王海英　張　軍　趙　靜　劉　穎　戴金穎　王順意　袁　潔

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益氣養(yǎng)陰活血方對T2DM大鼠胰島素抵抗的影響*

王海英1張軍2△趙靜3劉穎2戴金穎1王順意1袁潔1

目的探討益氣養(yǎng)陰活血方對改善2型糖尿病大鼠胰島素抵抗的影響。方法采用高脂飲食喂養(yǎng)加小劑量鏈脲佐菌素(STZ)腹腔注射方法建立2型糖尿病大鼠模型，隨機(jī)分為模型組、津力達(dá)組、益氣養(yǎng)陰活血方低、中、高劑量組，以正常大鼠為空白組。觀察益氣養(yǎng)陰活血方和津力達(dá)在降血糖、改善胰島素抵抗、增加胰島素敏感性等方面的效果。結(jié)果兩種中藥復(fù)方均能降血糖、改善胰島素抵抗、增加胰島素敏感性，以益氣養(yǎng)陰活血方中劑量組效果最佳，且優(yōu)于津力達(dá)組(P<0.05)。結(jié)論益氣養(yǎng)陰活血方能夠顯著改善2型糖尿病胰島素抵抗，增加胰島素敏感性。

益氣養(yǎng)陰活血方；胰島素抵抗；津力達(dá)

胰島素抵抗是指胰島素作用的靶器官如肝臟、肌肉、脂肪組織對胰島素作用的敏感性下降，即正常的胰島素產(chǎn)生低于正常生物學(xué)效應(yīng)的一種病理狀態(tài)。它不但是2型糖尿病發(fā)生的根本原因之一，還與高血壓、高血脂、高血粘、高體重等密切相關(guān)，同時(shí)也是動(dòng)脈粥樣硬化的危險(xiǎn)因素。因此，深入研究和發(fā)掘改善胰島素抵抗的藥物具有十分重要的意義。近年來的研究發(fā)現(xiàn)中醫(yī)藥對胰島素抵抗有明顯的改善作用，且無明顯的毒副作用，具有較好的臨床療效和發(fā)展前景。筆者采用高脂飼料加小劑量鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)形成2型糖尿病大鼠胰島素抵抗模型，研究益氣養(yǎng)陰活血方在降血糖、改善胰島素抵抗方面的作用效果，為提高中醫(yī)藥防治糖尿病的療效提供理論依據(jù)。

1　材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康雄性Wistar大鼠60只，體質(zhì)量200～250g，由中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院衛(wèi)生學(xué)環(huán)境醫(yī)學(xué)研究所提供，動(dòng)物許可證號(hào)：SCXK-(軍)-2014-0001 ，飼養(yǎng)于華北理工大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心清潔級動(dòng)物房，室溫20℃～22℃，濕度45%～50%。

1.2藥物與試劑鏈脲佐菌素(STZ)購自美國Cayman公司(批號(hào)：0448975-16)，以0.1mol/L，PH值4.4檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液溶解，新鮮配制而成。血糖儀及其配套試紙，由德國拜耳公司提供。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測試劑盒，購自北京普諾欣生物科技有限公司(批號(hào)：20150330)。益氣養(yǎng)陰活血方為唐山市中醫(yī)醫(yī)院張軍主任經(jīng)驗(yàn)方，藥物組成包括黃芪、黃精、太子參、當(dāng)歸、山萸肉、鬼箭羽、葛根、牡丹皮、三七、丹參，上述藥物均為顆粒，統(tǒng)一購自中國中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院，以溫開水沖制，以備服用。津力達(dá)顆粒，購自石家莊以嶺藥業(yè)(批準(zhǔn)文號(hào)：國藥準(zhǔn)字Z20050845)。生理鹽水，由石家莊四藥有限公司提供。

1.3方法

1.3.12型糖尿病大鼠模型的建立健康雄性Wistar大鼠60只，分籠飼養(yǎng)，普通飼料適應(yīng)性飼養(yǎng)1周，隨機(jī)選取10只作為空白組，喂以普通飼料，其余50只為STZ造模組，給予高脂飼料。4周后，全部大鼠禁食禁水12 h，造模組按 30mg/kg體質(zhì)量的劑量多次腹腔注射STZ(溶于0.1mol/l檸檬酸緩沖液，PH值4.4)，空白組腹腔注射等體積生理鹽水。于STZ注射72 h后(提前12 h禁食禁水)檢測空腹血糖(FBG)，以FBG≥16.7mmol/L為糖尿病大鼠造模成功。并按2g/kg體質(zhì)量對各組大鼠灌胃50%葡萄糖溶液，于灌胃后120 min測血糖值。

1.3.3指標(biāo)檢測體質(zhì)量(BW)：每周測量各組實(shí)驗(yàn)大鼠的體質(zhì)量并記錄。空腹血糖(FBG)：各組實(shí)驗(yàn)大鼠于造模前、用藥前及用藥后監(jiān)測血糖，尾部采血，使用拜耳公司血糖儀檢測。2hBG：按2g/kg體質(zhì)量對各組大鼠灌胃50%葡萄糖溶液，于灌胃后120 min測血糖值?？崭挂葝u素(FINS)：采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Enzyme-linked immune-sorbent assay，ELISA)檢測試劑盒檢測各組大鼠血清中FINS的含量，按試劑盒說明書操作步驟嚴(yán)格操作。

1.3.4指標(biāo)計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)：按公式HOMA-IR=FBG×FINS/22.5計(jì)算。胰島素敏感指數(shù)(ISI)：按公式ISI=1/(FBG×FINS)計(jì)算，取其自然對數(shù)。

2　結(jié)果

2.1各組大鼠體質(zhì)量變化情況各組大鼠用藥前后體質(zhì)量比較結(jié)果顯示：與本組大鼠用藥前比較，用藥后益氣養(yǎng)陰活血方各劑量組及津力達(dá)組均可不同程度的減輕糖尿病大鼠體質(zhì)量(P<0.05)；用藥前各組大鼠比較，模型組、津力達(dá)組及益氣養(yǎng)陰活血方各劑量組的體質(zhì)量未見明顯差異，但與空白組比較均有明顯升高(P<0.05)；用藥后各組大鼠與模型組比較，益氣養(yǎng)陰活血方中、高劑量組及津力達(dá)組均可顯著降低模型大鼠體質(zhì)量(P<0.05)，但三組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。提示益氣養(yǎng)陰活血方治療及津力達(dá)治療均可減輕模型大鼠體質(zhì)量，且中、高劑量組減輕體質(zhì)量的作用與津力達(dá)組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表1。

表1　各組大鼠體重變化情況　(只，±s)

注：1)P<0.05 vs. 空白組，2)P<0.05 vs. 模型組，3)P<0.05 vs. 本組用藥前

2.2各組大鼠用藥前后FBG、2hBG比較與本組大鼠用藥前比較，用藥后益氣養(yǎng)陰活血方各劑量組及津力達(dá)組均可不同程度的降低2型糖尿病大鼠的FBG和2hBG，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；用藥前各組大鼠比較，模型組、津力達(dá)組及益氣養(yǎng)陰活血方各劑量組的FBG、2hBG未見明顯差異，但與空白組比較均有明顯升高(P<0.05)；用藥后各組大鼠與模型組比較，益氣養(yǎng)陰活血方各劑量組和津力達(dá)組FBG、2hBG均有不同程度的降低(P<0.05)，其中益氣養(yǎng)陰活血方中劑量組降低2hBG效果最為明顯，且優(yōu)于津力達(dá)組(P<0.05)。見表2。

表2　各組大鼠FBG、2hBG的比較　(只，

注：1)P<0.05 vs. 空白組，2)P<0.05 vs. 模型組，3)P<0.05 vs. 津力達(dá)組，4)P<0.05 vs. 本組用藥前

2.3各組大鼠FINS、ISI、HOMA-IR的比較與空白組比較，模型組、津力達(dá)組及益氣養(yǎng)陰活血方各劑量組的FINS含量、HOMA-IR均有顯著升高，ISI均有明顯下降，差異有顯著性改變(P<0.05)。與模型組比較，益氣養(yǎng)陰活血方各劑量組及津力達(dá)組的FINS、HOMA-IR均有所降低，ISI均有所升高，其中以益氣養(yǎng)陰活血方中劑量組效果最為明顯，且優(yōu)于津力達(dá)組(P<0.05)。見表3。

表3　各組大鼠FIN、ISI、HOMA-IR的比較(只，

注：1)P<0.05 vs. 空白組，2)P<0.05 vs. 模型組，3)P<0.05 vs. 津力達(dá)組

3　討論

糖尿病屬中醫(yī)“消渴”“消癉”等范疇，是一種慢性進(jìn)行性內(nèi)分泌代謝疾病，傳統(tǒng)理論認(rèn)為其基本病機(jī)是陰津虧損、燥熱偏盛，而以陰虧為本、燥熱為標(biāo)。近年來，通過大量的臨床和實(shí)驗(yàn)研究，周魯?shù)萚1]很多學(xué)者普遍認(rèn)同糖尿病氣陰兩虛兼血瘀的病機(jī)，并采用益氣養(yǎng)陰活血法治療，取得了很好的療效。

益氣養(yǎng)陰活血方以太子參、黃芪、黃精、山萸肉益氣滋陰、氣陰雙補(bǔ)，葛根解痙生津，當(dāng)歸養(yǎng)血活血，鬼箭羽、牡丹皮、丹參、三七粉活血化瘀。諸藥合用使氣陰得補(bǔ)、瘀血得化。此外現(xiàn)代藥理研究表明，黃芪具有顯著的降血糖和降血脂作用，其機(jī)制可能與降低血中拮抗激素水平和增加組織糖原合成有關(guān)[2]；葛根中所含黃酮類具有降血糖作用，其機(jī)制主要是促進(jìn)胰島B細(xì)胞分泌，增加機(jī)體對胰島素的敏感性；黃精中所含的黃精多糖能夠降低STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠血糖水平，提高胰島素表達(dá)[3]；鬼箭羽在降糖的同時(shí)對胰島B細(xì)胞有保護(hù)作用，并改善2型糖尿病糖脂代謝紊亂及提高胰島素敏感性[4，5]。

本實(shí)驗(yàn)比較了益氣養(yǎng)陰活血方和津力達(dá)顆粒在降血糖、改善胰島素抵抗作用等方面的差異，結(jié)果表明，這兩種功效的中藥均有降血糖的作用，都能明顯提高糖尿病大鼠的胰島素敏感性，改善其胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)，但益氣養(yǎng)陰活血方中劑量組的療效要優(yōu)于津力達(dá)組。張軍主任認(rèn)為，消渴病早期得不到及時(shí)恰當(dāng)?shù)闹委?，則病程遷延陰損耗氣、燥熱傷陰而至氣陰兩虛，同時(shí)臟腑功能失調(diào)、氣血運(yùn)行受阻而至瘀血內(nèi)生、脈絡(luò)瘀阻，因此在治療上運(yùn)用益氣養(yǎng)陰活血法改善胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)是十分必要的。

[1]周魯,周曉芳,付超,等.271首治療糖尿病中藥復(fù)方用藥規(guī)律研究[J].新中醫(yī),2004,36(11):40-41.

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[3]公惠玲,李衛(wèi)平,尹艷艷,等.黃精多糖對鏈脲菌素糖尿病大鼠降血糖作用及其機(jī)制探討[J].中國中藥雜志,2009,34(9):1149-1154.

[4]趙蒙蒙,謝夢洲,李璐丹,等.鬼箭羽對2型糖尿病大鼠胰島B細(xì)胞形態(tài)學(xué)的影響[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2010,30(3):14-16.

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The Effect of Yiqi Yangyin Huoxue Decoction on Insulin Resistance of Type 2 Diabetic Rats

WANG Haiying1ZHANG Jun2ZHAO Jing3LIU Ying2DAI Jinying1WANG Shunyi1YUAN Jie1

(1.Grade 2013 Graduate, School of Traditional Chinese Medicine, North China University of Science and Technology, Hebei, Tangshan 063000, China；2.Department of Endocrinology, Tangshan City Hospital of Traditional Chinese Medicine, Hebei, Tangshan 063000, China；3. School of Basic Medicine, North China University of Science and Technology, Hebei, Tangshan 063000, China)

ObjectiveTo explore the effect of Yiqi Yangyin Huoxue decoction (YYHD) on improving insulin resistance in the rat model of type 2 diabetes. MethodsType 2 diabetic rats model was induced by feeding high fat diet combined with intraperitoneal injection of a small dose of streptozotocin (STZ) in Wistar rats. And the model rats in the testing group were randomly divided into model group, Jinlida group, low dose group of YYHD, middle dose group of YYHD, high dose group of YYHD and normal rats as blank group. The effects of YYHD and Jinlida in falling blood sugar, improving insulin resistance, increasing insulin sensitivity, and etc. were observed. ResultsTwo kinds of traditional Chinese medicine preparation can fall blood sugar, improve insulin resistance, and increase insulin sensitivity. Middle dose group of YYHD is the most obvious in these aspects, which is better than Jinlida group (P<0.05). ConclusionYYHD can significantly improve insulin resistance, and increase insulin sensitivity of type 2 diabetes.

Yiqi Yangyin Huoxue decoction; Insulin resistance; Jinlida

河北省中醫(yī)藥管理局2014年度中醫(yī)藥類科研計(jì)劃課題(No.2014104)

1.華北理工大學(xué)中醫(yī)學(xué)院碩士研究生2013級(唐山063000)； 2.河北省唐山市中醫(yī)醫(yī)院內(nèi)分泌一科(唐山063000)；3.華北理工大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院(唐山063000)

10.3969/j.issn.1003-8914.2016.17.020

1003-8914(2016)-17-2496-03

(本文校對：趙建紅2016-04-25)