李　鳳　于曉風(fēng)　孫偉倫　劉一鳴　付雯雯　張　虹　睢大筼

(吉林大學(xué)藥學(xué)院藥理教研室，吉林　長春　130021)

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參飛顆粒對大鼠酒精性脂肪肝的保護(hù)作用

李鳳于曉風(fēng)孫偉倫劉一鳴付雯雯張虹睢大筼

(吉林大學(xué)藥學(xué)院藥理教研室，吉林長春130021)

目的觀察參飛顆粒對大鼠酒精性脂肪肝(AFLD)的保護(hù)作用。方法150只雄性Wistar大鼠，取12只作為正常組，其余大鼠制備AFLD模型：1～4 w灌胃給予40%白酒8 g/kg，5～8 w給予50%白酒9 g/kg，9～16 w給予50%白酒10 g/kg。第9周模型大鼠根據(jù)體重隨機(jī)分為模型組、參飛顆粒(1、2、4 g/kg)組及陽性藥水飛薊賓(80 mg/kg)組，各組分別灌胃給予相應(yīng)藥物，正常及模型組給予同體積的0.5%羧甲基纖維素鈉。給藥8 w后，水合氯醛麻醉，腹主動(dòng)脈取血，檢測血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、極低密度脂蛋白(VLDL)、游離脂肪酸(FFA)、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)活性。結(jié)果與正常組比較，模型組大鼠血清TC、TG、VLDL、FFA及MDA含量明顯升高，SOD活性降低，AST、ALT活性升高。與模型組比較，參飛顆粒4g/kg劑量組能明顯降低大鼠血清中TC、TG、VLDL、MDA、FFA含量及ALT活性，升高SOD活性。結(jié)論參飛顆粒對大鼠AFLD具有保護(hù)作用，其作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝、對抗脂質(zhì)過氧化損傷及改善肝功能有關(guān)。

參飛顆粒；酒精性脂肪肝；脂質(zhì)代謝；氧化應(yīng)激

酒精性脂肪肝(AFLD)最初僅表現(xiàn)為脂肪肝，隨著飲酒的繼續(xù)，病情可繼續(xù)發(fā)展為酒精性肝炎、酒精性肝纖維化，以最后形成酒精性肝硬化、肝細(xì)胞癌〔1〕。當(dāng)機(jī)體受到酒精的刺激時(shí)，脂質(zhì)過多的輸入導(dǎo)致肝臟脂蛋白合成代謝發(fā)生障礙，脂肪酸氧化不足，脂肪就會在肝臟沉積，進(jìn)而發(fā)生脂肪肝〔2,3〕。參飛顆粒是以人參、黨參、水飛薊及山楂4味中藥組成的復(fù)方制劑，經(jīng)處方篩選證實(shí)具有保肝、驅(qū)脂及降脂作用。本研究旨在探討參飛顆粒對大鼠AFLD的保護(hù)作用。

1　材料和方法

1.1動(dòng)物雄性Wistar大鼠150只，體重180～220 g，由吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心供給，合格證號：SCXK-(吉) 2007-0003。動(dòng)物飼養(yǎng)于通風(fēng)動(dòng)物房內(nèi)，室溫(20±2)℃，自由進(jìn)食與飲水。

1.2藥品和試劑參飛顆粒由白求恩醫(yī)科大學(xué)制藥廠提供，批號：20120523，以0.5%羧甲基纖維素鈉配制成混懸液；水飛薊賓膠囊由天津天士力制藥股份有限公司生產(chǎn)，批號：20120721，以0.5%羧甲基纖維素鈉配制成混懸液；總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、極低密度脂蛋白(VLDL)、游離脂肪酸(FFA)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(ALT)及谷丙轉(zhuǎn)氨酶(AST)測試盒由南京建成生物工程研究所提供。

1.3實(shí)驗(yàn)方法〔4〕150只大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1 w，取12只大鼠為正常組，其余大鼠造AFLD模型：第1～4周灌胃給予40%白酒8 g/kg，第5～8周給予50%白酒9 g/kg，第9～16周給予50%白酒10 g/kg〔酒精劑量(g)=乙醇體積(ml)×預(yù)配酒精濃度(%)×酒精密度(0.8 g/ml)〕。第9周模型大鼠根據(jù)體重隨機(jī)分為模型組、參飛顆粒(1、2、4 g/kg)組及陽性藥水飛薊賓(80 mg/kg)組，各組分別灌胃給予相應(yīng)藥物，正常及模型組給予同體積0.5%的羧甲基纖維素鈉。給藥8 w后，水合氯醛麻醉，腹主動(dòng)脈取血，分離血清，檢測TC、TG、VLDL、FFA、MDA含量及SOD、AST、ALT活性；取部分肝臟制備勻漿，檢測MDA含量及SOD活性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS10.0軟件行方差分析。

2　結(jié)　果

2.1參飛顆粒對AFLD大鼠脂類代謝的影響與正常組比較，模型組大鼠血清TC、TG、VLDL及FFA含量均有明顯升高(P<0.05或P<0.01)，與模型組比較，參飛顆粒4 g/kg組及水飛薊賓組均能明顯降低大鼠血清TC、TG、VLDL及FFA含量(P<0.05或P<0.01)，參飛顆粒2 g/kg組能明顯降低大鼠血清TG、VLDL及FFA含量(P<0.05)，見表1。

表1　參飛顆粒對AFLD大鼠脂類代謝的影響

與正常組比較:1)P<0.05,2)P<0.01；與模型組比較:3)P<0.05,4)P<0.01；下表同

2.2參飛顆粒對AFLD大鼠自由基的影響與正常組比較，模型組大鼠血清及肝組織MDA含量明顯升高，SOD活性明顯降低(P<0.01)；與模型組比較，參飛顆粒2、4 g/kg組均能明顯降低大鼠血清及肝組織MDA含量，升高血清及肝組織SOD活性(P<0.05或P<0.01)，見表2。

表2　參飛顆粒對AFLD大鼠自由基的影響

2.3參飛顆粒對AFLD大鼠血清肝酶的影響與正常組比較，模型組AST、ALT活性明顯升高(P<0.05或P<0.01)；與模型組比較，參飛顆粒2、4 g/kg劑量組及水飛薊賓組均能明顯降低血清中ALT活性(P<0.05或P<0.01)，AST活性有降低趨勢(P>0.05)，見表3。

表3　參飛顆粒對AFLD大鼠血清肝酶的影響

3　討　論

由于長期飲酒導(dǎo)致肝臟損害，進(jìn)而逐漸形成了AFLD。AFLD發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，目前尚不完全清楚，可能與酒精及其代謝產(chǎn)物對肝臟的毒性作用、氧化應(yīng)激、免疫介導(dǎo)、細(xì)胞因子、細(xì)胞凋亡、內(nèi)毒素、遺傳多態(tài)性、病毒的疊加作用等多種因素有關(guān)〔5～7〕。肝臟是脂類代謝的中心，對脂類的消化、吸收、氧化、分化、轉(zhuǎn)化起著重要作用。乙醇氧化導(dǎo)致的高代謝狀態(tài)使周圍脂肪的動(dòng)員增加，肝細(xì)胞脂肪酸的水平隨著增加，從而造成TG在肝細(xì)胞內(nèi)大量積聚而導(dǎo)致肝細(xì)胞脂肪病變，使肝臟從脂肪氧化器官變?yōu)閮χ鞴?，最終導(dǎo)致AFLD形成〔8,9〕。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，參飛顆粒能顯著降低血清TC、TG水平，提示參飛顆粒可能是通過減少脂質(zhì)沉積起到保護(hù)AFLD大鼠肝臟的作用。

氧化應(yīng)激是活性氧(ROS)產(chǎn)物增加和抗氧化失去平衡引起的酒精肝損傷的重要特征〔10〕。氧化應(yīng)激可增加脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物和細(xì)胞因子的釋放，介導(dǎo)AFLD的發(fā)生發(fā)展。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示酒精可引起體內(nèi)氧化與抗氧化失衡，氧自由基產(chǎn)生增多，從而啟動(dòng)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)。給予參飛顆粒后，大鼠血清中MDA的含量顯著下降，SOD的活力顯著上升，提示參飛顆?？赡苁峭ㄟ^增強(qiáng)大鼠體內(nèi)清除氧自由基的能力和抗脂質(zhì)過氧化來保護(hù)肝細(xì)胞，從而防治AFLD。

ALT及AST酶學(xué)指標(biāo)能反映肝細(xì)胞壞死的程度，直接關(guān)系到AFLD的發(fā)展與轉(zhuǎn)歸〔11〕。本實(shí)驗(yàn)提示參飛顆粒對肝功能具有改善作用，對大鼠AFLD具有保護(hù)作用，其作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝、對抗脂質(zhì)過氧化損傷及改善肝功能有關(guān)。

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〔2016-03-11修回〕

(編輯李相軍/滕欣航)

吉林省科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(No.20130727003YY)

睢大筼(1957-)，男，教授，博士生導(dǎo)師，主要從事心血管藥理學(xué)研究。

李鳳(1987-)，女，醫(yī)學(xué)碩士，主要從事心血管藥理學(xué)研究。

R-322

A

1005-9202(2016)15-3642-02；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.15.014