戈　銳　周　為　燕　速　劉　寧　安文靜　于鵬杰　張成武

(青海大學附屬醫(yī)院胃腸腫瘤外科，青?！∥鲗帯?10001)

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結(jié)腸腺癌中轉(zhuǎn)化生長因子β激酶1與細胞增殖的關(guān)系

戈銳周為燕速劉寧安文靜于鵬杰張成武

(青海大學附屬醫(yī)院胃腸腫瘤外科，青海西寧810001)

目的檢測結(jié)腸腺癌中轉(zhuǎn)化生長因子β激酶(TAK)1和Ki67表達，觀察TAK1和Ki67標記的增殖指數(shù)的關(guān)系。方法62例結(jié)腸腺癌術(shù)后存留的蠟塊組織作為觀察組，15例距結(jié)腸腫物邊緣>5 cm的正常結(jié)腸黏膜組織作為對照組。應用免疫組化SP法檢測兩組中TAK1和Ki67的表達。結(jié)果兩組中TAK1和Ki67的表達差異有統(tǒng)計學意義。觀察組中TAK1和Ki67的表達均與腫瘤的浸潤深度和最大徑密切相關(guān)，TAK1的表達與分化程度密切相關(guān)。相關(guān)分析顯示觀察組中TAK1和Ki67的表達呈正相關(guān)性。結(jié)論結(jié)腸腺癌中TAK1和Ki67高表達對促進腫瘤的形成和進展有一定作用。TAK1對Ki67標記的增殖可能有一定作用。

結(jié)腸腺癌；轉(zhuǎn)化生長因子β激酶1；Ki67；免疫組化

結(jié)腸腺癌多見于中老年人，與結(jié)腸息肉病有關(guān)，同時存在著機體基因和蛋白的表達失調(diào)〔1，2〕。轉(zhuǎn)化生長因子β激酶(TAK)1是絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，是絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)中的一種，對調(diào)節(jié)細胞的炎癥反應、免疫反應及細胞增殖可能有一定作用〔3，4〕。近年研究顯示TAK1在腫瘤中可能有一定作用〔5，6〕。Ki67是臨床常用的標記細胞增殖的蛋白，其表達穩(wěn)定，同時對預后可能有一定的指導意義〔7，8〕。本研究觀察結(jié)腸腺癌中TAK1和Ki67的表達，分析其臨床意義。

1　資料與方法

1.1一般資料我院行根治手術(shù)并經(jīng)病理確診的結(jié)腸腺癌患者62例作為觀察組，其中男33例，女29例；年齡43～78歲，平均58.6歲。15例距腫物邊緣>5 cm的正常結(jié)腸黏膜組織作為對照組，其中男8例，女7例；年齡44～73歲，平均57.6歲。兩組均留取術(shù)后蠟塊組織，并留取完整臨床資料。兩組一般資料無明顯差異。

1.2TAK1和Ki67表達的檢測TAK1和Ki67的檢測均基于石蠟包埋的術(shù)后組織，應用免疫組化二步法，二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色。嚴格按說明書進行操作，做好質(zhì)量控制及監(jiān)測。

1.3TAK1和Ki67的判定TAK1以細胞質(zhì)中出現(xiàn)淡黃色-棕黃色顆粒定為陽性，Ki67以細胞核中出現(xiàn)淡黃色——棕黃色定為陽性。選擇上皮細胞集中的區(qū)域，在400倍鏡下進行計數(shù)(共3個視野)。陽性根據(jù)以下兩個方面：①陽性細胞百分比<1%為0分；1%～10% 1分，>10%且≤30% 2分，>30%且≤60% 3分，>60% 4分。②細胞的染色陰性為0分；淡黃色1分；黃色2分；棕黃色3分。以二者相加作為最終判定結(jié)果。TAK1：0～2分陰性，3～7分陽性。Ki67：0～5分陰性，6～7分陽性。

1.4統(tǒng)計學方法采用SAS6.12統(tǒng)計軟件進行χ2檢驗或線性相關(guān)分析。

2　結(jié)　果

2.1兩組TAK1和Ki67表達的比較兩組TAK1和Ki67的表達差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。見表1。

2.2觀察組中TAK1和Ki67的表達在不同臨床特征中的比較觀察組中TAK1和Ki67的表達均與腫瘤的浸潤深度和最大徑密切相關(guān)，TAK1的表達與分化程度密切相關(guān)。見表2。

表1　兩組中TAK1和Ki67表達的比較〔n(%)〕

表2　觀察組中TAK1和Ki67的表達在不同臨床特征中的比較〔n(%)〕

2.3觀察組中TAK1和Ki67的相關(guān)性觀察組中TAK1和Ki67(r=0.52，P<0.05)具有正相關(guān)性。

3　討　論

結(jié)腸腺癌的形成與上皮細胞的異型增生有關(guān)，此時腫瘤細胞的形態(tài)多樣，細胞異型程度增加，腺管排列紊亂，同時具有明顯的肌層侵犯〔9〕。結(jié)腸腺癌的發(fā)生及進展與細胞增殖密切相關(guān)，目前標記增殖的經(jīng)典抗體是Ki67，Ki67表達升高時能明顯證實腫瘤處于增殖狀態(tài)中〔10〕。TAK1是唯一需要接頭蛋白的MAPK成員〔11〕。TAK1受多種TAK1及其結(jié)合蛋白(TABs)翻譯后修飾的調(diào)節(jié)，TAK1活化環(huán)節(jié)中的多種絲氨酸和蘇氨酸殘基在細胞因子刺激時發(fā)生磷酸化〔12〕。有研究認為在白細胞介素-1處理細胞時，可以引起核轉(zhuǎn)錄因子(NF)-κB的磷酸化，并且這是TAK1介導NF-κB和活化蛋白轉(zhuǎn)錄因子(AP)-1活化所需要的〔13，14〕。也有研究認為TAK1參與多條信號通路，激活下游相關(guān)的凋亡蛋白，如P38和JNF〔15〕。由于NF-κB和AP-1是調(diào)節(jié)眾多參與炎癥、腫瘤形成和凋亡基因的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子〔16〕，因此TAK1通過NF-κB介導的調(diào)節(jié)生物學功能可能更多。喬飛〔17，18〕通過觀察TAK1在食管癌中的表達，發(fā)現(xiàn)TAK1與腫瘤的臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)，且TAK1的表達與腫瘤的5年生存率有關(guān)，因此認為TAK1可能是食管癌發(fā)病機制中的重要參與者，而靶向TAK1的治療有可能改善食管癌患者的預后。

本文結(jié)果提示TAK1和Ki67高表達是促進上皮細胞惡變及進展為癌的重要因素。TAK1在促進腫瘤形成過程中可以直接引起細胞增殖，使腫瘤體積增大。TAK1和Ki67高表達是促進腫瘤生長和侵襲的重要蛋白，提示TAK1參與腫瘤失控性增生和細胞的成熟過程。雖然本實驗未直接發(fā)現(xiàn)Ki67與分化的關(guān)系，但是統(tǒng)計學結(jié)果也在一定程度上說明了Ki67可能有一定作用。也有研究認為生理情況和腫瘤病理情況下TAK1的作用可能不同，尤其是腫瘤狀態(tài)下，TAK1的作用更明顯，主要表現(xiàn)為調(diào)控細胞生長、分化和凋亡。TAK1對凋亡的作用可能與對腫瘤細胞增殖的作用同樣重要，即TAK1對凋亡的抑制作用明顯〔19〕，而對增殖的作用也比較強，因此TAK1作用的途徑及通路涉及的機制更多。鞠紅艷等〔20〕認為TAK1對結(jié)腸腺癌的發(fā)生具有促進作用，且TAK1的表達可能與K-ras基因突變有關(guān)。也有研究認為TAK1可以促進腫瘤的生長，促進腫瘤的血管生成〔21〕，同時可以保護異常細胞免于自然死亡，增強其轉(zhuǎn)移能力。炎癥反應相關(guān)的細胞因子可能貫穿于腫瘤形成和進展的始終，但是其具體機制有待更多實驗研究〔22，23〕。

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〔2015-02-11修回〕

(編輯苑云杰)

張成武(1963-)，男，主任醫(yī)師，主要從事胃腸腫瘤研究。

戈銳(1982-)，男，碩士，主治醫(yī)師，主要從事胃腸腫瘤研究。

R735

A

1005-9202(2016)15-3745-02；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.15.062