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(河北省獸藥監(jiān)察所, 河北 石家莊 050000)

0 引言

食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定：生鮮乳中菌落總數(shù)應(yīng)小于或等于 200 萬 cfu/mL。目前，生鮮乳菌落總數(shù)的測定方法主要為國標(biāo)法，關(guān)于菌落總數(shù)檢測片檢測生鮮乳中菌落總數(shù)的報道較少，本試驗(yàn)主要通過將菌落總數(shù)檢測片法和國標(biāo)法的檢測結(jié)果作為對比，以討論菌落總數(shù)檢測片方法的可行性。

1 材料與方法

1.1 儀器與設(shè)備

生化培養(yǎng)箱；自動壓力蒸汽滅菌器；玻璃試管；移液槍。

1.2 材料與試劑

營養(yǎng)瓊脂；生理鹽水；細(xì)菌總數(shù)檢測片(Charm)；一次性滅菌槍頭；一次性使用培養(yǎng)皿。

1.3 試驗(yàn)內(nèi)容及方法

將隨機(jī)抽取的50批生鮮乳樣品分別進(jìn)行檢測片法和國標(biāo)法檢測，國標(biāo)法檢測作為對照組，檢測片法檢測作為試驗(yàn)組。對照組檢測依據(jù)國標(biāo)法GB 4789.2-2010。用無菌槍頭吸取生鮮乳樣品 25 mL置 225 mL裝有無菌生理鹽水的無菌均質(zhì)袋中，拍打 1～2 min，選擇三個適宜稀釋度(10-3、10-4、10-5)進(jìn)行稀釋，分別將三個稀釋度樣品于無菌培養(yǎng)皿內(nèi)，同時作空白對照。將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿內(nèi)，使其混合均勻。瓊脂凝固后置于(36±1)℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)倒置培養(yǎng) (48±2) h，記錄稀釋倍數(shù)和相應(yīng)的菌落數(shù)量，菌落計(jì)數(shù)以菌落形成單位(CFU)表示。

試驗(yàn)組應(yīng)用菌落總數(shù)檢測片進(jìn)行檢測。分別取上述對照組中三個稀釋度(10-3、10-4、10-5)的樣品1 mL加入檢測片內(nèi)，同時作空白對照。標(biāo)記檢測片，提起粘合片，豎直加入樣品，重新蓋上粘合片，保持表面平整。培養(yǎng)方法與菌落計(jì)數(shù)同對照組。

1.4 結(jié)果計(jì)算

選取菌落數(shù)為30～300CFU，無蔓延菌落生長的培養(yǎng)皿計(jì)數(shù)菌落總數(shù)。若只有1個稀釋度平板上的菌落數(shù)在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi)，計(jì)算2個平板菌落數(shù)的平均值；若2個連續(xù)稀釋度的平板菌落數(shù)在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi)時，按計(jì)算公式：N=ΣC/(n1+0.1n2)d。(注：N—樣品中菌落數(shù)；∑C—平板菌落數(shù)之和；n1—第1稀釋度平板個數(shù)；n2—第2稀釋度平板個數(shù)；d—稀釋因子。)

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 檢測結(jié)果

從表1可知，兩組空白對照均無菌落生長；在相同條件下，計(jì)算2組菌落總數(shù)結(jié)果顯示，試驗(yàn)組的菌落總數(shù)與對照組相比較低，但差異不顯著(P>0.05)。

表1 兩種不同檢測方法對生鮮乳菌落總數(shù)檢測的結(jié)果比較

注：與對照組比較，*P<0.05

3 討論

生鮮乳的質(zhì)量檢測包括理化檢驗(yàn)以及菌落總數(shù)等，菌落總數(shù)是反應(yīng)生鮮乳質(zhì)量的一個重要指標(biāo)。其檢測方法包括國標(biāo)法和快速檢測方法。傳統(tǒng)的國標(biāo)法檢測生鮮乳中的菌落總數(shù)較為準(zhǔn)確，但是操作相對復(fù)雜，使用的材料也相對較多。隨著檢測技術(shù)的快速發(fā)展，不斷研發(fā)出先進(jìn)的檢測方法。菌落總數(shù)檢測片是用來檢測食品中菌落總數(shù)的一種新方法，它以標(biāo)準(zhǔn)瓊脂方法為基礎(chǔ)，其培養(yǎng)基中含有酶的底物2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)，此種底物可以被活菌還原成紅色。所以，在經(jīng)過加樣和培養(yǎng)后，細(xì)菌菌落在檢測片上顯出紅色的菌斑，方便觀察和計(jì)數(shù)。菌落總數(shù)檢測片是一種可以代替普通培養(yǎng)皿的新型檢測產(chǎn)品，優(yōu)點(diǎn)包括無需配制培養(yǎng)基，方便攜帶和使用，培養(yǎng)時可疊加，節(jié)省空間。其操作和結(jié)果觀察都較為簡便可靠。綜上所述，應(yīng)用菌落總數(shù)檢測片檢測生鮮乳中菌落總數(shù)具有一定的應(yīng)用價值，且操作方便，易于攜帶，值得推廣。