史博強(qiáng)，和振東

（河北科技大學(xué)，河北石家莊050000）

銀杏葉提取物對(duì)運(yùn)動(dòng)員力竭狀態(tài)下的保護(hù)作用

史博強(qiáng)，和振東

（河北科技大學(xué)，河北石家莊050000）

為研究銀杏葉提取物在運(yùn)動(dòng)相關(guān)功能食品領(lǐng)域的應(yīng)用，設(shè)計(jì)運(yùn)動(dòng)員力竭訓(xùn)練實(shí)驗(yàn)，研究了銀杏葉提取物對(duì)運(yùn)動(dòng)員力竭狀態(tài)下的保護(hù)作用。結(jié)果表明，運(yùn)動(dòng)員經(jīng)過(guò)頻繁的力竭訓(xùn)練，會(huì)引起較大的心臟功能刺激，引起體內(nèi)心肌酶譜和炎癥因子表達(dá)水平明顯提高，對(duì)運(yùn)動(dòng)員的身體可能造成潛在的危害。在食用銀杏葉提取物所制備的運(yùn)動(dòng)補(bǔ)劑膠囊后，觀察組運(yùn)動(dòng)員可以有效改善力竭狀態(tài)下的機(jī)體狀態(tài)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，觀察組運(yùn)動(dòng)員多項(xiàng)心功能、心電圖和血清指標(biāo)均較對(duì)照組運(yùn)動(dòng)員明顯緩解，P＜0.05，差異顯著。隨后在安全性分析中，證明銀杏葉提取物制備的運(yùn)動(dòng)補(bǔ)劑膠囊具有安全性高的特點(diǎn)，因此，我們認(rèn)為銀杏葉提取物可以為運(yùn)動(dòng)員力竭狀態(tài)下的身體提供一定程度的保護(hù)效力。

銀杏葉提取物；運(yùn)動(dòng)員；力竭；心臟

銀杏樹(shù)屬于常見(jiàn)的多年生落葉喬木，其樹(shù)齡較長(zhǎng)，可以存活超過(guò)3000年，因此被稱為“活化石”［1］。銀杏樹(shù)全身是寶，研究證明銀杏樹(shù)的葉、根和種子均具有藥用價(jià)值［2］。近年來(lái)對(duì)于銀杏葉提取物的研究較為深入，發(fā)現(xiàn)其成分較為復(fù)雜，根據(jù)現(xiàn)行的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)，主要含有黃酮類(lèi)，內(nèi)脂類(lèi)，聚異戊烯醇，銀杏酸，花青素等活性物質(zhì)，其中研究最為透徹的是銀杏萜內(nèi)脂和銀杏黃酮，對(duì)改善心臟功能有明顯作用［3］。已知的銀杏葉提取物生物活性功能包括：通過(guò)降低組織內(nèi)活性氧水平，達(dá)到去除自由基的目的［4］；抑制過(guò)度氧化的膜脂質(zhì)；提高腦組織的供血量，并抑制血小板過(guò)度激活；提高神經(jīng)元活性，抑制神經(jīng)元凋亡［5］；減少腦組織損傷和炎癥反應(yīng)，以及緩解疲勞和提高免疫力的作用等，并對(duì)人類(lèi)和動(dòng)物均無(wú)毒副作用［6］。由于銀杏葉提取物作用非凡，國(guó)際上已有商品化的銀杏葉提取物（6%萜內(nèi)酯和24%的黃酮甙）應(yīng)用于臨床治療［7］?，F(xiàn)階段運(yùn)動(dòng)相關(guān)功能食品發(fā)展快速，在運(yùn)動(dòng)食品領(lǐng)域應(yīng)用銀杏葉提取物，得到研究人員的關(guān)注。研究指出，通過(guò)運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，銀杏葉提取物可以有效緩解疲勞，同時(shí)提高運(yùn)動(dòng)能力，并減少運(yùn)動(dòng)過(guò)程中出現(xiàn)的自由基，以及由于運(yùn)動(dòng)時(shí)產(chǎn)生的缺血在灌注的缺血損傷保護(hù)作用［8］，因此銀杏葉提取物在運(yùn)動(dòng)功能食品領(lǐng)域有良好的發(fā)展前景。運(yùn)動(dòng)可以有效提高心臟功能，維持心腦血管健康，然而過(guò)度運(yùn)動(dòng)，甚至力竭運(yùn)動(dòng)可能對(duì)身體產(chǎn)生一定傷害。已有大量的研究指出力竭運(yùn)動(dòng)后對(duì)人體心肌狀態(tài)、心臟功能和心臟的生理生化產(chǎn)生明顯影響［9］。在本研究中，我們將通過(guò)比較運(yùn)動(dòng)員服用銀杏葉提取物后進(jìn)行力竭訓(xùn)練的身體狀態(tài)，評(píng)估銀杏葉提取物對(duì)運(yùn)動(dòng)員力竭狀態(tài)下的保護(hù)作用。

1　材料與方法

1.1材料

銀杏葉：江蘇省農(nóng)科院技術(shù)開(kāi)發(fā)中心；甲醇、丙酮、乙醇等有機(jī)試劑：國(guó)藥集團(tuán)；其他試驗(yàn)試劑均為分析純。

1.2主要儀器

UV-4600型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)：中國(guó)美析；多普勒超聲成像診斷儀、心電監(jiān)護(hù)儀：荷蘭飛利浦。

1.3銀杏葉提取物制備及純度檢測(cè)

提取工藝：取充分干燥的銀杏葉提取物進(jìn)行粉碎，采用70%乙醇熱回流法提取3 h，重復(fù)此操作步驟2次。取抽提液進(jìn)行過(guò)濾，采用減壓蒸餾法處理濾液。減壓蒸餾結(jié)束后，加入石油醚進(jìn)行脫脂處理2次。脫脂結(jié)束后將提取液進(jìn)行濃縮，濃縮至總體積的50%后，進(jìn)行過(guò)濾，在濾液中加入硼砂，進(jìn)行抗氧化處理。之后再次進(jìn)行減壓蒸餾處理，得到的水液在60℃環(huán)境下進(jìn)行干燥，干燥完全后得到的物質(zhì)為銀杏葉提取物，采用高效液相色譜法進(jìn)行含量檢測(cè)，所得的提取物含量符合中國(guó)藥典中的含量標(biāo)準(zhǔn)［10］。

1.4銀杏葉提取物運(yùn)動(dòng)補(bǔ)劑的研制

考慮銀杏葉提取物活性的問(wèn)題，采用制作運(yùn)動(dòng)補(bǔ)劑膠囊的方式進(jìn)行，最大程度的保證活性成分。按中國(guó)藥典規(guī)定，制備銀杏葉提取物膠囊，每粒膠囊中含有提取物100 mg。制備的銀杏葉提取物膠囊在北京市藥檢所進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，未發(fā)生任何不良反應(yīng)事件，證明所制備的銀杏葉提取物膠囊具有安全性。

1.5試驗(yàn)方法

1.5.1試驗(yàn)對(duì)象

選擇北京體育大學(xué)40名足球運(yùn)動(dòng)員，隨機(jī)分成觀察組和對(duì)照組兩組，兩組運(yùn)動(dòng)員的一般資料見(jiàn)表1，P＞0.05，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，具有可比性。試驗(yàn)開(kāi)始后，觀察組運(yùn)動(dòng)員連續(xù)服用1個(gè)月的銀杏葉提取物膠囊，每天2次，早晚各1次；對(duì)照組運(yùn)動(dòng)員服用形狀和重量相似的安慰劑膠囊，每天2次，早晚各1次，服用時(shí)間為1個(gè)月。服用膠囊后，每天進(jìn)行常規(guī)足球訓(xùn)練，同時(shí)增加20 m折返跑力竭訓(xùn)練［11］，要求運(yùn)動(dòng)時(shí)心率達(dá)到180次/min，攝氧量隨著運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度增強(qiáng)而加強(qiáng)，呼吸商達(dá)到1.10以上，試驗(yàn)運(yùn)動(dòng)員要求盡全力，達(dá)到無(wú)法繼續(xù)運(yùn)動(dòng)程度。

表1　兩組運(yùn)動(dòng)員一般資料比較Table 1Comparison of general data of two groups

1.5.2測(cè)定方法

1.5.2.1心功能測(cè)定

在試驗(yàn)開(kāi)展30 d后的第1天早晨開(kāi)始試驗(yàn)，首先進(jìn)行測(cè)定安靜狀態(tài)下，參與實(shí)驗(yàn)的運(yùn)動(dòng)員的5 min安靜心電圖。測(cè)試前運(yùn)動(dòng)員充分休息10 min，采取仰臥位平靜呼吸，帶呼吸穩(wěn)定后應(yīng)用十二導(dǎo)聯(lián)心電儀連續(xù)采集5 min的心率變異性（HRV）數(shù)據(jù)，之后采用多普勒超聲波儀進(jìn)行心動(dòng)圖探測(cè)。隨后進(jìn)行最大攝氧量測(cè)定，所有運(yùn)動(dòng)員均進(jìn)行20 m折返跑測(cè)試，最大攝氧量測(cè)定結(jié)束之后進(jìn)行5 min心電圖測(cè)定，方法同安靜期測(cè)定方法，之后立即采用多普勒超聲波儀進(jìn)行心動(dòng)圖探測(cè)。記錄所得的的心率（HR），左心室舒張末期容積（EDV），射血分?jǐn)?shù)（EF），左心室短軸縮短率（%△D），左心室收縮末期容積（ESV），心輸出量（CO），每博輸出量（SV），總功率（TP），相鄰間期差值的標(biāo)準(zhǔn)差（SDSD），標(biāo)準(zhǔn)化高頻段功率（HF），標(biāo)準(zhǔn)化低頻段功率（LF），HF R-R間期標(biāo)準(zhǔn)差（SDNN）和N-N間期差值均方根差（RMSSD）。

1.5.2.2血清采集與檢測(cè)

在安靜期和最大攝氧量測(cè)定后采集運(yùn)動(dòng)員血清，進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)內(nèi)容主要包括血清中心肌酶譜CK和同工酶（CK-MB）的測(cè)定和腫瘤壞死因素α（TNF-α）、轉(zhuǎn)錄因子蛋白（NF-κB）和細(xì)胞間黏附分子-1（ICAM-1）的測(cè)定。

1.5.2.3安全性分析

在試驗(yàn)過(guò)程中，對(duì)兩組運(yùn)動(dòng)員進(jìn)行密切監(jiān)控，對(duì)發(fā)生的任何不良反應(yīng)事件進(jìn)行救治和記錄。

1.6數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

SPSS11.5軟件包對(duì)資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)、顯著性水平P＜0.05，高度顯著水平P＜0.01。

2　結(jié)果與分析

2.1力竭訓(xùn)練前后運(yùn)動(dòng)員心臟功能變化比較

首先，我們對(duì)力竭訓(xùn)練后，運(yùn)動(dòng)員心臟功能的變化進(jìn)行分析，研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過(guò)一次高強(qiáng)度的力竭運(yùn)動(dòng)，兩組運(yùn)動(dòng)員的心臟組織均受到一定程度的刺激，其中觀察組運(yùn)動(dòng)員在服用銀杏葉提取物后心臟功能變化程度處于安全的波動(dòng)范圍內(nèi)，而對(duì)照組運(yùn)動(dòng)員心臟功能波動(dòng)較為明顯，EF，EDV，%△D，SV和CO值均較觀察組出現(xiàn)明顯提高，P＜0.05，差異顯著。其中EF，ESV和CO的增加程度已經(jīng)接近安全上線，有可能產(chǎn)生心肌功能損傷，詳細(xì)結(jié)果見(jiàn)表2。

表2　兩組運(yùn)動(dòng)員心臟功能檢測(cè)結(jié)果比較Table 2Comparison of heart function test results of two groups

2.2力竭訓(xùn)練前后HRV各項(xiàng)指標(biāo)變化比較

近年來(lái)，HRV是較為靈敏的無(wú)創(chuàng)性心電監(jiān)測(cè)檢測(cè)方法，可以用于力竭運(yùn)動(dòng)前后心臟功能的變化。在本次試驗(yàn)中，我們發(fā)現(xiàn)運(yùn)動(dòng)員在經(jīng)過(guò)力竭訓(xùn)練后，兩組運(yùn)動(dòng)員心率均出現(xiàn)瞬間的趨勢(shì)性波動(dòng)減少，然而，觀察組運(yùn)動(dòng)員波動(dòng)趨勢(shì)較弱。其中對(duì)照組SDSD、RMSSD和SDNN數(shù)值較觀察組變化明顯，P＜0.05，差異顯著。說(shuō)明對(duì)照組運(yùn)動(dòng)員迷走神經(jīng)和交感神經(jīng)的失衡更為明顯，說(shuō)明力竭訓(xùn)練可以引起運(yùn)動(dòng)員應(yīng)激能力下降，將會(huì)導(dǎo)致訓(xùn)練所需恢復(fù)時(shí)間延長(zhǎng)，并影響恢復(fù)狀況，詳細(xì)結(jié)果見(jiàn)表3。

表3　兩組運(yùn)動(dòng)員HRV檢測(cè)結(jié)果比較Table 3Comparison of HRV test results of two groups

2.3血清檢測(cè)結(jié)果比較

臨床上常用心肌肌酸激酶（CK）和其同工酶（CKMB）進(jìn)行心肌的損傷情況診斷，在運(yùn)動(dòng)領(lǐng)域，已有大量的研究對(duì)這一數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。在本研究中，經(jīng)過(guò)力竭性訓(xùn)練后，對(duì)照組運(yùn)動(dòng)員CK和CK-MB數(shù)值較觀察組運(yùn)動(dòng)員明顯提高，P＜0.05，差異顯著，詳細(xì)情況見(jiàn)表4。

表4　兩組運(yùn)動(dòng)員CK和CK-MB表達(dá)水平檢測(cè)Table 4Comparison of CK and CK-MB expression level of two groups

我們分析了是否力竭訓(xùn)練會(huì)引起較高水平的炎癥因子表達(dá)，通過(guò)分析試驗(yàn)結(jié)果，我們發(fā)現(xiàn)與觀察組相比，對(duì)照組運(yùn)動(dòng)員經(jīng)過(guò)力竭訓(xùn)練后，TNF-α、NF-κB和ICAM-1數(shù)值較觀察組運(yùn)動(dòng)員均發(fā)現(xiàn)明顯變化，P＜0.05，差異顯著，詳細(xì)情況見(jiàn)表5。

表5　兩組運(yùn)動(dòng)員TNF-α、NF-κB和ICAM-1表達(dá)水平檢測(cè)Table 5Comparison of TNF-α、NF-κB和ICAM-1 expression level of two groups

2.4安全性分析

兩組運(yùn)動(dòng)員在整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中均未發(fā)生任何不良反應(yīng)，證明以銀杏葉提取物為主體的運(yùn)動(dòng)補(bǔ)劑，具有良好的安全性。

3　結(jié)論與討論

銀杏葉提取物作為藥材使用，具有抗炎，抗氧化，對(duì)多種疾病有明顯的抑制作用，而在運(yùn)動(dòng)食品領(lǐng)域，對(duì)銀杏葉提取物的研究開(kāi)展較為緩慢。在本研究中我們發(fā)現(xiàn)運(yùn)動(dòng)員在力竭訓(xùn)練后，會(huì)由于迷走神經(jīng)張力增加和敏感性降低導(dǎo)致的心率（HR）和心輸出量（SV）明顯增加，同時(shí)也引起左心室舒張末期容積（EDV），左心室收縮末期容積（ESV）和射血分?jǐn)?shù)（EF）等數(shù)值擴(kuò)增，對(duì)訓(xùn)練的恢復(fù)和運(yùn)動(dòng)員的身體健康均產(chǎn)生負(fù)面影響。通過(guò)無(wú)創(chuàng)傷心電監(jiān)測(cè)結(jié)果，我們發(fā)現(xiàn)在力竭訓(xùn)練后，會(huì)引起運(yùn)動(dòng)員自主神經(jīng)調(diào)節(jié)系統(tǒng)反應(yīng)減緩，引起部分反應(yīng)失調(diào)，產(chǎn)生運(yùn)動(dòng)性疲勞，嚴(yán)重時(shí)引起運(yùn)動(dòng)性損傷。而在血清學(xué)檢測(cè)中，發(fā)現(xiàn)心肌酶譜和炎性因子均發(fā)生上調(diào)，表明心肌組織可能出現(xiàn)輕微的炎癥反應(yīng)。

因此在本研究中所得結(jié)果表明頻繁的力竭性訓(xùn)練，將對(duì)運(yùn)動(dòng)員身體造成一定的傷害，而在服用銀杏葉提取物補(bǔ)劑后，傷害發(fā)生幾率明顯減少，其中觀察組運(yùn)動(dòng)員心臟功能在安全范圍內(nèi)變化，而對(duì)照組運(yùn)動(dòng)員心臟功能接近于安全范圍上限，具有一定的危險(xiǎn)性；通過(guò)分析迷走神經(jīng)和交感神經(jīng)的平衡狀態(tài)，對(duì)照組較觀察組表現(xiàn)出明顯的失衡關(guān)系；通過(guò)血清學(xué)分析，證實(shí)心肌肌酸激酶及其同工酶在觀察組和運(yùn)動(dòng)員中的上調(diào)幅度明顯弱于對(duì)照組運(yùn)動(dòng)員，同時(shí)證實(shí)3種細(xì)胞因子的表達(dá)水平在觀察組運(yùn)動(dòng)員中明顯低于對(duì)照組運(yùn)動(dòng)員，反映出觀察組運(yùn)動(dòng)員的功能處于較為安全的環(huán)境。通過(guò)安全性分析，證明銀杏葉提取物具有安全性高的特點(diǎn)，因此，通過(guò)本研究證明銀杏葉提取物對(duì)運(yùn)動(dòng)員力竭性訓(xùn)練有明顯的保護(hù)作用，值得推廣研究使用。

［1］丁莉，宮霞，許豪文，等.銀杏葉提取物對(duì)運(yùn)動(dòng)小鼠肝組織自由基代謝的影響［J］.中國(guó)運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)雜志，1999，18（4）：312-313

［2］王雪芹.銀杏葉提取物對(duì)機(jī)體及運(yùn)動(dòng)能力影響［J］.中國(guó)老年學(xué)雜志，2015（11）：3146-3148，3149

［3］劉慶山，盛蕾，王秋娟，等.銀杏葉提取物對(duì)運(yùn)動(dòng)大鼠肌膜Na+，K+-ATP酶活性的影響［J］.中國(guó)藥學(xué)雜志，2006，41（22）：1703-1706

［4］陳建敏，謝少華，楊拯，等.銀杏葉提取物抗氧化作用對(duì)大鼠脊髓損傷后運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)的影響［J］.中國(guó)康復(fù)理論與實(shí)踐，2013（12）：1124-1127

［5］牛英鵬.銀杏葉提取物對(duì)大鼠血液CK、LDH、IL-4活性的影響［J］.北京體育大學(xué)學(xué)報(bào)，2006，29（10）：1370-1372

［6］何志杰，張?jiān)?銀杏葉提取物對(duì)力竭訓(xùn)練大鼠血清酶活性的影響［J］.湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，51（20）：4586-4588

［7］張烽，馮煒煒，周海濤，等.銀杏葉提取物對(duì)大鼠急性脊髓損傷后神經(jīng)功能恢復(fù)的作用及其機(jī)制［J］.中國(guó)脊柱脊髓雜志，2007，17（9）：675-679

［8］張美霞，葉志成.銀杏葉提取物對(duì)運(yùn)動(dòng)大鼠抗氧化效果的影響［J］.食品研究與開(kāi)發(fā)，2016（1）：18-22

［9］杜鵑，柯道平，王剛，等.銀杏葉提取物對(duì)結(jié)腸運(yùn)動(dòng)的影響機(jī)制［J］.安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2004，39（2）：134-136

［10］謝偉，楊永亮，梁莉.銀杏葉提取物延緩運(yùn)動(dòng)性疲勞的實(shí)驗(yàn)［J］.中國(guó)臨床康復(fù)，2005，9（36）：162-165

［11］張聲華，凌勇.我國(guó)17～18歲年齡段優(yōu)秀男子足球運(yùn)動(dòng)員體能狀況分析與評(píng)價(jià)［J］.武漢體育學(xué)院學(xué)報(bào)，2003，37（1）：92-94

Protective Effect Analysis of Ginkgo biloba Extract on Exhaustive State of Athletes

SHI Bo-qiang，HE Zhen-dong
（Hebei University of Science and Technology，Shijiazhuang 050000，Hebei，China）

For the study of Ginkgo biloba extract in sports-related functional foods field，the exhaustive experiments were designed to study the protective effects of Ginkgo biloba extract on athletes exhaustive state.The results showed that the athletes after exhaustive exercise frequently would cause greater irritation of heart function，the body myocardial enzymes and inflammatory cytokine expression levels were significantly increased，the parameters of the athlete's body could potentially harmful.When prepared observation group athletes take the Ginkgo biloba extact supplement，that could improve the body's state of exhaustion state，the experimental results showed that the cardiac function，ECG and serum markers of observation group athletes were significantly relived than the control group athletes，P＜0.05，significant difference.Then in security analysis，the result proved that the Ginkgo biloba extract sports supplement was prepared in high safety level，therefore，we believe that Ginkgo biloba extract can provide the body with a certain degree of protective efficacy athletes Exhaustive state.

Ginkgo biloba extract；athletes；exhaustion；heart

10.3969/j.issn.1005-6521.2016.17.036

2016-06-13

史博強(qiáng)（1978—），男（漢），講師，在職碩士在讀，研究方向：體育教育訓(xùn)練學(xué)。