梁昌衛(wèi)

(海南西部中心醫(yī)院　儋州市第一人民醫(yī)院泌尿外科，海南　儋州　571700)

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CD147 mRNA在前列腺癌組織中的表達(dá)及與臨床生物學(xué)特性的關(guān)系

梁昌衛(wèi)

(海南西部中心醫(yī)院儋州市第一人民醫(yī)院泌尿外科，海南儋州571700)

目的探討CD147mRNA在前列腺癌組織中的表達(dá)及其臨床生物學(xué)特性。方法選擇前列腺癌患者癌組織標(biāo)本54例，同期行前列腺摘除術(shù)與經(jīng)尿道前列腺電切術(shù)的前列腺增生患者的組織標(biāo)本50例。比較兩組中CD147 mRNA的表達(dá)，分析前列腺癌組織中CD147 mRNA的表達(dá)與患者臨床參數(shù)的關(guān)系，采用Logistic回歸分析法評(píng)價(jià)影響CD147 mRNA在前列腺癌組織中陽(yáng)性表達(dá)的相關(guān)因素。結(jié)果CD147 mRNA在前列腺癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率+為50.00%，為9.26%，均顯著高于前列腺增生組織中的6.00%與0.00%(均P<0.05)。Gleason病理分級(jí)≥5、臨床分期T3～4、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移N1及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移M1的CD147 mRNA陽(yáng)性表達(dá)率分別顯著高于Gleason病理分級(jí)2～4、T1～2、N0及M0者(均P<0.05)。Logistic結(jié)果顯示，Gleason病理分級(jí)≥5、臨床分期T3～4、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移N1及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移M1均為前列腺癌組織中CD147 mRNA陽(yáng)性表達(dá)的危險(xiǎn)因素(P<0.05)。結(jié)論CD147 mRNA在前列腺癌組織中陽(yáng)性表達(dá)異常，且Gleason病理分級(jí)≥5、臨床分期T3～4、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移N1及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移M1均為前列腺癌組織中CD147 mRNA陽(yáng)性表達(dá)的危險(xiǎn)因素。

CD147 mRNA；前列腺癌

臨床通常將前列腺特異性抗原(PSA)作為診斷前列腺癌的指標(biāo)，以Gleason評(píng)分法作為病理分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，但由于前列腺增生以及胃癌等其他疾病患者同樣會(huì)出現(xiàn)PSA水平上升情況，以及Gleason評(píng)分會(huì)受到評(píng)分者主觀意識(shí)干擾等原因，導(dǎo)致前列腺癌臨床診斷以及病情預(yù)后評(píng)估等工作受到一定干擾，難以快速準(zhǔn)確作出判斷，對(duì)后續(xù)治療造成嚴(yán)重影響〔1〕。CD147為一種新型跨膜糖蛋白，對(duì)腫瘤產(chǎn)生及發(fā)展均產(chǎn)生重要影響，且其在前列腺癌體內(nèi)呈高表達(dá)狀態(tài)，可能和前列腺癌生長(zhǎng)具有一定相關(guān)性〔2〕。本文分析前列腺癌組織中CD147 mRNA的表達(dá)及其與臨床生物學(xué)特性的關(guān)系。

1　資料和方法

1.1臨床資料選擇2014年1月至2015年11月在醫(yī)院接受手術(shù)治療的前列腺癌患者癌組織標(biāo)本54例，年齡52～77〔平均(67.25±1.39)〕歲。入選標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合WHO關(guān)于前列腺癌的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)〔3〕；(2)術(shù)前未實(shí)施內(nèi)分泌療法及放化療；(3)Gleason評(píng)分≥2分；(4)TNM分期為T1～4。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)其他類型的癌癥患者；(2)病歷資料數(shù)據(jù)不全者。其中患者的臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移按照TNM分期標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)價(jià)，臨床分期：T1～2期18例，T3～4期32例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：N0 17例，N1 37例； 遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移：M0 15例，M1 39例。Gleason病理分級(jí)為2～4者16例，分級(jí)≥5者38例。另從同期在醫(yī)院行前列腺摘除術(shù)與經(jīng)尿道前列腺電切術(shù)的前列腺增生患者的組織標(biāo)本50例，年齡50～75〔平均(68.59±1.47)〕歲。試驗(yàn)過程經(jīng)倫理委員會(huì)通過，且所有患者均簽署知情同意書。

1.2研究方法利用產(chǎn)自武漢博士德公司的CD147 mRNA原位雜交試劑盒以及采用地高辛標(biāo)記的CD147相關(guān)寡核苷酸探針進(jìn)行試驗(yàn)。首先使用焦碳酸二乙酯(DEPC)清洗原位雜交試驗(yàn)過程中的蒸餾水和器皿。陰性對(duì)照組中只加雜交液，而不加探針。樣本制作石蠟切片后脫蠟和水化，使用3% H2O2將過氧化物酶滅活，使用蛋白酶K消化處理，將mRNA的核酸片段暴露出來，采用預(yù)雜交封閉片段上非特異性的雜交點(diǎn)，然后進(jìn)行二次雜交，使用地高辛標(biāo)記的CD147 mRNA探針處理。雜交后，將堿基配對(duì)性RNA除去，使用抗體連接，并使用二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色，使用蘇木精復(fù)染，最后脫水、透明，并封片。

1.3檢測(cè)結(jié)果評(píng)價(jià)〔4〕由醫(yī)院2位經(jīng)驗(yàn)豐富的病理醫(yī)師進(jìn)行判斷評(píng)價(jià)，CD147細(xì)胞膜和胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)淡黃色或棕黃色視為陽(yáng)性細(xì)胞，利用半定量積分法對(duì)原位雜交結(jié)果實(shí)施判斷，其中染色強(qiáng)度為淺黃色計(jì)1分，為深黃色計(jì)2分，為棕黃色計(jì)3分；對(duì)每個(gè)切隨機(jī)尋找5個(gè)400倍的視野并觀察，統(tǒng)計(jì)分析陽(yáng)性細(xì)胞在視野范圍內(nèi)所占比例，1分：陽(yáng)性細(xì)胞比例<5%；2分：5%～25%；3分：26%～50%；4分：>50%。將上述兩部分分值累加，所得總分為1～3分計(jì)為陰性，為4～6分計(jì)為陽(yáng)性(+)，7分計(jì)為強(qiáng)陽(yáng)性()。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS19.0軟件，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料組間比較采用t檢驗(yàn)，影響相關(guān)因素利用Logistic回歸分析法進(jìn)行評(píng)價(jià)。

2　結(jié)　果

2.1不同組織中CD147 mRNA的表達(dá)比較CD147 mRNA在前列腺癌組織中的+陽(yáng)性表達(dá)率為50.00%，陽(yáng)性表達(dá)率為9.26%，均顯著高于前列腺增生組織中的6.00%與0.00%(均P<0.05)。

2.2前列腺癌組織中CD147 mRNA陽(yáng)性表達(dá)與患者臨床參數(shù)的相關(guān)性Gleason病理分級(jí)≥5、臨床分期T3～4、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移N1及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移M1的CD147 mRNA陽(yáng)性表達(dá)比例〔25例(78.13)%、20例(62.50%)、21例(65.63%)、22例(68.75%)〕分別顯著高于Gleason病理分級(jí)2～4〔7例(21.88%)〕、T1～2〔12例(37.50%)〕、N0〔11例(34.38%)〕及M0〔10例(31.25%)〕者(均P<0.05)。

2.3前列腺癌組織中CD147 mRNA陽(yáng)性表達(dá)的多因素分析Logistic回歸分析顯示，Gleason病理分級(jí)≥5、臨床分期T3～4、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移N1及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移M1均為前列腺癌組織中CD147 mRNA陽(yáng)性表達(dá)的危險(xiǎn)因素(P<0.05)。見表1。

表1　前列腺癌中CD147 mRNA陽(yáng)性表達(dá)的多因素分析

3　討　論

前列腺癌的發(fā)病可能與患者的家族遺傳史等因素有關(guān)，如CD147等〔5〕。CD147作為免疫球蛋白的一種，其主要功能包括參與細(xì)胞間或者細(xì)胞和基質(zhì)之間的黏附作用。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)〔6〕，雖然CD147于人體正常細(xì)胞內(nèi)通常呈不表達(dá)或者極少數(shù)極低水平表達(dá)，但是，在乳腺癌以及肝癌等惡性腫瘤患者體內(nèi)高表達(dá)，且其表達(dá)水平和腫瘤本身惡性程度呈正相關(guān)。由此可以推論，CD147具有直接促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)的作用。本文通過研究發(fā)現(xiàn)，CD147 mRNA在前列腺癌組織中具有較高的陽(yáng)性表達(dá)，與前列腺癌的發(fā)生發(fā)展之間可能存在較大關(guān)系。究其原因，可能是因?yàn)镃D147是一種細(xì)胞外基質(zhì)類金屬蛋白酶(MMPs)型誘導(dǎo)因子，能夠?qū)η傲邢侔┠[瘤外周間質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行刺激，進(jìn)而促進(jìn)其生成MMPs，使得前列腺癌腫瘤組織內(nèi)MMPs水平上升，且活性增強(qiáng)，以達(dá)到降解細(xì)胞外部基底膜以及間質(zhì)等成分的作用。MMPs的降解作用為前列腺癌細(xì)胞打開了通道，方便其順利通過基底膜和細(xì)胞間質(zhì)等組織屏障，進(jìn)而幫助前列腺癌細(xì)胞發(fā)生侵襲和轉(zhuǎn)移。同時(shí)，CD147還能夠借助RNA以及蛋白水平等方式，對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)進(jìn)行干擾，影響其表達(dá)狀態(tài)，進(jìn)而利于前列腺癌腫瘤血管形成。Logistic回歸分析法評(píng)價(jià)可知，病理分級(jí)和臨床分期越高，轉(zhuǎn)移情況越嚴(yán)重，將加速前列腺癌細(xì)胞的浸潤(rùn)及侵襲，從而經(jīng)過一系列的生化反應(yīng)影響CD147 mRNA陽(yáng)性表達(dá)，從而促進(jìn)病情進(jìn)展〔7〕。

1方芳,張萬(wàn)生,唐化勇,等.CD147RNA干擾對(duì)前列腺癌LNCaP-AI細(xì)胞體外侵襲力的影響〔J〕.吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2015;41(3):460-3.

2方芳,馮淳,姚楊,等.CD147對(duì)前列腺癌PC-3細(xì)胞自噬的影響〔J〕.中國(guó)病理生理雜志,2014;30(12):2259-61.

3陳忠,韓崗,汶麥霞,等.CD147分子表達(dá)與前列腺癌惡性程度的關(guān)系〔J〕.中國(guó)急救醫(yī)學(xué),2013;33(1):34-5.

4張振,管海方,朱文彬,等.CD147與MMPs、VEGF在腫瘤發(fā)生發(fā)展中相互作用的研究進(jìn)展〔J〕.現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2014;14(24):4798-800.

5周芳,譚逸然.CD147分子表達(dá)與前列腺癌惡性程度相關(guān)性研究〔J〕.陜西醫(yī)學(xué)雜志,2014;43(1):19-20.

6Liang YX,Mo RJ,He HC,etal.Aberrant hypomethylation-mediated CD147 overexpression promotes aggressive tumor progression in human prostate cancer〔J〕.Oncol Rep,2015;33(5):2648-54.

〔2015-11-29修回〕

(編輯袁左鳴)

梁昌衛(wèi)(1973-)，男，主治醫(yī)師，主要從事泌尿外科腫瘤方面的研究。

R739

A

1005-9202(2016)17-4251-02；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.17.057