閔靜，許三林，戴一菲

（1.湖北職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)院，湖北　孝感　432000；2.孝感市中心醫(yī)院，湖北　孝感　432000）

CerbB-2基因蛋白在胃腺癌中的表達(dá)

閔靜1，許三林1，戴一菲2

（1.湖北職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)院，湖北孝感432000；2.孝感市中心醫(yī)院，湖北孝感432000）

目的研究CerbB-2基因蛋白檢測對(duì)胃腺癌的臨床意義。方法應(yīng)用免疫組化法對(duì)235例胃癌組織標(biāo)本、95例正常切緣黏膜組織標(biāo)本中的CerbB-2基因蛋白進(jìn)行檢測。結(jié)果CerbB-2基因蛋白在胃癌組織、正常切緣組織中的高表達(dá)率分別為35.7%、9.47%，存在顯著性差異（P＜0.01）；CerbB-2基因蛋白表達(dá)與患者的年齡、性別、腫瘤大小及分化程度均無相關(guān)性（P＞0.05），而與腫瘤的臨床分期（TNM分期）、浸潤深度、轉(zhuǎn)移有關(guān)，且存在顯著性差異（P＜0.01）。結(jié)論CerbB-2基因蛋白與胃腺癌的發(fā)展有緊密聯(lián)系，是判斷胃腺癌生物學(xué)行為及預(yù)后的重要指標(biāo)。

胃腺癌；CerbB-2基因蛋白；相關(guān)性

癌基因CerbB-2促進(jìn)細(xì)胞有絲分裂，具有酪氨酸激酶活性，加速腫瘤細(xì)胞增殖。因此，對(duì)CerbB-2基因在胃癌組織中的生物學(xué)特性進(jìn)行研究非常有意義［1，2］。檢測胃癌組織中CerbB-2的表達(dá)，研究其與胃腺癌生物學(xué)行為的相關(guān)性，對(duì)指導(dǎo)臨床用藥、研究新藥物及治療方法具有重要意義。

1　材料與方法

1.1胃癌標(biāo)本

235例標(biāo)本均選自2009—2013年孝感市中心醫(yī)院及孝感市第一人民醫(yī)院消化腫瘤外科的胃腺癌患者，均為新鮮標(biāo)本?；颊吣挲g32～76歲，平均年齡55.7歲，男性131例，女性104例。樣本離體后立即取材，于10%福爾馬林溶液中固定。

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）有完整病例資料；術(shù)前未接受過針對(duì)腫瘤的治療；（2）常規(guī)行切片HE染色，證實(shí)非腫瘤胃黏膜無癌細(xì)胞累及，腫瘤原發(fā)灶均經(jīng)病理證實(shí)，轉(zhuǎn)移灶系轉(zhuǎn)移的癌組織；癌組織癌細(xì)胞累及比例大于75%。

1.2自身對(duì)照組標(biāo)本

自身對(duì)照組的95例標(biāo)本均來自切取實(shí)驗(yàn)組胃癌標(biāo)本時(shí)的切緣黏膜組織，即距離腫瘤邊緣5 cm之外的非腫瘤胃黏膜組織。

1.3主要實(shí)驗(yàn)儀器和試劑

電熱恒溫培養(yǎng)箱（Jc303型），上海成順儀器儀表有限公司；自動(dòng)免疫組化儀AS LINK48，Dako公司；切片機(jī)SHANDON FINESSE ME+；奧林巴斯顯微鏡CX41；cerbB-2試劑［克隆號(hào)EP3］。

1.4方法

1.4.1免疫組化法EnVisionTM二步法：常規(guī)石蠟包埋、切片（切片厚度3 μm），65℃烤片2小時(shí)，經(jīng)二甲苯脫蠟以及梯度酒精水化后，用EDTA（10 mm，pH 9.0）溶液高壓抗原修復(fù)，經(jīng)蒸餾水及PBS沖洗，3%H2O2封閉5 min，再以PBS沖洗后在免疫組化儀上完成免疫組化染色，最后經(jīng)蘇木素復(fù)染，中性樹膠封片。

1.4.2免疫組化結(jié)果評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)無反應(yīng)或≤10%的腫瘤細(xì)胞膜染色為0；≥10%的腫瘤細(xì)胞微弱或隱約可見膜染色，僅有部分細(xì)胞膜染色為+；≥10%的腫瘤細(xì)胞有弱到中度的基底膜、側(cè)膜或完全性膜染色為++；≥10%的腫瘤細(xì)胞基底膜、側(cè)膜或完全性膜強(qiáng)染色為+++。把0、+視為低表達(dá)，++、+++視為高表達(dá)。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行分析，采用卡方檢驗(yàn)。

2　結(jié)果

2.1實(shí)驗(yàn)組與自身對(duì)照組比較

實(shí)驗(yàn)組與自身對(duì)照組CerbB-2高表達(dá)率有顯著性差異（P＜0.01），見表1。

表1　兩組標(biāo)本中CerbB-2基因蛋白的表達(dá)情況

2.2CerbB-2基因蛋白高表達(dá)與胃腺癌患者臨床病理資料的關(guān)系

研究結(jié)果顯示，CerbB-2基因蛋白高表達(dá)率在實(shí)驗(yàn)組與自身對(duì)照組間有顯著性差異（P＜0.01）。CerbB-2基因蛋白表達(dá)與腫瘤的大小和分化程度、患者年齡、性別無相關(guān)性（P＞0.05），而與腫瘤的臨床分期、浸潤深度、轉(zhuǎn)移相關(guān)（P＜0.01），見表2。

3　討論

CerbB-2也稱Her-2/neu，是一種原癌基因，位于17q21上，其基因表達(dá)產(chǎn)物具有酪氨酸激酶活性作用。CerbB-2正常情況下處于相對(duì)靜止?fàn)顟B(tài)，當(dāng)受到各種誘因作用時(shí)，其結(jié)構(gòu)和表達(dá)調(diào)控失常從而被激活，引起細(xì)胞增殖，從而導(dǎo)致細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化［3］。本研究結(jié)果顯示：實(shí)驗(yàn)組CerbB-2基因蛋白的高表達(dá)率為35.7%，與自身對(duì)照組有顯著性差異（P＜0.01），說明CerbB-2基因蛋白與胃腺癌的發(fā)生存在密切關(guān)系。因此，針對(duì)存在胃癌

高危因素（如亞洲地區(qū)、有家族史、吸煙、不良飲食習(xí)慣等）的人群，進(jìn)行CerbB-2基因蛋白檢測，有利于這類患者的診斷。

表2　CerbB-2基因蛋白與胃腺癌患者臨床病理資料的關(guān)系

實(shí)驗(yàn)表明，胃癌組織中CerbB-2基因蛋白的表達(dá)與患者的年齡、性別、腫瘤大小與分化程度無關(guān)（P＞0.05），所以，胃腺癌患者CerbB-2基因蛋白的表達(dá)具有一定的穩(wěn)定性；其中CerbB-2基因蛋白表達(dá)與分化程度無相關(guān)性（P＞0.05），是否與低分化胃腺癌的CerbB-2基因蛋白丟失有關(guān)，還需進(jìn)一步研究證實(shí)。CerbB-2基因蛋白高表達(dá)率在Ⅲ期和Ⅳ期胃癌患者中明顯高于Ⅰ期和Ⅱ期患者（P＜0.01），漿膜浸潤者明顯高于無浸潤者（P＜0.01），發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者明顯高于無轉(zhuǎn)移者（P＜0.01），提示CerbB-2基因蛋白呈高表達(dá)的胃腺癌患者預(yù)后不良。CerbB-2基因蛋白在胃腺癌中高表達(dá)預(yù)示疾病結(jié)局更差，進(jìn)展性更強(qiáng)，具有一定的臨床應(yīng)用價(jià)值。

總而言之，CerbB-2基因蛋白與胃腺癌的生物學(xué)行為存在密切關(guān)系，對(duì)其進(jìn)行檢測可以為臨床個(gè)體化治療提供依據(jù)。

［1］韓軍平.多藥耐藥基因產(chǎn)物及CerbB-2、Ki-67在胃癌中的表達(dá)及其臨床病理學(xué)意義［J］.現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2011，11（19）：2281-2283.

［2］黃德良，廖日鵬.Cerb-B-2在胃癌組織中的表達(dá)及其與P53的相關(guān)性分析［J］.中國醫(yī)療前沿，2013，2（8）：17-19.

［3］王龍躍，連婧.CerbB-2蛋白在胃癌組織中的表達(dá)及臨床意義［J］.山西職工醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2012，6（22）：10-14.

R730.21

B

1671-1246（2016）03-0142-02

湖北職業(yè)技術(shù)學(xué)院院級(jí)課題“CerbB-2在胃癌TNM分期及微轉(zhuǎn)移鑒別中的應(yīng)用研究”（鄂職院2013B07）