●金肇權(quán) 吳松 顧湉荑

急性腦梗死患者血清C反應(yīng)蛋白、脂聯(lián)素和T細(xì)胞亞群與神經(jīng)功能及臨床預(yù)后的關(guān)系

●金肇權(quán) 吳松 顧湉荑

目的：探討急性腦梗死患者血清中C反應(yīng)蛋白（CRP）/脂聯(lián)素（APN）、T細(xì)胞亞群與神經(jīng)功能及臨床預(yù)后的關(guān)系。方法：選取我院2013年9月-2016年9月間收治89例急性腦梗死患者為研究對(duì)象，分為預(yù)后不良及預(yù)后良好兩組，所有患者入院后監(jiān)測(cè)患者血清中CRP、APN水平，并檢測(cè)患者輔助性T細(xì)胞水平，采用NIHSS評(píng)分評(píng)價(jià)患者神經(jīng)功能、探討患者急性腦梗死患者血清中CRP/APN水平、T細(xì)胞亞群（輔助性Th17細(xì)胞、調(diào)節(jié)性Treg細(xì)胞）與患者神經(jīng)功能及患者臨床預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果：預(yù)后不良組患者血清CRP、CRP/APN水平分別為40.9±7.8、8.6±6.7，高于預(yù)后良好組，而預(yù)后不良組APN水平為1.9±0.8，低于預(yù)后良好組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05＝；預(yù)后不良組Th17、Th17/Treg細(xì)胞分別為1.19±0.17、0.15±0.04，明顯低于預(yù)后良好組患者，而Treg含量為5.25±1.71，明顯高于預(yù)后良好組，差異顯著，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；采用logisitic回歸分析探討影響腦梗死預(yù)后的因素，多因素分析提示：CRP/APN（P=0.014）、Treg細(xì)胞/Th17細(xì)胞（P=0.03）、NIHSS評(píng)分（P=0.012）是腦梗死患者死亡的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。結(jié)論：血清中CRP/APN水平與及T細(xì)胞亞群與急性腦梗死患者神經(jīng)功能及臨床預(yù)后密切相關(guān)。

急性腦梗死；神經(jīng)功能；CRP/APN水平；輔助性T細(xì)胞

腦梗死是臨床常見危急重癥，具有較高的致殘率和致死率，是威脅人類健康的重要疾病，腦梗死的發(fā)生給患者及家庭帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，神經(jīng)功能是影響患者臨床預(yù)后和生存質(zhì)量的主要指標(biāo)之一[1,2]。腦梗死對(duì)機(jī)體是一種嚴(yán)重的打擊，可以促進(jìn)機(jī)體炎癥反應(yīng)活化，血清C反應(yīng)蛋白（Creactiveprotein，CRP）是反應(yīng)機(jī)體炎癥反應(yīng)程度的重要臨床指標(biāo)[3,4]。脂聯(lián)素（adiponectin，APN）是脂肪組織特異性分泌的一種激素，參與糖類和脂肪的代謝。近年來APN被證實(shí)參與胰島素抵抗的病理過程，具有強(qiáng)大的抗炎作用，能抑制炎癥反應(yīng)程度[5-6]。CRP/APN能反應(yīng)機(jī)體炎癥狀態(tài)。輔助性T細(xì)胞17（Thelpercell17,Th17）和調(diào)節(jié)性細(xì)胞（Regulatory,Tregs）是T細(xì)胞亞群的重要結(jié)構(gòu)組成部分，Th17細(xì)胞參與調(diào)解免疫炎癥反應(yīng)，Treg細(xì)胞與自身免疫系統(tǒng)疾病發(fā)生密切想，兩者均與腦梗死病情發(fā)展密切相關(guān)。本研究分析我院89例急性腦梗死患者的臨床資料，探討CRP、APN、Th17、Treg與急性腦梗死患者神經(jīng)功能及臨床預(yù)后的關(guān)系，現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下：

1 材料與方法

1.1 材料

89例急性腦梗死患者均為我院2013年9月-2016年9月間收治的患者，其中男性47例，女性42例；平均年齡為（56.3±6.9）歲；入選標(biāo)準(zhǔn)：符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)制定的急性腦梗死的診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]，依從性好能完成隨訪；排除標(biāo)準(zhǔn)：①就診時(shí)存在呼吸、循環(huán)衰竭的患者；②近期存在出血、感染、輸血等情況可能影響炎癥水平的患者；③使用免疫抑制劑或合并自身免疫系統(tǒng)疾病等可能影響血清中Th17、Treg細(xì)胞水平的患者；③孕婦、精神病患者。④出血性梗死；⑤嚴(yán)重高血壓，收縮壓大于220mmHg，舒張壓大于110mmHg；⑥存在嚴(yán)重肝腎疾??；本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有患者均簽署知情同意書。本研究以休克、腦死亡、死亡為預(yù)后不良，定為觀察組共14例，預(yù)后良好的患者定為對(duì)照組患者共75例，兩組患者一般臨床資料對(duì)比結(jié)果見表1。

表1 兩組患者一般資料比較

1.2 方法

（1）治療方法。所有患者均給予腦梗死的常規(guī)治療包括：腦梗死的治療均參照中華醫(yī)學(xué)會(huì)指定神經(jīng)病學(xué)分會(huì)指定的治療指南[8]進(jìn)行治療，包括抗血小板聚集、調(diào)脂穩(wěn)定血管斑塊，控制血壓，血糖等高危因素，以及抗氧自由基、營養(yǎng)神經(jīng)等；

（2）檢測(cè)指標(biāo)。①血清中CRP和APN水平檢測(cè)：抽取患者外周靜脈血2ml，采用MultiskanMK3雷杜酶標(biāo)儀酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀（上海天呈科技有限公司）測(cè)定其中CRP和APN水平，試劑盒均購于武漢博士德生物科技有限公司。②輔助性T細(xì)胞水平檢測(cè)：收集患者空腹外周靜脈血，用activemotif公司的試劑盒按說明書提取外周血單核細(xì)胞（PBMCs），得到PBMCs后PBS重懸細(xì)胞，取20ul細(xì)胞懸液，調(diào)節(jié)細(xì)胞濃度，按照流式細(xì)胞檢測(cè)說明書加入相流式細(xì)胞儀抗體后，按照說明書進(jìn)行相關(guān)操作，流式細(xì)胞儀上檢測(cè)細(xì)胞Treg細(xì)胞和Th17細(xì)胞含量，Treg細(xì)胞采用Foxp3AlexaFluor488/CD25PE/CD4PerCP，Th17細(xì)胞采用抗人IL-17AlexaFluor647/CD3FITC/CD4PE，兩種抗體均購于上海百賽生物科技有限公司；

（3）神經(jīng)功能評(píng)分。在患者就診6小時(shí)內(nèi)進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分，神經(jīng)功能評(píng)分采用美國國立衛(wèi)生院卒中量表（NIHSS）進(jìn)行評(píng)分。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行資料的統(tǒng)計(jì)分析。定量資料均數(shù)以±s表示，比較采用t檢驗(yàn)。采用Spearman和pearson相關(guān)分析NIHSS評(píng)分與一般因素的關(guān)系，采用logisitic回歸分析模型進(jìn)行生存分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同預(yù)后患者CRP、APN水平比較

本研究中14例患者為預(yù)后不良，觀察組患者血清CRP、CRP/APN水平分別為40.9±7.8、8.6±6.7，高于對(duì)照組，而觀察組APN水平為1.9±0.8，低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），具體見表2。

表2 不同預(yù)后患者CRP、APN、CRP/APN的比較

2.2 不同預(yù)后患者血清中輔助性T細(xì)胞水平的比較

觀察組組Th17、Th17/Treg細(xì)胞分別為1.19±0.17、0.15±0.04，明顯低于預(yù)后良好組患者，而Treg含量為5.25±1.71，明顯高于對(duì)照組，差異顯著，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.05，具體見表3。

表3 ：兩組患者T細(xì)胞亞群結(jié)構(gòu)比較

表4 患者NIHSS評(píng)分與一般臨床因素、CRP、APN和T細(xì)胞水平的相關(guān)性

2.3 影響腦梗死患者臨床預(yù)后的風(fēng)險(xiǎn)因素分析

采用logisitic回歸分析探討影響腦梗死預(yù)后的因素，將性別、年齡、體重指數(shù)、血壓、血脂、CRP、APN、Treg細(xì)胞、Th17細(xì)胞、NIHSS評(píng)分引入logisitic回顧模型，多因素分析提示：CRP/APN（P=0.014）、Treg細(xì)胞/Th17細(xì)胞（P=0.03）、NIHSS評(píng)分（P=0.012）是腦梗死患者死亡的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，具體見表5。

表5 影響腦梗塞患者預(yù)后的多因素分析

3 討論

急性腦梗死是腦卒中最常見類型之一，具有較高的致死率和致殘率，約有25%-75%腦梗死患者會(huì)復(fù)發(fā)，嚴(yán)重影響患者生存質(zhì)量。目前腦梗死患者主要方案為早期溶栓，以及二級(jí)預(yù)防以及對(duì)癥處理[9]。相關(guān)研究提示采用抑制炎癥反應(yīng)的藥物治療腦梗死有助于促進(jìn)患者神經(jīng)功能恢復(fù)，炎癥反應(yīng)程度可能與腦梗死的預(yù)后密切相關(guān)，是影響腦?；颊吲R床預(yù)后的重要危險(xiǎn)因素。

CRP是反應(yīng)機(jī)體炎癥狀態(tài)的重要臨床指標(biāo)，CRP活化可導(dǎo)致多腦梗死局部炎癥細(xì)胞核和炎癥因子活化進(jìn)一步加重炎癥損傷，腦梗死患者CRP明顯增高[10,11]。而且本研究結(jié)果證實(shí)臨床預(yù)后差的觀察組患者CRP明顯高于預(yù)后較好的對(duì)照組患者。APN是一種由脂肪組織分泌的具有抗炎、調(diào)節(jié)能量代謝的細(xì)胞因子，APN的水平反應(yīng)機(jī)體抗炎水平[12]。腦梗死患者血清中APN有助于抑制機(jī)體不良炎癥反應(yīng)，本研究結(jié)果提示預(yù)后不良組患者APN水平明顯更低，進(jìn)一步對(duì)比兩組患者CRP/APN水平結(jié)果發(fā)現(xiàn)預(yù)后不良患者CRP/APN水平明顯高于對(duì)照組患者，CRP/APN水平能更準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)患者炎癥反應(yīng)程度。

相關(guān)研究已經(jīng)證實(shí)在腦梗死的模型中T淋巴細(xì)胞亞群Th1、Th2細(xì)胞比例失調(diào)，免疫細(xì)胞亞群結(jié)構(gòu)失調(diào)可影響患者免疫炎癥反應(yīng)程度[13]。Th17細(xì)胞有助于活化機(jī)體免疫炎癥反應(yīng)，而Treg細(xì)胞可以抑制機(jī)體過度免疫損傷，當(dāng)Treg細(xì)胞含量下降時(shí)機(jī)體免疫損傷進(jìn)一步加重，可導(dǎo)致炎癥反應(yīng)得不到局限進(jìn)而形成壞死、水腫[14]。既往研究已經(jīng)證實(shí)在機(jī)體遭受急性腦梗死打擊時(shí)患者體內(nèi)Th17細(xì)胞含量明顯上升，而Treg細(xì)胞含量明顯下降，而Treg/Th17細(xì)胞可真實(shí)的反映機(jī)體免疫失調(diào)的程度[15]。腦梗死過程中存在免疫功能失調(diào)，而本研究進(jìn)一步證實(shí)預(yù)后不良的腦梗死患者Treg細(xì)胞含量高于預(yù)后較好的患者，而Treg/Th17明顯更低，提示預(yù)后不良患者存在嚴(yán)重的免疫功能失調(diào)，免疫功能失調(diào)可能參與急性腦梗死患者病情的惡化。

神經(jīng)功能影響患者臨床預(yù)后和生存質(zhì)量的主要臨床影響因素，美國國立衛(wèi)生院制定的NIHSS是目前用于評(píng)價(jià)神經(jīng)功能損傷的主要臨床指標(biāo)。本研究采用相關(guān)性分析探討NIHSS評(píng)分與患者臨床因素的關(guān)系，結(jié)果提示NIHSS評(píng)分與性別、年齡、體重指數(shù)無明顯相關(guān)性，而與CRP/APN、Treg/Th17水平成正相關(guān)，這就提示炎癥反應(yīng)和免疫損傷在急性腦梗死患者神經(jīng)功能損傷中有積極重要的意義。

本研究進(jìn)一步采用logistic回歸分析探討腦梗死患者預(yù)后不良的危險(xiǎn)因素，納入患者一般臨床資料以及患者炎癥和免疫指標(biāo)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)CRP/APN，Treg/Th17和NIHSS評(píng)分是患者腦梗死患者預(yù)后不良的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，這就進(jìn)一步證實(shí)腦梗死患者炎癥反應(yīng)程度和免疫失調(diào)具有重要的臨床意義，可能通過影響神經(jīng)功能康復(fù)而影響臨床預(yù)后。

綜上所述，急性腦梗死患者臨床預(yù)后不一，炎癥反應(yīng)程度和免疫失調(diào)在急性腦梗死患者病情過程中有重要臨床意義，CRP/APN、Treg細(xì)胞/Th17細(xì)胞水平是患者臨床預(yù)后不良的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。

（作者單位：蘇州醫(yī)學(xué)院附屬第三醫(yī)院）

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金肇權(quán)（1983～），碩士，主治醫(yī)生，研究方向?yàn)榧痹\醫(yī)學(xué)。

吳松，主治醫(yī)生，研究方向?yàn)榧痹\醫(yī)學(xué)。