張　東（江蘇省常州市第三人民醫(yī)院　常州　213001）

獨(dú)活飲片及其配方顆粒中蛇床子素的含量比較

張東（江蘇省常州市第三人民醫(yī)院常州213001）

目的：比較分析獨(dú)活飲片及其配方顆粒中蛇床子素的含量。方法：利用HPLC技術(shù)對(duì)獨(dú)活飲片及其配方顆粒進(jìn)行測定，比較二者蛇床子素的含量。結(jié)果：獨(dú)活飲片中蛇床子素含量明顯高于獨(dú)活配方顆粒中蛇床子素含量，后者約為前者的50%。結(jié)論：獨(dú)活顆粒中蛇床子素含量較低，需要對(duì)生產(chǎn)工藝進(jìn)行改進(jìn)。

獨(dú)活飲片 配方顆粒 蛇床子素 含量

獨(dú)活中含有香豆素類成分，水溶性較差，獨(dú)活飲片是獨(dú)活配方顆粒的原料，從藥材飲片到配方顆粒、轉(zhuǎn)移率較低［1～2］。本次選取獨(dú)活飲片和獨(dú)活配方顆粒，作為探討?yīng)毣铒嬈捌渑浞筋w粒中蛇床子素的含量的研究對(duì)象，其結(jié)果如下。

1　材料與儀器

材料：中國藥品生物制品檢定所提供蛇床子素對(duì)照品，三九醫(yī)藥股份公司提供獨(dú)活飲片和獨(dú)活配方顆粒。

儀器：Waters-600E高效液相色譜儀、Diamonsil C18色譜柱、Waters-2487雙通道紫外檢測器、JS-3030色譜工作站（大連江申分離科技公司）、UP5200H超聲清洗機(jī)。甲醇為色譜純，水為高純水，其他試劑均為分析純。

2　方法與結(jié)果

2.1色譜條件：色譜柱為Diamonsil C18，流動(dòng)相為甲醇-0.1%磷酸（75∶25），檢測波長設(shè)置為322nm，柱溫設(shè)置為30℃，流速設(shè)置為1.0mL/min，進(jìn)樣10μL。結(jié)果顯示蛇床子素與其他成分分離效果較好，具體可以參見圖1。

2.2線性關(guān)系考察：在60℃溫度下，將蛇床子素對(duì)照品進(jìn)行減壓干燥4h后，精密稱取100mg對(duì)照品，將其置入100mL量瓶中，向其中添加甲醇，稀釋對(duì)照品使其達(dá)到刻度，并將其搖勻，獲取對(duì)照品溶液。依次精密吸取0.5mL、1mL、2mL、5mL、8mL、10mL、15mL對(duì)照品溶液，將所有溶液分別稀釋至100mL，制成含蛇床子素的對(duì)照品溶液，在選定的色譜條件下，取10μL上清液，檢測出峰面積積分值。將蛇床子素進(jìn)樣量作為橫坐標(biāo)，將峰面積積分值作為縱坐標(biāo)，結(jié)果顯示，進(jìn)樣量在5μg/mL～150μg/mL區(qū)間內(nèi)，進(jìn)樣量與峰面積存在良好的線性關(guān)系。

2.3精密度實(shí)驗(yàn)：精密吸取10μL蛇床子素對(duì)照品溶液，重復(fù)5次進(jìn)樣，蛇床子素峰面積積分值RSD為1.01%。

2.4重復(fù)性實(shí)驗(yàn)：采用樣品測定法對(duì)獨(dú)活飲片的粉末進(jìn)行測定，重復(fù)5次，得到平均含量15.5mg/g，算出RSD，為1.19%。

2.5回收率實(shí)驗(yàn)：精密稱取0.05g配方顆粒樣品和0.5g獨(dú)活藥材粉末，分別向其中添加1.02mg蛇床子素對(duì)照品溶液，對(duì)配方顆粒加樣回收率和獨(dú)活藥材加樣回收率進(jìn)行測定，原藥材平均回收率為98.66%，RSD為1.25%，配方顆粒平均回收率為98.27%，RSD為1.15%，具體可以參見表1。

2.6樣品測定：精密稱取0.05g配方顆粒樣品，將其置入25mL量瓶中，同時(shí)向量瓶中添加20mL甲醇，對(duì)其進(jìn)行超聲處理，時(shí)間為半個(gè)小時(shí)，放冷后向其中添加甲醇達(dá)到刻度，搖勻取1mL濾液，將溶液稀釋至10mL，向液相色譜儀中注入10μL稀釋液，測定峰面積，算出蛇床子素含量。

精密稱取0.5g獨(dú)活粉末，將其置入具塞錐形瓶中，添加20mL甲醇，超聲處理半小時(shí)，放冷后稱定質(zhì)量，減失質(zhì)量用甲醇補(bǔ)足，搖勻后進(jìn)行過濾，取2mL濾液，將其稀釋至10mL，向液相色譜儀中注入10μL稀釋液，測出峰面積，計(jì)算蛇床子素含量。具體結(jié)果可以參見表2。

表1　回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表2　蛇床子素含量測定結(jié)果

3　討論

采用水提取技術(shù)制成獨(dú)活配方顆粒，獨(dú)活中含有香豆素類成分，水溶性較差。在本次研究中，對(duì)配方顆粒和獨(dú)活飲片中蛇床子素含量進(jìn)行測定，其中原藥材飲片中蛇床子含量為15.59mg/g，配方顆粒中蛇床子素素含量為7.84mg/g。

原配方顆粒是對(duì)原獨(dú)活藥材進(jìn)行水提取后，濃縮、噴霧干燥制成的，獨(dú)活配方顆粒中蛇床子素含量僅為原獨(dú)活藥材的50%，轉(zhuǎn)移率較低，因此必須對(duì)此生產(chǎn)工藝進(jìn)行改進(jìn)，通過提高原藥材浸膏得率，提升獨(dú)活配方顆粒中蛇床子素的含量。有文獻(xiàn)資料顯示［3～4］，有機(jī)溶媒復(fù)提法時(shí)生產(chǎn)獨(dú)活配方顆粒的首選方法，但是為了降低生產(chǎn)成本，提高生產(chǎn)規(guī)模，應(yīng)該對(duì)其進(jìn)一步改進(jìn)，80%乙醇6倍量體積，浸潤6d后，重復(fù)提取3次，乙醇回收，濃縮、噴霧干燥，制成獨(dú)活配方顆粒。高效液相色譜法操作簡單，重現(xiàn)性較好，準(zhǔn)確度較高，能夠有效控制配方顆粒的質(zhì)量。

［1］袁欣.獨(dú)活主要成分的分離及含量測定研究概況［J］.海峽藥學(xué)，2013，25（6）：13-16.

［2］王軍，何立環(huán)，陳金泉，等.正交試驗(yàn)優(yōu)選獨(dú)活葛根湯提取工藝［J］.中國中醫(yī)藥信息雜志，2012，19（7）：60-62.

［3］趙小勤，蒲旭峰，孔衛(wèi)東，等.獨(dú)活寄生丸的藥材鑒別及蛇床子素的測定［J］.華西藥學(xué)雜志，2012，27（3）：342-344.

［4］賈淑云，王斌，李鋒，等.氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用內(nèi)標(biāo)法測定獨(dú)活中的蛇床子素［J］.中國處方藥，2015，14（4）：20-21.

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1672-8351（2016）09-0014-01