王金丹

摘要：金銀花是常用中藥材，而綠原酸被認(rèn)為是金銀花中重要的活性物質(zhì)之一。通過(guò)查閱相關(guān)文獻(xiàn)，分析、歸納、總結(jié)近年來(lái)金銀花中綠原酸的提取、純化及生物活性方面的研究進(jìn)展，以期為金銀花的進(jìn)一步開發(fā)利用提供參考。

關(guān)鍵詞：金銀花；綠原酸；提取；純化；生物活性；研究進(jìn)展

中圖分類號(hào)：R932 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1674-1161（2016）06-0059-03

金銀花（Flos Lonicerae）為忍冬科植物忍冬的干燥花蕾或初開的花，具有清熱解毒、涼散風(fēng)熱、保肝利膽等功效，是常用中藥材之一。金銀花之所以具有清熱解毒等功效，是因?yàn)槠渲泻幸环N有效成分——綠原酸（Chlorogenic acid）。綠原酸是一種多酚類化合物，分式子為C16H18O9，易溶于水、醇、丙酮等，具有抗氧化、抗菌、抗病毒、抗腫瘤、降血壓、降血脂、提高白細(xì)胞數(shù)量、增強(qiáng)免疫調(diào)節(jié)、增香護(hù)色等作用。近年來(lái)，通常以綠原酸的含量高低來(lái)評(píng)價(jià)金銀花質(zhì)量的好壞[1]。國(guó)內(nèi)對(duì)金銀花中綠原酸的提取、純化及其生物活性等進(jìn)行了大量的研究，本課題在查閱收集大量文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，綜述近幾年金銀花中綠原酸的提取、分離純化、生物活性等方面的研究進(jìn)展，以期為今后進(jìn)一步研究提供參考。

1 提取方法

1.1 溶劑提取法

金銀花中綠原酸的提取一般用水和醇溶液為溶劑提取，但用水作溶劑存在測(cè)得的綠原酸含量偏低、難以過(guò)濾等缺點(diǎn)，所以目前大多采用醇提法[2]。李春燕等人對(duì)比了藥典方法、回流提取法、超聲提取法、水煎法以及萃取與不萃取等不同處理方法提取金銀花中綠原酸的得率，結(jié)果顯示，不同提取方法對(duì)金銀花中綠原酸的提取率影響較大，其中醇提回流提取不萃取方法所得綠原酸提取率最高、為4.16%[3]。

1.2 超聲波輔助提取法

綠原酸提取時(shí)不能高溫、強(qiáng)光及長(zhǎng)時(shí)間加熱，而超聲波提取能克服綠原酸的不穩(wěn)定性，采用全物理過(guò)程提取，沒(méi)有水提法難以過(guò)濾之慮和醇提法溶劑使用成本高、溶劑回收難的問(wèn)題，是較為理想的提取方法。袁飛的研究表明，各因素影響超聲波提取綠原酸的順序?yàn)槿軇╊愋?gt;預(yù)處理>提取時(shí)間>物料比，優(yōu)化的最佳提取工藝為以60%乙醇為溶劑、物料比1∶30、提取時(shí)間45 min、遠(yuǎn)紅外微波1 min，得到的綠原酸含量比水和乙酸乙酯提取的高近2倍[4]。

1.3 微波輔助提取法

李燕婷等人通過(guò)采用單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)確定微波輔助提取金銀花中綠原酸的最佳工藝為乙醇體積分?jǐn)?shù)60%、微波處理時(shí)間9 min、微波功率300 W、料液比1∶10（g∶mL），提取率為3.779%，該法與傳統(tǒng)提取方法相比，操作時(shí)間明顯縮短，且無(wú)需回收溶劑[5]。尤秀麗等人采用超聲波和微波雙輔助提取技術(shù)得到的綠原酸提取率較單獨(dú)采用超聲波或微波輔助得到的綠原酸提取率高[6]。采用微波技術(shù)會(huì)造成提取過(guò)程溫度的迅速上升，影響綠原酸的提取率，所以在提取過(guò)程中要嚴(yán)格控制溫度。

1.4 其他提取方法

除了以上常用的提取方法外，也有很多研究采用了其他提取技術(shù)，如酶解法輔助提取、酶法輔助聚二乙醇（PEG）-200提取、微波輔助聚二乙醇（PEG）提取、破壁法輔助提取、超臨界二氧化碳提取等，均取得了較好的提取效果。

2 純化方法

2.1 大孔樹脂柱層析純化法

利用大孔樹脂分離純化綠原酸，其工藝簡(jiǎn)單、成本低、產(chǎn)率高，現(xiàn)較多采用。蘭雪萍等人分別考察各種類型的大孔樹脂對(duì)金銀花中綠原酸分離純化的影響，結(jié)果表明，NKA-2大孔樹脂、HPD450大孔樹脂、ADS-21型大孔樹脂和D101型大孔樹脂均對(duì)綠原酸有較好的純化效果，可用于工業(yè)化大生產(chǎn)[7]。

2.2 膜分離純化法

范遠(yuǎn)景等人比較3種微濾膜MF1，MF2和MF3，4種超濾膜UF1，UF2，UF3和UF4，及2種反滲透膜RO1和RO2對(duì)綠原酸提取液的過(guò)濾特性，結(jié)果表明，MF1，UF1和RO2膜的過(guò)濾性能明顯優(yōu)于其他同類型膜[8]。

2.3 其他純化方法

除了上述分離純化方法外，其他方法也較為常用，如凝膠柱層析、聚酰胺柱層析等。

3 生物活性

3.1 抑菌、抗病毒作用

金銀花中綠原酸對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、酵母菌、黑曲霉、枯草芽孢桿菌均有一定的抑制作用；而且，其抑菌效果主要受溫度影響，綠原酸抑菌效果隨溫度的升高而增加，但是當(dāng)溫度超過(guò)60 ℃時(shí)，抑菌效果明顯下降；pH值和紫外燈照射時(shí)間對(duì)其抑菌效果影響不大，不過(guò)綠原酸在酸性條件下的抑菌效果略好。徐躍成的試驗(yàn)結(jié)果表明，綠原酸對(duì)革蘭氏陰性菌（志賀氏菌、沙門氏菌）的抑菌活性比革蘭氏陽(yáng)性菌（金黃色葡萄球菌、李斯特菌）更強(qiáng)，綠原酸水溶液抑菌效果與0.1 mg/mL的卡那霉素的抑菌效果相當(dāng)[9]。金銀花主要活性成分綠原酸可以抑制煙曲霉生物膜胞外基質(zhì)的形成，其抑制作用呈濃度依賴性。王林青的研究結(jié)果表明，在安全濃度范圍內(nèi)，金銀花和山銀花綠原酸類提取物在體外對(duì)PRV，NDV分別表現(xiàn)出顯著的阻斷病毒吸附，抑制病毒感染作用和中和病毒作用，且有一定的量效關(guān)系；而且金銀花綠原酸類提取物能促進(jìn)淋巴細(xì)胞增殖及協(xié)同LPS，ConA的作用[10]。

3.2 抗血栓作用

樊宏偉等人研究金銀花中綠原酸、異綠原酸類化合物的體外抗血小板聚集作用及H2O2損傷的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用，結(jié)果表明，金銀花中有機(jī)酸類化合物有抗ADP誘導(dǎo)血小板聚集的作用；對(duì)H2O2損傷綠原酸雖然未觀察到直接對(duì)抗作用，但具有預(yù)防性保護(hù)作用[11]。

3.3 抗氧化（清除自由基）作用

劉豪等人的研究結(jié)果表明，金銀花95%乙醇提取物中綠原酸、總黃酮和總酚含量分別為123.99，242.62和48.76 mg/g；95%乙醇提取物清除

·OH和DPPH·能力也最強(qiáng)，清除率分別為90.69%和65.64%[12]。石奇的研究結(jié)果表明，金銀花綠原酸具有較強(qiáng)的抗氧化能力，其抗氧化能力與綠原酸濃度在一定范圍內(nèi)呈線性關(guān)系。金銀花綠原酸添加量為0.5 mg/mL時(shí)，對(duì)OH·的清除率比VC效果略好；添加量為0.4 mg/mL時(shí)，對(duì)O2-·的清除效果明顯優(yōu)于VC[13]。

3.4 解熱和抗炎作用

雷玲的研究結(jié)果表明，金銀花水提取物（綠原酸、木犀草素）于10 mg/mL具有抗內(nèi)毒素作用，金銀花為5.625 g/kg時(shí)具有解熱作用，為45 g/kg時(shí)具有抗炎作用[14]。

3.5 防腐作用

楊明陽(yáng)等人的研究結(jié)果表明，綠原酸對(duì)貢梨、紅富士鮮切片都有保鮮效果，對(duì)圣女果的保鮮作用差[15]。詹曉如提取分離金銀花活性成分綠原酸，然后將其用于醫(yī)院常用幾種制劑防腐試驗(yàn)，結(jié)果表明，0.02%綠原酸具有與0.03%尼泊金乙酯相同的防腐作用，證明綠原酸可以用于制劑防腐，以消除化學(xué)防腐劑毒副作用[16]。

3.6 防曬作用

張英等人的研究結(jié)果顯示，金銀花提取物在280～350 nm內(nèi)具有良好的紫外吸收性能，金銀花防曬霜體外評(píng)價(jià)SPF值與金銀花提取物中綠原酸含量有關(guān)[17]。

4 結(jié)語(yǔ)

金銀花作為傳統(tǒng)的中藥，對(duì)機(jī)體具有廣泛的作用，是國(guó)家第一批藥食兼用植物，具有極高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和保健作用，而其有效成分綠原酸是發(fā)揮作用的主要成分。目前關(guān)于金銀花綠原酸的研究仍需進(jìn)一步深入，還要做大量的試驗(yàn)研究，以促進(jìn)金銀花更大規(guī)?；a(chǎn)和新型保健用品的開發(fā)。

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