛋白原的含量做出要求。FⅧ因子參與內源性凝血過程，形成內源性凝血活酶。纖維蛋白原參與血液凝固，通過多種作用方式與生物組織相結合，把血凝塊固定于膠原上。纖維蛋白降解產(chǎn)物在一定條件下可重新溶解，使凝固的血塊液化，防止局部持續(xù)性血栓形成[4]。

冷沉淀的標示量為（25±5）mL?！禛B18469-2012全血及成分血質量要求》對其容量的要求為標示量的±10%，可以理解為18～33 mL為合格范圍。由于本站冷沉淀的制備還是一個全手工的過程，制備時將大部分上層血漿移至空袋，將留下的20～30 mL血漿與沉淀物混合這個步驟完全是人為控制，以目測為主。每個操作人員的判斷力會有差異，因此，裝量有超出標準的現(xiàn)象應該也可以理解。也有單位制備時裝量通過稱量來控制，這樣就比較規(guī)范。FⅧ因子和纖維蛋白原的檢測結果表明，纖維蛋白原較為穩(wěn)定，而且從測定結果來看，每袋冷沉淀的纖維蛋白原含量的平均值遠大于標準規(guī)定的值。從目前來看，還未發(fā)現(xiàn)一例纖維蛋白原不符合規(guī)定。相對而言，F(xiàn)Ⅷ因子是一種不穩(wěn)定的凝血因子，在體外的半衰期為12～24 h，其含量會隨著制備時間的延長而下降，12 h可減少41.17%，24 h可減少42.82%[5]。抽檢結果的不合格項主要集中在此項目上。

制備冷沉淀的過程實際是對凝血因子的一種濃縮過程[6]。通過查閱相關資料及跟蹤查詢，對影響冷沉淀FⅧ因子含量的關鍵因素分析如下：冷沉淀的制備經(jīng)歷了全血、新鮮冰凍血漿、冷沉淀3個階段，影響因素很多，任何一個環(huán)節(jié)的誤差均可影響到冷沉淀制品的質量。首先，正常人群中FⅧ因子的水平相差較大，獻血者的個體存在明顯差異。其次，血液采集過程因素如血流不暢、出現(xiàn)凝塊和溶血都會影響到全血中的FⅧ因子的含量。第三，融化及制備過程因素。在整個制備過程中，冷鏈的要求對冷沉淀來說，顯得尤為重要。目前，國內冷沉淀的制備常用2種方法：離心法和虹吸法。本站及2個分站制備冷沉淀凝血因子仍舊采用的是傳統(tǒng)的離心法。將待制備冷沉淀的新鮮冰凍血漿置于（4±2）℃的冰箱中過夜融化，血漿是平鋪在整個冰箱的不同架盤上。冰箱的不同位置溫度會有差異，而且這個融化過程時間比較長，達十幾個小時。離心時雖然也要求將溫度控制在（4±2）℃的環(huán)境下，但在實際操作時，不可避免溫度會有變化。在制備后期，整個操作過程是在室溫環(huán)境中進行，環(huán)境溫度不能得到很好的控制。這些因素均可致FⅧ因子衰減較多，從而導致FⅧ因子的回收率降低。此外，速凍是保存FⅧ因子的關鍵加工步驟。冷凍速率和血漿中心溫度是2個關鍵參數(shù)。擬速凍的血袋要逐袋平放，而不應重疊堆放。制備好的冷沉淀凝血因子應快速凍結，最好在60 min內將中心溫度降至-30℃以下[7]。在冷沉淀的制備過程中，貫穿整個冷鏈的是人，人是做好冷鏈的第一要素。因此，加強對工作人員的冷鏈培訓，增強冷鏈意識，加強責任心和風險意識，使每個環(huán)節(jié)的人員都能認識到其在冷鏈中的重要作用，冷鏈才能得到保障[8]。有文獻報道，使用冷沉淀凝血因子制備儀的冷沉淀中，F(xiàn)Ⅷ因子和纖維蛋白原含量明顯高于低溫融化箱制備的，此設備值得在血站系統(tǒng)推廣應用[9]。當然，質管人員的檢測過程也應注意合理安排。檢測時，通常是將冷沉淀30～37℃水浴融化，融化時間不超過10min[10]。融化時血袋應垂直放置，血袋連接口的上部應高出水面。融化后先去凈化室做無菌檢查，結束后再進行FⅧ因子和纖維蛋白原的含量測定，測定前還需要一個稀釋樣品和配備相應試劑的一個過程。如果測量前期占用的時間過長，也會使FⅧ因子的檢測結果偏低。因此，檢測人員要盡可能地提高工作效率，縮短樣品置于室溫中的時間，提高檢測的準確度。

[1]蘭炯采，贠中橋，陳靜嫻.輸血免疫血液學實驗技術[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2011：311-313.

[2]劉景漢，汪德清.臨床輸血學[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2011：40-41.

[3]中華人民共和國衛(wèi)生部，國家標準化管理委員會.GB18469-2012全血及成分血質量要求[S].北京：中國標準出版社，2012.

[4]楊建英，雷萬軍，孫先玲.冷沉淀在醫(yī)學領域中的應用[J].河南科技大學學報：醫(yī)學版，2007，25（4）：318-320.

[5]易中梅，王紅蘋，李晨晨，等.全血手工制備濃縮血小板后的血漿再制備冷沉淀的質量評價[J].中國輸血雜志，2013，26（2）：117-120.

[6]章懌，邱穎婕，近魏名，等.冷沉淀制備時間對凝血因子的影響[J].臨床輸血與檢驗，2013，15（2）：169-170.

[7]中華人民共和國衛(wèi)生部.血站技術操作規(guī)程[Z].2012-06-01.

[8]楊振宇，譚萍，張褔，等.淺談血站冷鏈的關鍵控制點[J].臨床輸血與檢驗，2014，16（2）：221-223.

[9]肖樂宇.冷沉淀凝血因子制備儀制備冷沉淀的質量評價[J].中國輸血雜志，2016，29（1）：96-97.

[10]魏亞明，呂毅.基礎輸血學[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2011：341-342.

10.3969/j.issn.1009-5519.2016.21.068

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1009-5519（2016）21-3414-02

（2016-06-01）