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        豬四種疫苗分點(diǎn)同步免疫與單苗免疫的效果對比試驗(yàn)

        2016-10-29 05:37:55姚菊霞
        甘肅畜牧獸醫(yī) 2016年15期
        關(guān)鍵詞:分點(diǎn)豬鏈球菌免疫抗體

        姚菊霞

        (定西市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,甘肅定西 743000)

        甘肅省首屆獸醫(yī)系統(tǒng)征文選登

        豬四種疫苗分點(diǎn)同步免疫與單苗免疫的效果對比試驗(yàn)

        姚菊霞

        (定西市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,甘肅定西743000)

        為了研究豬多苗分點(diǎn)同時(shí)免疫效果,探索一種切實(shí)可行的動(dòng)物防疫新方法,以此提高基層動(dòng)物防疫水平。本研究將口蹄疫、豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征和豬鏈球菌4種疫苗進(jìn)行不同組合試驗(yàn),即分別進(jìn)行單苗、兩兩組合、三三組合、4種疫苗同時(shí)分點(diǎn)注射。試驗(yàn)分為15組,每組20頭,用正向間接血凝試驗(yàn)和ELISA方法檢測免疫抗體。結(jié)果表明:口蹄疫、豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征和豬鏈球菌4種疫苗分點(diǎn)同時(shí)注射產(chǎn)生的抗體水平,與單苗注射相比,差異不顯著(P>0.05),疫苗注射后產(chǎn)生的抗體效價(jià)相對較高且穩(wěn)定,不同疫苗間產(chǎn)生的抗體干擾和拮抗作用不明顯,且抗體合格率均在70%以上,達(dá)到了國家規(guī)定的免疫要求,因此該免疫接種方法可在實(shí)際工作中推廣應(yīng)用。

        豬;疫苗;不同組合;分點(diǎn)注射;免疫抗體;合格率

        近年來,隨著畜牧業(yè)的快速發(fā)展,養(yǎng)豬業(yè)的規(guī)模和數(shù)量逐年增長,與此同時(shí)發(fā)生動(dòng)物疫病的風(fēng)險(xiǎn)也在增加,部分地區(qū)出現(xiàn)了多種豬病的流行,且不斷有新病出現(xiàn)[1],從流行范圍和危害程度來看,豬口蹄疫、豬瘟和豬繁殖與呼吸綜合征仍然是目前危害養(yǎng)豬業(yè)的主要?jiǎng)游镆卟 T偌由掀渌笄葜卮笠卟〉牧餍泻腿诵蠊不疾〉谋┌l(fā),使得動(dòng)物疫病的防控形勢異常嚴(yán)峻,也給各級(jí)畜牧部門如何做好動(dòng)物防疫工作提出新的挑戰(zhàn)和要求。加強(qiáng)動(dòng)物疫病防控,提高動(dòng)物疫病防制技術(shù)水平是搞好畜牧養(yǎng)殖業(yè)生產(chǎn)的關(guān)鍵,研究和推廣這項(xiàng)技術(shù),對提高養(yǎng)殖業(yè)經(jīng)濟(jì)效益,促進(jìn)畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展有著十分重要的意義。

        國家對動(dòng)物疫病防控工作高度重視,實(shí)施強(qiáng)制免疫的動(dòng)物疫苗種類較多且逐年增加,目前正用于強(qiáng)制免疫的豬疫苗主要有口蹄疫、豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征等3種疫苗,采用“一畜一針,分次注射”傳統(tǒng)免疫方法,不但增加了基層獸醫(yī)工作者的工作量,加大了防疫工作難度,而且從近幾年甘肅省通渭縣免疫抗體監(jiān)測情況來看,豬口蹄疫、豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征等疫病的免疫抗體效價(jià)較低。為了探索和創(chuàng)新動(dòng)物免疫新方法,改進(jìn)和提高動(dòng)物防疫水平,2013~2015年,研究組在甘肅省通渭縣開展了豬O型口蹄疫苗、豬瘟苗、豬繁殖與呼吸綜合征苗、豬鏈球菌苗分組分點(diǎn)同時(shí)免疫試驗(yàn),從而確定4種疫苗分點(diǎn)同時(shí)免疫的效果。

        1 材料與方法

        1.1試驗(yàn)動(dòng)物

        在甘肅省通渭縣轄區(qū)隨機(jī)選擇5個(gè)存欄量在100頭左右的養(yǎng)豬場,選取2~3月齡未經(jīng)任何疫苗免疫的健康豬300頭作為試驗(yàn)豬,免疫前對試驗(yàn)豬進(jìn)行基礎(chǔ)抗體滴度測定,所選試驗(yàn)豬豬瘟抗體檢測陰性,口蹄疫感染抗體檢測陰性,免疫抗體滴度低于1∶16。

        1.2試驗(yàn)疫苗

        豬口蹄疫O型滅活疫苗(O/MYA98/BY/2010株),由中農(nóng)威特生物科技股份有限公司生產(chǎn),批號(hào)為H141060J;豬瘟活疫苗(脾淋源),由山東綠都生物科技有限公司生產(chǎn),批號(hào)為1412053;豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗(NVDC-JXA1株),由瑞普(保定)生物藥業(yè)有限公司生產(chǎn),批號(hào)為141216;豬鏈球菌病2型滅活疫苗,由上海海利生物技術(shù)股份有限公司生產(chǎn),批號(hào)為20140609。

        1.3檢測試劑

        O型口蹄疫抗體檢測試劑盒,購自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所,批號(hào)為20150511201;豬瘟抗體檢測試劑盒,購自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所,批號(hào)為20150512202;LSI豬繁殖和呼吸綜合征抗體檢測試劑盒,購自北京天之泰生物科技有限公司,批號(hào)為5-TTVETPRA-049;豬鏈球菌抗體(IgG)診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法),購自深圳市綠詩源生物技術(shù)有限公司,批號(hào)為20150501。

        1.4試驗(yàn)分組

        將從5個(gè)養(yǎng)豬場選取的300頭試驗(yàn)豬,分別編號(hào)為1~300號(hào),隨機(jī)分為15組,每組20頭,依次為第1組1~20號(hào)、第二組2~40號(hào)……第15組281~300號(hào)。

        1.5免疫方法

        按照表1所示,進(jìn)行1~4種疫苗注射。單苗和2種疫苗免疫的注射部位為左右頸部;3種疫苗和4種疫苗同時(shí)分點(diǎn)免疫的注射部位為頸部左右和臀部左右各注射一針。對藍(lán)耳病相關(guān)組,30 d采血后進(jìn)行二次免疫。注射時(shí)嚴(yán)格消毒,規(guī)范操作。免疫劑量:口蹄疫疫苗2 ml/頭、豬瘟活疫苗2 ml/頭、藍(lán)耳病滅活疫苗2 ml/頭、豬鏈球菌苗2 ml/頭。

        表1 試驗(yàn)豬疫苗注射分組

        1.6臨床不良反應(yīng)觀察

        所有試驗(yàn)豬在免疫注射后臨床觀察1~10 d,主要觀察豬的精神和采食狀況、體溫是否正常和是否有其他嚴(yán)重不良反應(yīng)等。

        1.7免疫抗體檢測

        分別于免疫后15 d、30 d、45 d和60 d,經(jīng)前腔靜脈采血,分離血清,用于抗體檢測。

        1.7.1 O型口蹄疫抗體檢測采用正向間接血凝試驗(yàn),具體操作參照試劑盒說明書進(jìn)行。判定標(biāo)準(zhǔn):抗體效價(jià)≥1∶32,抗體陽性;抗體效價(jià)<1∶32,抗體陰性。1.7.2豬瘟抗體檢測采用正向間接血凝試驗(yàn),具體操作參照試劑盒說明書進(jìn)行。判定標(biāo)準(zhǔn):抗體效價(jià)≥1∶32,抗體陽性;抗體效價(jià)<1∶32,抗體陰性。

        1.7.3豬繁殖與呼吸綜合征抗體檢測采用間接ELISA方法,具體操作參照試劑盒說明書進(jìn)行。判定標(biāo)準(zhǔn):IRPC值>20.0為抗體陽性;IRPC值≤20.0為抗體陰性。

        1.7.4豬鏈球菌病抗體檢測采用ELISA方法,具體操作參照試劑盒說明書進(jìn)行。判定標(biāo)準(zhǔn):S/P值≥0.2為抗體陽性;S/P值<0.2為抗體陰性。

        1.8數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

        將檢測數(shù)據(jù)按疫苗種類分類統(tǒng)計(jì),口蹄疫、豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征和豬鏈球菌病均以抗體陽性率表示,并應(yīng)用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)中單因素隨機(jī)分組方法進(jìn)行方差分析[2]。

        2 結(jié)果與分析

        2.1臨床觀察

        除個(gè)別豬只在疫苗注射后24 h內(nèi)出現(xiàn)精神沉郁、體溫升高、慢草不食、飲水少量等現(xiàn)象外,未見其他不良反應(yīng)。出現(xiàn)副反應(yīng)癥狀的主要是口蹄疫疫苗注射組,且與試驗(yàn)豬的個(gè)體情況相關(guān),個(gè)體弱小、營養(yǎng)狀況及體質(zhì)差的反應(yīng)較重;其他組未見明顯臨床癥狀。兩兩組合組、3種疫苗組合組、4種疫苗組合組與單苗注射組間未見明顯差異,平均副反應(yīng)率在10%以下。有臨床癥狀的豬只在48 h內(nèi)陸續(xù)全部恢復(fù)正常,未出現(xiàn)過敏死亡情況。

        2.2不同免疫組口蹄疫抗體產(chǎn)生情況

        從圖1可以看出,除第5組和第13組外其他組試驗(yàn)于15 d時(shí)抗體水平均達(dá)到最高值,且維持時(shí)間較長,第60 d時(shí)仍維持高水平穩(wěn)定態(tài)勢,抗體陽性率均在70%以上。與其他組相比,第1組抗體水平較低,下降較快;第5、6、7、11、12組總體較穩(wěn)定;且第1組與第15組之間差異顯著(P<0.05),除第1組外其他各組之間差異不顯著(P>0.05)。

        2.3不同免疫組豬瘟抗體產(chǎn)生情況

        從圖2中可以看出,第8組、14組、15組在15 d時(shí)抗體達(dá)到最高值,其他各組試驗(yàn)抗體均于30 d時(shí)達(dá)到最高值;各組試驗(yàn)抗體合格率于15 d均已達(dá)到了國家規(guī)定70%的免疫要求,且維持時(shí)間較長;所有試驗(yàn)組于60 d時(shí)抗體水平均有所下降,但仍大于70%。方差分析顯示,第15組與其他各組之間差異不顯著(P>0.05)。

        圖1 口蹄疫抗體檢測結(jié)果

        圖2 豬瘟抗體檢測結(jié)果

        2.4不同免疫組豬繁殖與呼吸綜合征抗體產(chǎn)生情況

        從圖3中可以看出,注射豬繁殖與呼吸綜合征疫苗的8個(gè)組在免疫后15 d、30 d內(nèi)的抗體陽性率都為0;二免后45 d檢測時(shí),各組抗體陽性率在75%以上,除第10組和第11組外均達(dá)到了峰值,60 d時(shí)抗體水平仍保持較高水平穩(wěn)定態(tài)勢。方差分析顯示,第15組與其他各組之間差異不顯著(P>0.05)。

        圖3 豬繁殖與呼吸綜合征抗體檢測結(jié)果

        2.5不同免疫組豬鏈球菌抗體產(chǎn)生情況

        從圖4中可以看出,每組試驗(yàn)動(dòng)物在15 d時(shí)已產(chǎn)生較高水平的抗體,30~45 d抗體達(dá)到最高值,60 d時(shí)抗體水平仍維持較高水平,均達(dá)到國家規(guī)定免疫要求70%。方差分析顯示,第15組與其他各組之間差異不顯著(P>0.05)。

        圖4 豬鏈球菌病抗體檢測結(jié)果

        3 討論

        豬O型口蹄疫、豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、豬鏈球菌4種疫苗兩兩組合、三三組合、或4種疫苗同時(shí)分點(diǎn)注射,平均副反應(yīng)率在10%以下,與單苗注射組相比,臨床癥狀差異不顯著。各種組合組試驗(yàn)動(dòng)物出現(xiàn)精神沉郁、慢草不食、體溫變化等一般免疫副反應(yīng)的比例最高約為10%,有發(fā)病臨床癥狀的比例為1%,和傳統(tǒng)免疫相比,并未增加免疫副反應(yīng)。出現(xiàn)副反應(yīng)癥狀的豬只與試驗(yàn)動(dòng)物的個(gè)體情況相關(guān),個(gè)體弱小、營養(yǎng)狀況及體質(zhì)差的反應(yīng)較重。出現(xiàn)一般副反應(yīng)的豬只,在48 h內(nèi)很快自行恢復(fù),未出現(xiàn)死亡等嚴(yán)重副反應(yīng)。

        第15組口蹄疫免疫抗體水平高于第1組,維持時(shí)間較長且穩(wěn)定,表明口蹄疫、豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、豬鏈球菌病疫苗同時(shí)分點(diǎn)免疫組產(chǎn)生的口蹄疫抗體水平要優(yōu)于單苗免疫組[3,4]。豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、豬鏈球菌病疫苗產(chǎn)生的抗體效價(jià)均較高,在抗體產(chǎn)生的整個(gè)時(shí)期,單苗注射組和4種疫苗同時(shí)注射組在抗體達(dá)到最高值時(shí)抗體合格率均能達(dá)到或超過國家規(guī)定的免疫標(biāo)準(zhǔn)70%以上,且維持時(shí)間也較長。從本次試驗(yàn)結(jié)果看出,一畜2苗、3苗、4苗分點(diǎn)同時(shí)注射,對抗體不會(huì)產(chǎn)生拮抗作用,反而在一定程度上還有促進(jìn)協(xié)同作用[5,7]。

        從本次試驗(yàn)看出,口蹄疫疫苗產(chǎn)生的抗體穩(wěn)定均勻;豬瘟疫苗產(chǎn)生抗體峰值的時(shí)間較遲,一般在免疫后4周左右;豬藍(lán)耳病疫苗一次免疫的效果不佳,因此,在以后的防疫工作中,需進(jìn)行2次加強(qiáng)免疫工作。

        口蹄疫、豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征和豬鏈球菌苗分點(diǎn)同時(shí)免疫對4種抗體的產(chǎn)生沒有顯著影響,沒有增加免疫副反應(yīng),通過綜合分析,可在實(shí)際工作中推廣應(yīng)用“豬一畜多苗多點(diǎn)同時(shí)聯(lián)合注射”免疫操作程序。

        本次試驗(yàn)試驗(yàn)規(guī)模較大,抗體監(jiān)測時(shí)間較短,對分點(diǎn)免疫注射后抗體消長規(guī)律未能進(jìn)行深入跟蹤檢測,需在以后的工作中繼續(xù)深入研究。

        [1]崔尚金.2005年我國豬病流行現(xiàn)狀及特點(diǎn)[J].豬業(yè)科學(xué),2006,(1):34-35.

        [2]唐啟義.實(shí)用統(tǒng)計(jì)分析及其DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)[M].北京:科學(xué)出版社,2002.

        [3]楊慧,封林,黎強(qiáng),等.口蹄疫和豬瘟疫苗同時(shí)免疫注射豬的試驗(yàn)效果[J].四川畜牧獸醫(yī),2008,35(10):29-31.

        [4]華樹明.豬口蹄疫、豬瘟、高致病性藍(lán)耳病分點(diǎn)免疫注射效果觀察[J].獸醫(yī)導(dǎo)刊,2008,(4):23-24.

        [5]沈艷麗,蔡金山,趙志剛,等.豬多種疫苗分點(diǎn)同時(shí)注射的免疫抗體檢測試驗(yàn)[J].山東畜牧獸醫(yī),2011,32(1):9-10.

        [6]馬睿麟,蔡金山,沈艷麗,等.豬瘟、口蹄疫、豬繁殖與呼吸綜合征等多種疫苗免疫試驗(yàn)[J].畜牧與獸醫(yī),2010,42(10):79-82.

        [7]張長龍,嚴(yán)寶英,賈文孝,等.豬瘟、豬口蹄疫、高致病性豬藍(lán)耳病疫苗有效免疫試驗(yàn)初探[J].中國畜牧獸醫(yī)文摘,2009,30(7):28-29.

        [本文獲甘肅省首屆獸醫(yī)系統(tǒng)征文比賽一等獎(jiǎng)]

        (編輯:趙鵬飛)

        S858.28

        A

        1006-799X(2016)15-0003-03

        姚菊霞(1986-),女,甘肅定西人,獸醫(yī)師,主要從事動(dòng)物疫病防治技術(shù)研究推廣工作。

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