孫軍濤，肖付剛，陳東菊

（河南省博士后研發(fā)基地，許昌學(xué)院食品與生物工程學(xué)院，河南許昌461000）

超聲波輔助堿法制備豆渣大豆低聚糖的研究

孫軍濤，肖付剛，陳東菊

（河南省博士后研發(fā)基地，許昌學(xué)院食品與生物工程學(xué)院，河南許昌461000）

研究豆渣制備大豆低聚木糖的工藝。采用超聲波輔助堿法制備豆渣大豆低聚糖，并對(duì)大豆低聚糖的制備工藝進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明，最佳工藝條件為：超聲波功率250 W，溫度50℃，時(shí)間50 min，堿濃度2.0 mol/L，料液比為1∶20（g/mL）。在該條件下豆渣大豆低聚糖提取率為10.19%。

豆渣；大豆低聚糖；超聲波；堿法

大豆低聚糖是大豆中的可溶性寡糖的總稱，主要由棉籽糖、水蘇糖、蔗糖組成，具有促進(jìn)雙歧桿菌的增殖、預(yù)防癌癥、調(diào)節(jié)脂肪代謝、降低血壓、保護(hù)肝臟、提高人體免疫力和預(yù)防齲齒等作用，廣泛應(yīng)用于飲料、酸奶、果醬、糕點(diǎn)和面包等食品中［1-3］。

豆渣是加工豆腐、豆乳等豆制品的副產(chǎn)物，按照每加工1 t大豆產(chǎn)生2 t濕豆渣計(jì)算，目前我國(guó)每年大約生產(chǎn)2 000萬t濕豆渣［4］。豆渣由于其水分含量大，運(yùn)輸困難，又極易腐敗變質(zhì)，通常作為飼料肥料或廢棄。豆渣中膳食纖維的含量高達(dá)50%以上，目前關(guān)于豆渣的綜合利用主要集中于膳食纖維相關(guān)產(chǎn)品的開發(fā)［5-7］。豆渣中也含有一定量的大豆多糖，日本食品公司從豆渣中制備大豆多糖，作為食品保水保型劑、分散劑和阿拉伯樹膠替代品等應(yīng)用于食品工業(yè)中［4］。

目前大豆低聚糖提取方法主要有堿提酸沉法、水浸提法和膜分離等方法，但每種方法都存在缺點(diǎn)，如水浸取法效率低；堿液提取浸取時(shí)間長(zhǎng)，高濃度堿對(duì)設(shè)備腐蝕性大；膜技術(shù)設(shè)備投資大、工藝較復(fù)雜。超聲波輔助提取可以降低提取溫度、縮短提取時(shí)間、提高提取效率，避免提取物長(zhǎng)時(shí)間在高溫條件下發(fā)生降解和褪色等變化，廣泛應(yīng)用于功能成分的提?。?］。因此，本文將堿法制備與超聲波結(jié)合，優(yōu)化堿法提取的工藝條件，減少堿法制備的不利之處，為豆渣低聚糖的制備提供一定的技術(shù)支持。

1　材料與方法

1.1材料與儀器

豆渣：河南省許昌縣產(chǎn)；葡萄糖：上海邁坤化工有限公司；酒石酸鉀鈉：國(guó)藥試劑有限公司；3，5-二硝基水楊酸：上?？曝S化學(xué)試劑有限公司；苯酚：天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司；無水乙醇：天津市大茂化學(xué)試劑廠。

FA1004B分析天平：上海佑科儀器儀表有限公司；BLUESTAR紫外分光光度計(jì)：北京萊伯泰科儀器有限公司；TDZ5-WS離心機(jī)：湖南湘儀實(shí)驗(yàn)儀器開發(fā)有限公司；FW-100萬能粉碎機(jī)：北京科偉永興儀器有限公司；DK-8D電熱恒溫水浴鍋：常州普天儀器制造有限公司；SHZ-D循環(huán)水真空泵：鞏義市峪華科儀器廠；IS128pH計(jì)：上海儀邁儀器科技有限公司。

1.2方法

1.2.1測(cè)定方法

1.2.1.1還原糖的測(cè)定

還原糖測(cè)定方法參照3，5-二硝基水楊酸（DNS）法［9］。

1.2.1.2可溶性總糖的測(cè)定

取待測(cè)上清液1 mL于試管中，加入6 mol/L鹽酸2 mL，沸水浴10 min，冷卻后用6 mol/L NaOH中和至中性，按照還原糖的測(cè)定方法測(cè)定可溶性總糖含量，待測(cè)液中大豆低聚糖的提取率按以下公式計(jì)算。

1.2.2豆渣的預(yù)處理

取一定量干燥后的豆渣，用石油醚在50℃下抽提8 h，干燥后用粉碎機(jī)粉碎備用。

1.2.3超聲波輔助堿法制備豆渣大豆低聚糖單因素試驗(yàn)

分別選擇超聲波功率（200、250、300、350、400 W）、溫度（30、40、50、60、70℃）、時(shí)間（20、30、40、50、60 min）、NaOH濃度（0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mol/L）和料液比［1∶10、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30（g/mL）］影響因素，以大豆低聚糖的提取率為指標(biāo)，研究各因素對(duì)制備大豆低聚糖的影響。

1.2.4超聲波輔助堿法制備大豆低聚糖正交試驗(yàn)

在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，選取超聲波功率、溫度、時(shí)間和堿濃度4個(gè)因素中的三水平進(jìn)行L9（34）的正交試驗(yàn)，以大豆低聚糖的提取率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，確定大豆低聚糖的最佳制備工藝。

1.2.5大豆低聚糖制備對(duì)比試驗(yàn)

為了考察超聲波輔助的效果，豆渣大豆低聚糖制備過程中分別選擇超聲波輔助堿法制備和堿法制備兩種方法做對(duì)比研究，以大豆低聚糖的提取率為指標(biāo)，對(duì)比分析兩種方法。

2　結(jié)果與分析

2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

采用DNS測(cè)定方法，以葡萄糖濃度為橫坐標(biāo)，以吸光值為縱坐標(biāo)，得到葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸標(biāo)準(zhǔn)方程為y=1.326 4x-0.022 7（R2=0.998 6），葡萄糖在0～0.8 mg/mL的范圍內(nèi)，葡萄糖濃度與吸光值呈現(xiàn)很好的線性關(guān)系。

2.2超聲波輔助堿法制備豆渣大豆低聚糖單因素試驗(yàn)

2.2.1超聲波功率對(duì)大豆低聚糖提取率的影響

在溫度40℃，時(shí)間30 min，堿濃度2 mol/L，料液比1∶20（g/mL）條件下，考察超聲波功率對(duì)大豆低聚糖提取率的影響，結(jié)果見圖1。

圖1　超聲波功率對(duì)大豆低聚糖提取率影響Fig.1　Effect of ultrasonic power on the extration of soy oligosaccharides

由圖1所示，隨著超聲波功率的提高，大豆低聚糖的提取率呈現(xiàn)先上升后下降，隨著功率的增大，細(xì)胞壁碎裂，溶出的糖含量增加，但隨著功率的逐漸升高，糖的結(jié)構(gòu)被破壞程度可能性也隨之增加，導(dǎo)致糖含量下降，因此，大豆低聚糖的提取率液隨之降低［10］。當(dāng)超聲波功率為250 W時(shí)，大豆低聚糖的提取率達(dá)到最高為5.45%。

2.2.2溫度對(duì)大豆低聚糖提取率的影響

在超聲波功率250W，時(shí)間30 min，堿濃度2 mol/L，料液比1∶20（g/mL）條件下，考察溫度對(duì)大豆低聚糖提取率的影響，結(jié)果見圖2。

如圖2所示，隨著超聲溫度的升高，大豆低聚糖的提取率逐漸增加，當(dāng)超聲溫度達(dá)到50℃時(shí)，大豆低聚糖提取率達(dá)到最高為5.06%；當(dāng)超聲溫度超過50℃，隨著溫度的升高，導(dǎo)致提取液中部分糖發(fā)生焦糖化反應(yīng)，使大豆低聚糖提取液的顏色逐漸變深，影響大豆低聚糖的感官品質(zhì)，同時(shí)大豆低聚糖的提取率逐漸降低。因此，超聲溫度為50℃較宜。

圖2　溫度對(duì)大豆低聚糖提取率的影響Fig.2　Effect of temperature on the extration of soy oligosaccharides

2.2.3時(shí)間對(duì)大豆低聚糖提取率的影響

在超聲波功率250W，溫度50℃，堿濃度2 mol/L，料液比1∶20（g/mL）條件下，考察時(shí)間對(duì)大豆低聚糖提取率的影響，結(jié)果見圖3。

圖3　時(shí)間對(duì)大豆低聚糖提取率的影響Fig.3　Effect of time on the extration of soy oligosaccharides

如圖3所示，超聲時(shí)間過短，原料與氫氧化鈉溶液之間的接觸不夠充分，糖溶解的不徹底；超聲時(shí)間過長(zhǎng)，對(duì)已經(jīng)溶出的糖的結(jié)構(gòu)可能存在破壞作用，進(jìn)而降低低聚糖的提取率。當(dāng)超聲波時(shí)間達(dá)為50 min時(shí)，大豆低聚糖的提取率達(dá)到最高為5.85%。

2.2.4堿濃度對(duì)大豆低聚糖提取率的影響

在超聲波功率250W，溫度50℃，時(shí)間50 min，料液比1∶20（g/mL）條件下，考察堿濃度對(duì)大豆低聚糖提取率的影響，結(jié)果見圖4。

圖4　堿濃度對(duì)大豆低聚糖提取率的影響Fig.4　Effect of alkali concentration on the extration of soy oligosaccharides

NaOH對(duì)木聚糖提取率的影響如圖4所示，NaOH濃度在0.5 mol/L～2 mol/L范圍內(nèi)，隨著NaOH濃度的增加，破壞了豆渣中半纖維素與纖維素、木質(zhì)素及其他成分間的結(jié)合鍵，有利于低聚糖游離出來，大豆低聚糖的提取率逐漸升高［11］。當(dāng)NaOH濃度為2 mol/L時(shí)，大豆低聚糖的提取率達(dá)到最高約為4.52%。之后，隨著NaOH濃度增加，大豆低聚糖的提取逐漸降低。

2.2.5料液比對(duì)大豆低聚糖提取率的影響

在超聲波功率250W，溫度50℃，時(shí)間50 min，堿濃度2 mol/L條件下，考察料液比對(duì)大豆低聚糖提取率的影響，結(jié)果見圖5。

圖5　料液比對(duì)大豆低聚糖提取率的影響Fig.5　Effect of the ratio of solid to liquid on the extration of soy oligosaccharides

如圖5所示，當(dāng)料液比為1∶10（g/mL）時(shí)，大豆低聚糖的提取率較低，僅為2.31%，當(dāng)料液比較小時(shí)，由于堿液量少，豆渣顆粒無法充分溶脹，造成豆渣中的糖不能充分溶出，因此大豆低聚糖的提取率偏低［12］；當(dāng)料液比升至1∶20（g/mL）時(shí)，大豆低聚糖的提取率達(dá)到最高為4.95%，之后隨著料液比的增加，大豆低聚糖的提取率逐漸降低。

2.3超聲波輔助堿法制備大豆低聚糖正交試驗(yàn)

選取超聲波功率、溫度、時(shí)間和堿濃度四因素中的三水平，進(jìn)行L9（34）正交試驗(yàn)，確定最佳制備工藝，因素水平表和正交試驗(yàn)結(jié)果見表1和表2所示。

表1　正交試驗(yàn)因素水平Table 1　Factors and levels of orthogonal test

由表2可以看出，極差結(jié)果表明影響大豆低聚糖提取率的因素排列順序依次為：C>B>A>D，即時(shí)間、溫度、超聲波功率、堿濃度；超聲波輔助堿法制備大豆低聚糖的最優(yōu)組合為A2B3C3D3，即超聲波功率250 W，溫度50℃，時(shí)間50 min，堿濃度2.0 mol/L。在最佳優(yōu)化條件下，超聲波輔助堿法制備豆渣大豆低聚糖的平均提取率為10.17%。

表2　正交試驗(yàn)結(jié)果Table 2　Results of orthogonal test

選擇優(yōu)化的最佳條件A2B3C3D3和正交試驗(yàn)中提取率最高組合A1B3C3D3做對(duì)比試驗(yàn)，結(jié)果表明，在A2B3C3D3的最佳優(yōu)化條件下，超聲波輔助堿法制備豆渣大豆低聚糖的平均提取率10.19%，組合為A1B3C3D3的平均提取率為9.92%，優(yōu)化后的工藝條件具有較高的提取率。

2.4對(duì)比試驗(yàn)

為了分析超聲波輔助的效果，分別采用超聲波輔助堿法和堿法兩種方法制備豆渣大豆低聚糖。超聲波輔助堿法制備豆渣大豆低聚糖工藝條件為超聲波功率250 W，溫度50℃，時(shí)間50 min，堿濃度2.0 mol/L，料液比為1∶20（g/mL）；堿法制備大豆低聚糖工藝條件為溫度50℃，時(shí)間50 min，堿濃度2.0 mol/L，料液比為1∶20（g/mL）。試驗(yàn)結(jié)果表明，采用堿法制備豆渣大豆低聚糖的提取率為5.24%，與超聲波輔助堿法相比降低了4.95%，因此，超聲波輔助能夠顯著提高豆渣大豆低聚糖的提取率。

3　結(jié)論

通過單因素和正交試驗(yàn)確定了超聲波輔助堿法制備豆渣大豆低聚糖的最佳工藝：超聲波功率250 W，溫度50℃，時(shí)間50 min，堿濃度2.0 mol/L，料液比為1∶20（g/mL）。在最優(yōu)條件下，超聲波輔助堿法制備豆渣大豆低聚糖的提取率為10.19%。

［1］宋春麗，王文俠，曾風(fēng)彩，等.超聲波和微波輔助提取大豆低聚糖的工藝比較［J］.食品與機(jī)械，2011，27（2）：47-50

［2］程云輝，賈振寶.大豆低聚糖的研究進(jìn)展［J］.食品與機(jī)械，2004，20（6）：57-60

［3］吳素萍.大豆低聚糖功能特性在發(fā)酵食品中的應(yīng)用［J］.中國(guó)釀造，2013，32（7）：11-15

［4］張振山，葉素萍，李泉，等.豆渣的處理與加工利用［J］.食品科學(xué)，2004，25（10）：400-405

［5］婁海偉，遲玉杰.擠壓豆渣中可溶性膳食纖維制備工藝的優(yōu)化［J］.農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào)，2009，25（6）：285-289

［6］陳野.玉米黃粉/豆渣擠壓成型制作可降解塑料的研究［J］.農(nóng)業(yè)機(jī)械學(xué)報(bào)，2007，38（7）：75-77

［7］陳覺聲，劉淑貞，劉雄.微波輔助制備醋酸納米豆渣纖維素工藝研究［J］.中國(guó)糧油學(xué)報(bào)，2014，29（7）：96-101

［8］劉立洋，金龍國(guó)，劉章雄，等.微波和超聲兩種技術(shù)提取大豆低聚糖的效果［J］.2008，27（5）：838-844

［9］Miller G L.Use of dinitrosalicylic acid reagent for determination of reducing sugar［J］.Analytical Chemistry，1959，31（3）：426-428

［10］潘利華，徐學(xué)玲，羅建平.超聲輔助提取水不溶性大豆膳食纖維及其物理特性［J］.農(nóng)業(yè)工程學(xué)報(bào)，2011，27（9）：387-392

［11］鄭貴富.大豆低聚糖在堿液中的浸出及在食品中的加工特性［J］.食品工業(yè)科技，1999（2）：24-25

［12］李秀婷，孫寶國(guó)，宋煥祿，等.玉米芯水不溶性木聚糖的堿法提取及酶解分析［J］.中國(guó)食品學(xué)報(bào)，2010，10（5）：171-176

Ultrasound-assisted Alkali Extraction of Soy Oligosaccharides from Soybean Dregs

SUN Jun-tao，XIAO Fu-gang，CHEN Dong-ju
（Henan Postdoctoral Research Base，F(xiàn)ood and Bioengineering College，Xuchang University，Xuchang 461000，Henan，China）

Ultrasound-assisted alkali extraction of soy oligosaccharides from soybean dregs was studied.Result indicated that the optimal parameters were as follows：ultrasonic power 250 W，ultrasonic temperature 50℃，ultrasonic time 50 min，the sodium hydroxide amount of 2.0 mol/L，solid to liquid ratio of 1∶20（g/mL）.Under the optimized conditions，the yield of soy oligosaccharides was about 10.19%.

soybean dregs；soy oligosaccharides；ultrasonics；alkali methods

10.3969/j.issn.1005-6521.2016.21.020

河南省高等學(xué)?？萍紕?chuàng)新團(tuán)隊(duì)支持計(jì)劃（15IRTSTHN016）；許昌市科技經(jīng)費(fèi)資助項(xiàng)目重點(diǎn)科技計(jì)劃項(xiàng)目（20141213）；許昌學(xué)院產(chǎn)學(xué)研項(xiàng)目（2015CXY06）

孫軍濤（1982—），男（漢），講師，博士，研究方向：食品科學(xué)。

2015-12-31