胡鵬飛　胡南　葛亮　任燕　冉靈芝

[摘要]目的：探討大敗毒膠囊對梅毒血清固定患者外周血Treg/Th17及CD4⁺CD25⁺T細(xì)胞水平的影響。方法：隨機(jī)雙盲法將60例梅毒血清固定患者分為對照組與觀察組，每組30例，對照組采取常規(guī)芐星青霉素治療，觀察組在對照組基礎(chǔ)上加以大敗毒膠囊口服，比較兩組臨床療效、治療前后Treg細(xì)胞、Th17細(xì)胞、Foxp3及CD4⁺CD25⁺T細(xì)胞比例變化情況。結(jié)果：觀察組隨訪12個月臨床治愈率、總有效率分別為83.33%、93.33%，均顯著高于對照組的0.00%、43.33%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.0001）。觀察組末次隨訪時Treg細(xì)胞、Th17細(xì)胞、Foxp3、CD4⁺CD25⁺T細(xì)胞比例與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：大敗毒膠囊治療梅毒血清固定療效明確，能顯著糾正外周血Treg細(xì)胞/Th17細(xì)胞失衡現(xiàn)象，降低CD4⁺CD25⁺T細(xì)胞比例，臨床值得推廣。

[關(guān)鍵詞]大敗毒膠囊；梅毒血清固定；外周血Treg/Th17；CD4⁺CD25⁺T細(xì)胞

[中圖分類號]R759.1 [文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A

梅毒作為臨床一種常見慢性傳染疾病，主要經(jīng)由性交傳播蒼白螺旋體感染引起，其臨床表現(xiàn)較為復(fù)雜，嚴(yán)重時導(dǎo)致多器官損傷。目前臨床治療梅毒以規(guī)范驅(qū)梅方案為主，治療后2年內(nèi)梅毒快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗（RPR）基本陰轉(zhuǎn)，但仍有部分患者治療后RPR試驗陽性，即血清固定。而血清固定后通過加大驅(qū)梅藥物劑量難以使其陰轉(zhuǎn)，且其復(fù)發(fā)率較高。相關(guān)研究表明，血清固定可能與梅毒嚴(yán)重程度、用藥方案選擇、機(jī)體免疫功能等多種因素有關(guān)。另外，近年來臨床發(fā)現(xiàn)大敗毒膠囊在梅毒治療中應(yīng)用越來越多，具有清血敗毒、消腫止痛功效。為此筆者對我院2012年1月至2014年1月就診的30例梅毒血清固定患者加以大敗毒膠囊治療，探討其對患者外周血細(xì)胞免疫相關(guān)指標(biāo)的影響，報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

收集我院2012年1月至2014年1月就診的梅毒血清固定患者共60例，納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）梅毒病程至少2年；（2）經(jīng)驅(qū)梅治療后RPR試驗陽性；（3）無明顯神經(jīng)系統(tǒng)受累癥狀及體征；（4）知情并同意治療；排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）HIV感染；（2）有腫瘤病史、糖尿病病史；（3）過敏體質(zhì)、中途退出研究者；（4）不符合納入標(biāo)準(zhǔn)者。隨機(jī)雙盲法將患者分為對照組與觀察組，每組30例，對照組中男12例，女18例；年齡20～62歲，平均（32.1±1.4）歲：其中早期梅毒21例，潛伏梅毒9例。觀察組中男13例，女17例：年齡19～60歲，平均（32.5±1.5）歲；其中早期梅毒20例，潛伏梅毒10例。對比兩組性別比例、年齡、梅毒類型差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），有可比性。

1.2 方法

對照組患者采取常規(guī)芐星青霉素治療，240萬U注射用芐星青霉素（江西東風(fēng)藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，國藥準(zhǔn)字H36020222）+8mL注射用水混合后分半對兩側(cè)臀部肌肉注射，1次/周，連續(xù)注射3周。觀察組在對照組的基礎(chǔ)上加以大敗毒膠囊（瑞福祥藥業(yè)（廣西）有限公司，國藥準(zhǔn)字Z20044320）口服，5粒/次，4次/d，連續(xù)用藥3周。療程結(jié)束后隨訪3～12個月，且每3個月行1次RPR試驗。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 臨床療效 臨床治愈：血清RPR陰轉(zhuǎn)，且未臨床復(fù)發(fā)：好轉(zhuǎn)：RPR下降2個及以上滴度：無效：RPR下降2個以下滴度或不變?？傆行?臨床治愈率+好轉(zhuǎn)率。

1.3.2 細(xì)胞免疫指標(biāo) 包括外周血Treg細(xì)胞、Thl7細(xì)胞、Foxp3及CD4⁺CD25⁺T細(xì)胞比例等指標(biāo)，均通過流式細(xì)胞儀測定，嚴(yán)格按照相關(guān)試劑盒說明書操作，于治療前、末次隨訪時測定。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計軟件分析數(shù)據(jù)，計數(shù)資料以[n（%）]形式表示，x²檢驗，計量資料（x±s）表示，t檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 末次隨訪臨床療效

隨訪12個月，觀察組臨床治愈率83.33%，總有效率93.33%；對照組臨床治愈率0.00%，總有效率43.33%，兩組臨床治愈率、總有效率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.0001）。見表1。

2.2 治療前后免疫細(xì)胞指標(biāo)比較

觀察組末次隨訪時Treg細(xì)胞、Foxp3、CD4⁺CD25⁺T細(xì)胞比例較治療前均明顯下降，Th17細(xì)胞較治療前明顯上升，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。且觀察組末次隨訪時上述指標(biāo)均明顯優(yōu)于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

3 討論

流行病學(xué)調(diào)查顯示，2010年全國報告梅毒病例358534例，全人口發(fā)病率為26.86/10萬，居全國乙類傳染病的第三位。2005～2011年深圳市某區(qū)報告稱，梅毒病例數(shù)以每年平均新增12.96%速度上升，其中一、二期梅毒報告數(shù)變化不大，隱性梅毒則明顯上升。目前梅毒的治療藥物主要為長效青霉素類，經(jīng)過規(guī)范治療，多數(shù)患者RPR試驗可陰轉(zhuǎn)，而在正規(guī)驅(qū)梅治療后，臨床癥狀消失，早期梅毒（感染后不足2年）隨訪6個月以上、晚期梅毒（感染至少2年）隨訪12個月以上，血清RPR仍不轉(zhuǎn)陰的患者即為血清固定，復(fù)發(fā)率較高，增加患者身心痛苦。為此采取有效措施防治梅毒血清固定具有十分重要的意義。

目前關(guān)于梅毒血清固定發(fā)病機(jī)制尚不完全明確，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為與細(xì)胞免疫密切相關(guān)，認(rèn)為機(jī)體T淋巴細(xì)胞功能低下在很大程度上直接關(guān)系到梅毒病情發(fā)展及轉(zhuǎn)歸。在梅毒感染早期，TP可引起局部劇烈的炎癥反應(yīng)，接踵而來的是機(jī)體適應(yīng)性免疫應(yīng)答，隨后則是典型的細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答，原發(fā)病灶中以Th1占優(yōu)勢。盡管細(xì)胞免疫介入了梅毒病程中，但仍有部分TP能夠免疫逃避，從而進(jìn)入慢性病程。梅毒患者在某些因素介導(dǎo)下導(dǎo)致細(xì)胞免疫功能減弱，機(jī)體抵抗梅毒螺旋體感染及消除已感染的梅毒螺旋體的能力受到抑制，這也許是梅毒患者出現(xiàn)血清固定的原因之一。國外較多學(xué)者研究表明CD4⁺CD25⁺T細(xì)胞在自身免疫調(diào)節(jié)中起重要作用，且試驗發(fā)現(xiàn)移除或減少CIM⁺CD25⁺T細(xì)胞可以增強機(jī)體的抗感染免疫。而多種病原體（如細(xì)菌、病毒、真菌和胞內(nèi)寄生蟲等）也可持續(xù)誘導(dǎo)CD4⁺CD25⁺T細(xì)胞的產(chǎn)生，即稱為調(diào)節(jié)性T細(xì)胞。一方面Treg能夠通過抑制效應(yīng)性T細(xì)胞的過度反應(yīng)而達(dá)到對機(jī)體的保護(hù)，另一方面，Treg的抑制作用也會被一些病原體利用。Foxp3是Treg的特征性分子標(biāo)記，是其特異性轉(zhuǎn)錄因子：且在非CD4⁺CD25⁺T細(xì)胞表面Foxp3幾乎檢測不到，因此可以認(rèn)為只有Foxp3⁺的CD4⁺CD25⁺T細(xì)胞才是Treg?？梢奆oxp3⁺Treg在慢性感染疾病發(fā)展過程中起參與作用，不僅導(dǎo)致感染不能及時清除和感染性疾病的久治不愈，而且Foxp3⁺Treg對細(xì)胞免疫反應(yīng)過度調(diào)節(jié)促使病原體更容易在宿主體內(nèi)生存，甚至使宿主長期攜帶該致病菌而導(dǎo)致慢性感染。為此筆者將Treg細(xì)胞、Thl7細(xì)胞、Foxp3、CD4⁺CD25⁺T細(xì)胞比例作為本次研究的重要觀察指標(biāo)。

大敗毒膠囊適用于血液不清引發(fā)的梅毒等病癥，主要含有陳皮、黃柏、當(dāng)歸、赤芍、大黃、蜈蚣、全蝎、蒲公英、金銀花、甘草、芒硝、白芷、天花粉等成分，其中陳皮健脾和胃；黃柏清熱燥濕、瀉火解毒；當(dāng)歸和血、止痛：赤芍清熱涼血、活血散瘀：大黃抗感染作用明顯，能有效調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能；蜈蚣與全蝎功效類似，主要為敗毒散結(jié)、息風(fēng)解痙；蒲公英具有清熱解毒、消腫散結(jié)功效；金銀花為清熱解毒良藥，同時具有殺毒、殺菌作用；甘草主要功效為解毒祛痰、補脾益氣：芒硝具有清熱解毒功效；白芷祛風(fēng)解表、除濕消腫，且具有鎮(zhèn)痛、抗炎作用；天花粉清熱瀉火、消腫排膿、生津止渴?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明大敗毒膠囊具有清血敗毒、消腫止痛作用，近年來臨床實踐表明大敗毒膠囊在梅毒治療中有其獨特優(yōu)勢，且聯(lián)合青霉素注射治療效果更佳。筆者在常規(guī)芐星青霉素注射基礎(chǔ)上對我院就診的梅毒血清固定患者加以大敗毒膠囊口服，隨訪12個月其治療總有效率高達(dá)93.33%，明顯比常規(guī)芐星青霉素注射治療的43.33%高（P<0.05），這是因為血清固定后單純通過調(diào)整青霉素劑量或延長療程仍難以達(dá)到血清學(xué)轉(zhuǎn)陰的目的。另外，觀察組末次隨訪時Treg細(xì)胞、Foxp3、CD4⁺CD25⁺T細(xì)胞比例明顯比對照組低，Th17細(xì)胞明顯比對照組高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），提示大敗毒膠囊能明顯改善Treg細(xì)胞/Th17細(xì)胞失衡狀況，降低CD4⁺CD25⁺T細(xì)胞比例，進(jìn)而達(dá)到治療梅毒血清固定的目的，這與Treg細(xì)胞/Th17細(xì)胞失衡、CD4⁺CD25⁺T細(xì)胞表達(dá)增高對免疫抑制是引發(fā)梅毒血清固定的可能機(jī)制之一有關(guān)。

綜上所述，大敗毒膠囊治療梅毒血清固定療效顯著，可能是通過改善外周血Treg細(xì)胞/Thl7細(xì)胞失衡狀況，降低CD4⁺CD25⁺T細(xì)胞比例達(dá)到治療的目的，臨床值得進(jìn)一步研究。

（收稿日期：2015-08-18）endprint