鄔　濤，吳清華△，吳　丹，鄒　兵，謝軍平，劉燕娜，雷光濤，黃鐵球，程曉曙，吳延慶，洪　葵

(南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院心血管內(nèi)科，江西南昌 330006；江西衛(wèi)生職業(yè)學(xué)院醫(yī)學(xué)技術(shù)系，江西南昌 330052；南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科，江西南昌 330006)

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慢性心力衰竭患者外周血NF-κB、血清TGF-β1與心室重構(gòu)的相關(guān)性*

鄔濤1，吳清華1△，吳丹2，鄒兵1，謝軍平3，劉燕娜1，雷光濤1，黃鐵球1，程曉曙1，吳延慶1，洪葵1

(南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院心血管內(nèi)科，江西南昌 330006；江西衛(wèi)生職業(yè)學(xué)院醫(yī)學(xué)技術(shù)系，江西南昌 330052；南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科，江西南昌 330006)

目的探討慢性心力衰竭(CHF)患者血清轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF)-β1和外周血核因子(NF)-κB的表達(dá)變化及其與心室重構(gòu)指標(biāo)的相關(guān)性。方法選取CHF患者(CHF組)96例和體檢健康者(對(duì)照組)30例，應(yīng)用心臟超聲檢測(cè)結(jié)果，計(jì)算平均室壁應(yīng)力(MWS)和左心室心肌質(zhì)量指數(shù)(LVMI)；ELISA法檢測(cè)血清TGF-β1和外周血NF-κB 水平；分析上述指標(biāo)間的相關(guān)性。結(jié)果CHF組患者M(jìn)WS和LVMI,以及血清TGF-β1、外周血NF-κB表達(dá)水平均明顯高于對(duì)照組(P<0.01)，且伴隨心功能分級(jí)增大而提高(P<0.01)；CHF患者血清TGF-β1、外周血NF-κB表達(dá)水平與心室重構(gòu)指標(biāo)MWS和LVMI均呈正相關(guān)(P<0.01)；應(yīng)用多元回歸分析顯示，血清TGF-β1和NF-κB 水平與LVMI 均呈獨(dú)立正相關(guān)(P<0.01)。結(jié)論CHF 患者血清TGF-β1、外周血NF-κB表達(dá)水平顯著增加，與CHF患者心室重構(gòu)嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，也是CHF患者心室重構(gòu)嚴(yán)重程度的獨(dú)立影響因素。

慢性心力衰竭；NF-κB；轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1；心室重構(gòu)

慢性心力衰竭(chronic heart failure，CHF)以心肌損傷所致心臟結(jié)構(gòu)和功能變化及心室泵血功能低下為主，心室重構(gòu)是其病程進(jìn)行的基本機(jī)制。研究發(fā)現(xiàn)，心室重構(gòu)的發(fā)生與內(nèi)源性炎癥細(xì)胞因子和神經(jīng)內(nèi)分泌激素激活密切相關(guān)[1]。核因子(NF)-κB參與多種心血管疾病的發(fā)生和發(fā)展過程，其介導(dǎo)的炎癥及與凋亡的關(guān)系在心力衰竭整個(gè)病程中發(fā)揮重要作用[2]。轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF)-β1是一個(gè)促纖維化因子，可刺激成纖維細(xì)胞的增生，促進(jìn)膠原合成，升高基質(zhì)金屬蛋白酶的表達(dá)以及心肌細(xì)胞的肥大等，在心室重構(gòu)中起著重要作用[3]。本研究觀察CHF不同心功能分級(jí)患者血清TGF-β1和外周NF-κB的變化，探討血清TGF-β1和外周血NF-κB與心室重構(gòu)指標(biāo)間的關(guān)系[4]，為有效的臨床預(yù)防和治療提供理論依據(jù)。

1　資料與方法

1.1一般資料本組研究共收集南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院心內(nèi)科2013年2月至2014年12月收治CHF患者共100例；療程期間脫落、失訪病例4例，最后完成研究病例96例(CHF組)；其中男55例，女41例；年齡52～74歲，平均(62.27±7.19)歲；基礎(chǔ)病因：冠心病22例，風(fēng)濕性心臟病15例，高血壓心臟病29例，擴(kuò)張型心肌病11例，慢性肺心病19例；心功能分級(jí)：心功能Ⅱ級(jí)30例，心功能Ⅲ級(jí)34例，心功能Ⅳ級(jí)32例。同期選取在該院體檢健康者30例作為對(duì)照組，其中男17例，女13例；年齡51～73歲，平均(61.97±7.58)歲。兩組研究對(duì)象間在年齡、性別等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，受試者知情同意。

1.2方法

1.2.1診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《內(nèi)科學(xué)》[5]中CHF相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)制定；(1)基礎(chǔ)心臟病診斷證據(jù)；(2)臨床癥狀、體征：左心衰竭伴有不同程度呼吸困難、肺部啰音，有心力衰竭伴有頸靜脈怒張、肝大、水腫，心力衰竭的心臟奔馬律、瓣膜區(qū)雜音等；(3)詳盡的體格檢查相關(guān)診斷證據(jù)；(4)結(jié)合實(shí)驗(yàn)室及影像學(xué)檢查結(jié)果。心功能分級(jí)參照美國(guó)紐約心臟病學(xué)會(huì)(NYHA)標(biāo)準(zhǔn)[6]。

1.2.2病例納入和排除標(biāo)準(zhǔn)納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)年齡60～75歲；(2)符合CHF診斷標(biāo)準(zhǔn)者；(3)心功能分級(jí)Ⅱ～Ⅳ級(jí)；(4)研究前未進(jìn)行相關(guān)治療者；(5)自愿加入本研究，且簽署同意協(xié)議者。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)不符合CHF診斷標(biāo)準(zhǔn)者；(2)由肝、腎等重要臟器衰竭致心功能衰竭者；(3)合并急、慢性感染性疾病者；(4)精神病患者；(5)伴有心肌梗死等相關(guān)心臟嚴(yán)重疾病者；(6)1個(gè)月內(nèi)曾行血管重建術(shù)；(7)嚴(yán)重的瓣膜病、梗阻性心臟病所致心力衰竭者。

1.2.3檢測(cè)指標(biāo)

1.2.3.1超聲心動(dòng)圖檢查在血樣采集同日由2名經(jīng)驗(yàn)豐富的超聲科醫(yī)生交替對(duì)所有研究對(duì)象行超聲心動(dòng)圖檢查；取左側(cè)臥位，以左室長(zhǎng)軸切面檢測(cè)室間隔厚度(IVST)、左室舒張末期內(nèi)徑(LVEDD)、左室收縮末期內(nèi)徑(LVESD)、左心室后壁舒張末期厚度(PWD)及左心室后壁收縮末期厚度(PWS)；取心尖四腔切面，應(yīng)用Simpson 法檢測(cè)左室舒張末容積(LVEDV)、收縮末容積(LVESV)、室間隔舒張末期厚度(IVSD)、室間隔收縮末期厚度(IVSS)及左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)；以上參數(shù)均重復(fù)檢測(cè)3個(gè)心動(dòng)周期，取均值；同時(shí)檢測(cè)左上肢肱動(dòng)脈收縮壓(SBP)；計(jì)算左室心肌質(zhì)量指數(shù)(LVMI)及平均室壁應(yīng)力(MWS)，具體計(jì)算方法：左室心肌質(zhì)量(LVM)= 0.8×1.04[(LVEDD+IVST+PWD)3-(LVEDD)3 ]+0.6，體表面積(BSA)= 0.006×身高(cm)+0.013×體質(zhì)量(kg)，LVMI =LVM/BSA，MWS=SBP×(LVEDD + LVEDS)/4(IVSD+IVSS+PWD+PWS)/4。

1.2.3.2血清TGF-β1水平檢測(cè)于晨起空腹抽取研究對(duì)象外周靜脈血約3 mL，3 000 r/min離心10 min，分離血清，置于-80℃?zhèn)溆茫捎肊LISA檢測(cè)，試劑盒由上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司提供。

1.2.3.3外周血NF-κB水平檢測(cè)晨起空腹抽取研究對(duì)象外周靜脈血3 mL左右，置于肝素抗凝管中，按1∶6加入紅細(xì)胞裂解液，室溫靜置5 min，4 000 r/min,離心5 min，PBS洗，棄上清液，抽提出核蛋白，置于-80℃待測(cè)，應(yīng)用ELISA 法測(cè)定，試劑盒由武漢華美生物工程有限公司提供。

2　結(jié)　　果

2.1兩組心室重構(gòu)指標(biāo)LVMI和MWS水平變化CHF組患者的MWS和LVMI水平均明顯高于對(duì)照組(P<0.01)；CHF心功能Ⅲ級(jí)患者M(jìn)WS和LVMI明顯高于Ⅱ級(jí)患者(P<0.01)；CHF心功能Ⅳ級(jí)患者M(jìn)WS和LVMI明顯高于心功能Ⅱ、Ⅲ級(jí)患者，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見表1。

表1　　兩組心室重構(gòu)指標(biāo)LVMI和MWS水平變化

a：P<0.01，與對(duì)照組比較；b：P<0.01，與Ⅱ級(jí)比較；c：P<0.01，與Ⅲ級(jí)比較。

2.2兩組血清TGF-β1和外周血NF-κB 水平比較CHF 組患者血清TGF-β1和外周血NF-κB水平均明顯高于對(duì)照組(P<0.01)；CHF心功能Ⅲ級(jí)患者血清TGF-β1和外周血NF-κB水平均明顯高于Ⅱ級(jí)組患者(P<0.01)；CHF心功能Ⅳ級(jí)患者血清TGF-β1和外周血NF-κB水平均明顯高于心功能Ⅱ、Ⅲ級(jí)患者，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，見表2。

表2　　兩組血清TGF-β1和外周血NF-κB 水平比較

a：P<0.01，與對(duì)照組比較；b：P<0.01，與Ⅱ級(jí)比較；c：P<0.01，與 Ⅲ級(jí)比較。

2.3CHF患者TGF-β1和NF-κB水平與心室重構(gòu)指標(biāo)LVMI、MWS 的相關(guān)性分析對(duì)TGF-β1和NF-κB水平與心室重構(gòu)指標(biāo)LVMI、MWS 進(jìn)行線性分析，TGF-β1水平和NF-κB 水平均與MWS、LVMI呈正相關(guān)(P<0.01)，見表3。

表3　　各組血清TGF-β1、NF-κB水平與MWS、

2.4LVMI多因素回歸分析以LVMI值為應(yīng)變量，以TGF-β1和NF-κB為自變量行多元線性回歸分析；TGF-β1和NF-κB水平與LVMI均呈正相關(guān)(調(diào)整的r2=0.403，P<0.01)，表明TGF-β1和NF-κB均為L(zhǎng)VMI 的獨(dú)立影響因素，見表4。

表4　　LVMI 獨(dú)立決定因子多元線性回歸分析

3　討　　論

研究證實(shí)，引起CHF發(fā)生發(fā)展的基本機(jī)制是心室重構(gòu)。心室重構(gòu)是室性心律失常發(fā)生的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)，而室性心律異常與左心室肥厚程度密切相關(guān)[7]。LVMI和MWS是目前評(píng)價(jià)心室重構(gòu)的重要指標(biāo)；尤其是LVMI對(duì)反映心肌肥厚程度的敏感性好，心肌肥厚在心肌重塑過程中發(fā)揮重要作用；此外，目前，超聲心動(dòng)圖檢測(cè)和NYHA心功能分級(jí)是臨床評(píng)價(jià)CHF的常用方法，本研究將CHF患者分為3組，即Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ級(jí)組。同期納入體檢健康者作為對(duì)照組，觀察以上研究對(duì)象LVMI和MWS的表達(dá)水平。結(jié)果顯示，CHF組患者的MWS和LVMI水平均明顯高于對(duì)照組(P<0.01)；心功能Ⅲ級(jí)患者M(jìn)WS和LVMI明顯高于Ⅱ級(jí)組患者(P<0.01)；心功能Ⅳ級(jí)患者M(jìn)WS和LVMI明顯高于心功能Ⅱ、Ⅲ級(jí)患者，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。以上結(jié)果表明，心衰程度越重，LVMI、MWS表達(dá)水平越高。

NF-κB作為重要核轉(zhuǎn)錄因子的一種，大量分布于血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞及心肌細(xì)胞中；炎性因子如TNF-α、IL-1等可刺激心肌細(xì)胞膜IκB 降解，進(jìn)而激活NF-κB，導(dǎo)致依賴NF-κB 激活的基因轉(zhuǎn)錄并與核DNA 結(jié)合增加，進(jìn)而誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡[8]；NF-κB也可激活各種炎性細(xì)胞因子，而某些細(xì)胞因子如TNF-α又可進(jìn)一步激活NF-κB，如此循環(huán)產(chǎn)生級(jí)聯(lián)放大作用，加重心力衰竭[9]。近年國(guó)內(nèi)研究發(fā)現(xiàn)，慢性心衰時(shí)心臟合成和釋放TNF-α，尤其在慢性心室重塑過程中，心肌細(xì)胞分泌大量TNF-α，而TNF-α又作用于心臟，可激活NF-κB誘導(dǎo)酶，誘導(dǎo)NF-κB 入細(xì)胞核，從而啟動(dòng)細(xì)胞炎癥所需基因表達(dá)[10-11]；目前發(fā)現(xiàn)N-乙酰半胱氨酸、間歇有氧運(yùn)動(dòng)及中藥干預(yù)等均通過直接或間接途徑拮抗NF-κB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，進(jìn)而減少炎癥反應(yīng)及心肌細(xì)胞凋亡，達(dá)到改善心功能和保護(hù)心肌的效果[12]。本研究結(jié)果顯示，CHF組患者外周血NF-κB水平均明顯高于對(duì)照組(P<0.01)；心功能Ⅲ級(jí)患者M(jìn)WS和LVMI明顯高于Ⅱ級(jí)組患者(P<0.01)；心功能Ⅳ級(jí)患者外周血NF-κB明顯高于心功能Ⅲ級(jí)和Ⅱ級(jí)患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。以上結(jié)果表明，心衰程度越重，外周血NF-κB表達(dá)水平越高。

TGF-β1作為TGF-β亞型的一種，在體細(xì)胞中所占比例最高、活性最強(qiáng)、分布廣泛；研究表明，在心肌梗死和壓力超負(fù)荷的動(dòng)物模型中，其左室心肌的TGF-β1mRNA的表達(dá)升高，TGF-β1也參與促進(jìn)心肌纖維化、心肌肥大等病理過程[13]。近年國(guó)內(nèi)研究發(fā)現(xiàn)，TGF-β1參與心力衰竭疾病的心肌纖維化過程，與心肌纖維化系列指標(biāo)變化關(guān)系密切[14]，多種干預(yù)措施均可通過抑制TGF-β1表達(dá)，發(fā)揮抗心肌纖維化的效果，對(duì)心力衰竭起到一定療效[15]。此外，也參與CHF患者TGF-β1表達(dá)增多，TGF-β1可能參與了其心室重構(gòu)過程，而降低CHF患者機(jī)體的TGF-β1水平可顯著改善其心功能，對(duì)患者的心室重構(gòu)有一定治療作用[16]。本研究結(jié)果顯示，CHF組患者的血清TGF-β1水平均明顯高于對(duì)照組(P<0.01)；心功能Ⅲ級(jí)患者M(jìn)WS和LVMI明顯高于Ⅱ級(jí)組患者(P<0.01)；心功能Ⅳ級(jí)患者血清TGF-β1明顯高于心功能Ⅲ級(jí)和Ⅱ級(jí)患者，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。以上結(jié)果表明，心力衰竭程度越重，血清TGF-β1表達(dá)水平越高。

以上研究結(jié)果顯示：CHF組患者血清TGF-β1和外周血NF-κB水平的變化與LVMI和MWS變化相一致；提示CHF患者血清TGF-β1和外周血NF-κB水平增高與LVMI和MWS的升高可能存在一定聯(lián)系。進(jìn)一步相關(guān)性分析顯示：TGF-β1水平和NF-κB 水平均與MWS、LVMI呈正相關(guān)(P<0.01)。表明血清TGF-β1和外周血NF-κB水平變化可較好反映心室重構(gòu)情況。應(yīng)用多因素線性回歸分析LVMI 的獨(dú)立決定因子，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：TGF-β1和NF-κB表達(dá)水平與LVMI 均呈正性獨(dú)立相關(guān)，為心室重構(gòu)重要指標(biāo)LVMI的獨(dú)立影響因素。以上結(jié)果進(jìn)一步提示TGF-β1和NF-κB表達(dá)水平增加均可作為CHF患者心室重構(gòu)發(fā)生、發(fā)展的獨(dú)立危險(xiǎn)因素之一。

綜上所述，血清TGF-β1和外周血NF-κB在CHF時(shí)表達(dá)水平升高，且伴隨NYHA心功能分級(jí)增高而升高，與心室重構(gòu)重要指標(biāo)的LVMI和MWS呈顯著正相關(guān)，也是心室重構(gòu)重要指標(biāo)LVMI的獨(dú)立決定因子。故對(duì)于CHF患者早期監(jiān)測(cè)血清TGF-β1和外周血NF-κB表達(dá)水平，可能有助于輔助預(yù)測(cè)CHF心室重構(gòu)的病變過程。本研究不足之處為樣本量較小，未能將患者血清TGF-β1和外周血NF-κB水平經(jīng)治療后的表達(dá)水平與心室重構(gòu)指標(biāo)LVMI和MWS水平的長(zhǎng)期預(yù)后進(jìn)行量效分析，進(jìn)一步探討早期的針對(duì)性靶向治療是否能夠改善CHF患者的遠(yuǎn)期心室重構(gòu)水平，有待于進(jìn)一步探討。

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·經(jīng)驗(yàn)交流·10.3969/j.issn.1671-8348.2016.24.033

江西省科技支撐計(jì)劃(20111BBG70017-1)。作者簡(jiǎn)介：鄔濤(1978-)，博士，副主任醫(yī)師；主要從事心力衰竭、高血壓、冠心病、先心病的基礎(chǔ)、臨床及其介入治療研究?！?/p>

，Tel:13607082828；E-mail:hfotwethgrgr@163.com。

R541.6

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1671-8348(2016)24-3408-04

2016-03-07

2016-05-27)