李 穎石 瑜袁雪濤丁 壯

(1.吉林大學(xué)動物醫(yī)學(xué)學(xué)院,吉林長春　130000;

2.天津市動物疫病預(yù)防控制中心,天津　300402)

天津市種雞場禽白血病的流行病學(xué)調(diào)查

李 穎1，2石 瑜2袁雪濤2丁 壯1*

(1.吉林大學(xué)動物醫(yī)學(xué)學(xué)院,吉林長春130000;

2.天津市動物疫病預(yù)防控制中心,天津300402)

為了解天津地區(qū)種雞場禽白血病（Avian Leukosis，AL）流行情況，在全市8個父母代種雞場采集了血清樣本2024份，泄殖腔棉拭子2030份，通過 ELISA 試劑盒進行了 ALV-J、ALV-AB抗體檢測及 P27 抗原檢測，檢測結(jié)果顯示，天津地區(qū)種雞場禽白血病AB亞群抗體陽性率4.25%；禽白血病J亞群抗體陽性率11.12%。明顯高于ALV-AB抗體陽性水平，P27抗原的陽性率10.74%，表明天津市種雞場禽白血病感染普遍。

禽白血病流行病學(xué)調(diào)查ELISA

禽白血病（Avian Leukosis）是由禽白血病病毒（Avian Leukosis Virus，ALV）引起的禽類多種腫瘤性疾病的統(tǒng)稱，該病能引起多種具有傳染性的良性和惡性腫瘤。ALV主要誘發(fā)髓樣細(xì)胞瘤、成紅細(xì)胞瘤、骨硬化、淋巴細(xì)胞瘤、黏液纖維肉瘤、纖維肉瘤、血管瘤等多樣類型的腫瘤。臨床可見雞生長緩慢、精神沉郁、貧血、食廢、脫水、腹瀉、血管瘤等，蛋雞還可見產(chǎn)蛋率下降或產(chǎn)薄殼蛋、畸形蛋等，剖檢可見肝、脾、腎、法氏囊腫大及其腫瘤等。1908年首次報道至今，該病在世界上許多國家流行和發(fā)生。近年來，禽白血病受到高度重視，成為關(guān)注的熱點。禽白血病的病原學(xué)、流行病學(xué)、診斷技術(shù)、防治措施等方面的研究也不斷取得了一些進展。

近年來在我國大部分地區(qū)禽白血病的發(fā)病率呈逐漸上升的趨勢，并且感染情況越來越復(fù)雜，造成一些雞場經(jīng)濟損失慘重。天津作為北方的經(jīng)濟中心，種禽業(yè)的健康發(fā)展不僅關(guān)系到市場供給、養(yǎng)殖場增收，也與公共衛(wèi)生安全息息相關(guān)。為摸清天津市種雞場禽白血病的感染狀況，本次調(diào)查采集了天津8個種雞場的血清和泄殖腔棉拭子樣品，利用IDEXX公司的禽白血病病毒抗體檢測試劑盒、禽白血病J亞群抗體檢測試劑盒和禽白血病抗原檢測試劑盒分別檢測雞血清中禽白血病病毒AB亞群、J亞群抗體和p27抗原檢測。

1　材料與方法

1.1 檢測樣品

樣品為2015年6月至2016年4月期間在天津5個區(qū)縣的8個種雞場分別采集的血清和泄殖腔棉拭子樣品。種雞場內(nèi)雞群隨機采樣，翅靜脈或心臟采血，分離血清并4℃保存?zhèn)溆?。棉拭子樣品采樣前在樣品管中加?.8mL樣品保存液，無菌棉簽采集雞泄殖腔棉拭子，與稀釋液混勻后冷凍。各類樣品做好標(biāo)記。采集的血清樣品用于禽白血病抗體ELISA檢測，棉拭子樣品用于禽白血病抗原檢測。結(jié)果詳見表1。

表1　樣品采集數(shù)量表

1.2 檢測試劑與儀器

1.2.1 檢測試劑

檢測試劑盒均購自IDEXX公司：

禽白血病病毒抗體檢測試劑盒：用于雞血清中禽白血病病毒（ALV）A 和B亞群的抗體檢測；

禽白血病J亞群抗體檢測試劑盒：用于雞血清中禽白血病病毒（ALV）J亞群的抗體檢測；

禽白血病抗原檢測試劑盒：用于泄殖腔棉拭子p27蛋白檢測。

1.2.2 儀器

全自動酶免工作站（Freedom EVOlyzer，TECAN公司）自動分液器（combi，賽默飛世爾公司）

微量可調(diào)移液器（賽默飛世爾公司）

1.3 實驗室檢測方法

1.3.1 樣品處理

泄殖腔棉拭子樣品恢復(fù)至室溫，讓雜質(zhì)沉淀下來。吸取上清，加到反應(yīng)板中；血清樣品在檢測前用稀釋液500倍稀釋混勻后檢測。

1.3.2 檢測方法

酶免工作站按IDEXX公司檢測試劑盒要求的試驗過程設(shè)定工作程序。

2 結(jié)果

2.1 天津市種雞場禽白血病檢測情況

在天津全市5個區(qū)縣的8個種雞場共檢測血清樣品2024份，泄殖腔棉拭子2030份。調(diào)查結(jié)果有75%（6/8）的種雞場A/B亞群抗體陽性，有2個種雞場未檢測到AB亞群抗體；100%（8/8）的種雞場J亞群抗體和p27抗原陽性。結(jié)果詳見表2。

2.2 各種雞場禽白血病AB及J亞群的感染情況

此次調(diào)查共采集血清樣品2024份，禽白血病AB亞群抗體在各場之間感染水平存在差異，平均陽性率4.25%，8個種雞場的最高的陽性率9.18%，最低的未檢出。禽白血病J亞群抗體平均陽性率11.12%，8個種雞場的最高的陽性率15.14%，最低的1.52%。

2.3 各種雞場禽白血病p27抗原檢測情況

此次調(diào)查共采集泄殖腔棉拭子樣品2030份，禽白血病p27抗原在各場之間感染水平存在差異，平均陽性率10.74%，8個種雞場的最高的陽性率17.19%，最低的3.50%。

3 討論

（1）為摸清天津市種禽場禽白血病流行情況，本次調(diào)查利用IDEXX公司的酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測試劑盒。AB抗體檢測用于檢測雞血清中禽白血病外源性病毒經(jīng)典亞群（A亞群和B亞群）抗體的相對水平，J亞型抗體檢測用于檢測雞血清中禽白血病J亞群的抗體水平。抗原檢測是對ALV病毒群的衣殼蛋白p27進行檢測，是高度保守的群特異性抗原，不同的亞型間無明顯的區(qū)別。通過p27檢測，可以了解ALV感染和排毒傳播的情況。調(diào)查結(jié)果表明，ALV感染在天津地區(qū)種雞場普遍存在。

表2　天津種雞場禽白血病調(diào)查檢測結(jié)果

（2）調(diào)查結(jié)果顯示天津8個種雞場禽白血病AB亞群抗體和J亞群抗體陽性率分別為4.25%和11.12%，AB亞群和J亞群的感染水平不同，依此判斷天津地區(qū)禽白血病感染主要以J亞群為主。

（3）在調(diào)查的8個種雞場中編號E1的種雞場為肉種雞場，該場未檢出ALV-AB抗體，J亞群抗體和p27抗原陽性率是所有種雞場中最低的，說明天津市肉種雞場禽白血病感染情況好于蛋種雞場。

李穎（1971-），女，天津市人，高級獸醫(yī)師，主要從事動物疫病監(jiān)測。

天津市農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化與推廣項目（201501020）

丁壯