李　欣　徐　雁　劉　俊

準(zhǔn)分子激光聯(lián)合NB-UVB療法對(duì)白癜風(fēng)皮損ET-1的影響

李欣徐雁劉俊

白癜風(fēng)是由于黑素細(xì)胞（MC）毀損或喪失功能所致的皮膚黏膜色素脫失性獲得性疾病［1］，發(fā)病機(jī)制主要有免疫學(xué)說、黑素細(xì)胞自毀學(xué)說、神經(jīng)精神學(xué)說、遺傳學(xué)說等。近些年來，免疫學(xué)說被認(rèn)為是主要發(fā)病機(jī)制的說法已得到了普遍認(rèn)可［2］。目前治療白癜風(fēng)的主要方法有準(zhǔn)分子激光療法和NB-UVB療法，準(zhǔn)分子激光療法從光譜純度和穿透患病處皮膚效果方面來看，其光譜強(qiáng)度強(qiáng)，不良反應(yīng)少，但其費(fèi)用高，適用于治療面積較小的患者；而NB-UVB療法適用于治療大面積的患者，但是治療區(qū)域缺少針對(duì)性，治療周期相對(duì)較長(zhǎng)，累積劑量高，有潛在致癌作用。我院對(duì)臨床上受累面積大于50%的白癜風(fēng)患者嘗試采用準(zhǔn)分子激光與NB-UVB聯(lián)合療法進(jìn)行治療，并觀察其臨床療效、不良反應(yīng)及對(duì)白癜風(fēng)皮損處內(nèi)皮素-1（ET -1）的影響。

1　資料與方法

1.1臨床資料 選擇2013年10月至2014年12月期間來我院白癜風(fēng)門診治療的28例患者。其中男18例，女10例，年齡18～55歲，平均年齡（27.46±8.64）歲；患病時(shí)間為2～6年，平均病程（3.43±1.35）年。同類療法治療研究時(shí)，在同一處白斑部位進(jìn)行兩次表皮片移植的有14例，在相鄰的1～3片白斑表皮片進(jìn)行移植的有14例，白斑間有一定間距相隔的正常表皮，相隔距離約為3～6 cm。

入選標(biāo)準(zhǔn)：白癜風(fēng)患者的白斑受累面積大于50%，且白斑區(qū)處于穩(wěn)定期。在近3個(gè)月內(nèi)，未使用過糖皮質(zhì)激素等外用藥治療；在近3個(gè)月內(nèi)，未進(jìn)行過光療；自愿接受采用不同療法治療，并自愿接受自體表皮移植手術(shù)治療、能夠堅(jiān)持隨訪者；無嚴(yán)重系統(tǒng)性疾?。粺o紫外線過敏史；無明顯瘢痕體質(zhì)。

1.2方法

1.2.1皮膚區(qū)域選擇 根據(jù)白斑的形狀與大小，在白斑區(qū)選取理想受皮區(qū)，在患者白斑處設(shè)定受皮一區(qū)、受皮二區(qū)、受皮三區(qū)和受皮四區(qū)。其中，受皮一區(qū)代表為未照射前的白斑區(qū)域；受皮二、三、四區(qū)分別代表采用準(zhǔn)分子激光療法、NB-UVB和聯(lián)合療法治療白斑的區(qū)域。如果受皮區(qū)在位于同一較大白斑內(nèi)，則選取受皮區(qū)兩塊皮膚，兩塊皮膚之間相距至少3 cm，進(jìn)行分次自體表皮移植。每次做3～15個(gè)孔。用山東神思醫(yī)療設(shè)備公司的BY-II型白癜風(fēng)表皮移植治療儀分離器，采用負(fù)壓吸皰進(jìn)行表皮分離。用無菌注射器在受皮區(qū)及供皮區(qū)各吸取2 mL（含血性皰液）組織液，標(biāo)本編號(hào)后放入微量離心管中，置-75℃冰箱，保存待檢。

1.2.2標(biāo)本標(biāo)記 組織液A：治療照射前受皮一區(qū)的組織液；組織液B：采用準(zhǔn)分子激光療法治療后受皮二區(qū)的組織液；組織液C：采用NB-UVB治療后受皮三區(qū)的組織液；組織液 D：采用準(zhǔn)分子激光與 NBUVB聯(lián)合療法治療后后受皮四區(qū)的組織液。

1.2.3治療方法 分別采用準(zhǔn)分子激光療法、NBUVB、準(zhǔn)分子激光與NB-UVB聯(lián)合療法對(duì)受皮二區(qū)、受皮三區(qū)和受皮四區(qū)白斑部位進(jìn)行照射，根據(jù)Friedmans方法提出，初始治療劑量［3］根據(jù)部位不盡相同，在面部、頭皮、頸部、腋窩部位為350 mJ/cm2，在上肢、下肢、軀干部位為400 mJ/cm2，腰部為450 mJ/cm2，肘部為500 mJ/cm2，膝部為550 mJ/cm2，手足部為600 mJ/cm2。再次照射治療時(shí)，相應(yīng)部位的照射治療劑量大小，根據(jù)原白斑部位出現(xiàn)紅斑的具體情況而定：如果原白斑處反應(yīng)紅斑持續(xù)的時(shí)間小于1天，相應(yīng)部位再治療的劑量，在原劑量的基礎(chǔ)上增加50～100 mJ/ cm2；如果原白斑處反應(yīng)紅斑持續(xù)的時(shí)間在1～2天之間，相應(yīng)部位的再治療劑量與原劑量大小一致；如果原白斑處反應(yīng)紅斑持續(xù)的時(shí)間在2～3天，相應(yīng)部位的再治療劑量在原劑量基礎(chǔ)上降低50～100 mJ/cm2，如果原白斑處反應(yīng)紅斑持續(xù)時(shí)間在3～4天，或者明顯出現(xiàn)水皰并伴有不適灼痛感等癥狀，需等待上述癥狀基本消失方可進(jìn)行第二次治療，下次治療時(shí)，相應(yīng)部位的再治療劑量，在原劑量的基礎(chǔ)上降低50～100 mJ/cm2。治療周期一般為1周2次，具體周期根據(jù)治療情況而定。其中，采用準(zhǔn)分子激光療法治療時(shí)，每次進(jìn)行6個(gè)光斑照射治療，4 cm×2 cm為一個(gè)光斑面積，每次治療總共照射30次；采用NB-UVB治療時(shí)，按照照射總能量設(shè)置；采用準(zhǔn)分子激光與NB-UVB聯(lián)合療法治療是指在采用準(zhǔn)分子激光照射治療后，間隔30 min后，再進(jìn)行NB-UVB治療，同樣采用Friedmans方法，但是對(duì)相應(yīng)部位的劑量，為上述治療時(shí)劑量的1/3。

1.2.4標(biāo)本測(cè)定 采用ELISA方法，在450 nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的光密度（OD值）。以標(biāo)準(zhǔn)品吸光度對(duì)濃度作圖，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作為橫坐標(biāo)，吸光度OD450 nm值作為縱坐標(biāo)。根據(jù)每個(gè)標(biāo)本的吸光度值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上找出其對(duì)應(yīng)的ET-1濃度值。

2　結(jié)果

2.1不同療法對(duì)皮膚組織液ET-1的比較 三種療法治療后，白斑部位皮膚組織液ET-1水平都高于照射治療前的水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。聯(lián)合療法后的白斑部位皮膚組織液ET-1水平高于準(zhǔn)分子激光療法和NB-UVB療法治療后ET-1的水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。說明準(zhǔn)分子激光與NB-UVB聯(lián)合療法治療比準(zhǔn)分子激光療法和NBUVB局部皮損中KC能更多地分泌ET-1。

表1　三種療法治療前后皮膚組織液ET-1水平比較

3　討論

本次研究針對(duì)受累面積大于50%的穩(wěn)定期白癜風(fēng)患者，采用了準(zhǔn)分子激光、NB-UVB及聯(lián)合療法進(jìn)行治療，三種療法治療后白斑部位皮膚組織液ET-1水平與治療前相比都明顯升高，推測(cè)白癜風(fēng)患者白斑部位皮膚組織液內(nèi)的ET-1，來自KC，顯示皮損處KC分泌ET-1的水平明顯升高。相關(guān)結(jié)果與皮肖冰［4］一致，提示照射治療后，均較好達(dá)到治療目的。同時(shí)在實(shí)驗(yàn)中采集標(biāo)本時(shí)，兩次采集皮膚皰液的距離要相差3 cm以上，使得移植后的表皮微循環(huán)最大可能地避免在手術(shù)移植后不受KC的干擾，并且表明準(zhǔn)分子激光與NB-UVB二者聯(lián)合照射治療比單獨(dú)給予準(zhǔn)分子激光或NB-UVB照射治療時(shí)，KC能更快更多地分泌ET-1，更能夠促進(jìn)MC的增殖、移行及黑素的生成，使白斑復(fù)色，縮短治療周期［5］。這可能與準(zhǔn)分子激光的波長(zhǎng)在UVB波長(zhǎng)范圍內(nèi)，準(zhǔn)分子激光與NB-UVB具有相似的生物學(xué)效應(yīng)，而二者聯(lián)合療法照射的劑量比上述單一治療方法的劑量大，也可能是上述兩者生物學(xué)效應(yīng)的疊加或者是促進(jìn)。

［1］Boissy RE，Nordlund JJ.Vitiligo：current medical and scientific understanding［J］.Ital Dermatol Venereol，2011，146 （1）：69-75.

［2］Ando H，Niki Y，Ito M，et al.Melanosome are transferred from melanocytes to keratinocytes through the processes of packaging，release，uptake，and dispersion［J］.J Invest Dermatol，2012，132（4）：1222-1229.

［3］Hong SB，Park HH，Lee MH.Short-term effects of 308nm xenon-chloride exci-mer laser and narrow-band ultraviolet B in the treatment of vitiligo：a comparative study［J］.J Korean Med Sci，2005，20（2）：273-278.

［4］皮肖冰，曾凡欽，王曉霞，等.NB-UVB對(duì)尋常型白癜風(fēng)患者皮膚組織液內(nèi)皮素-1的影響［J］.中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚病學(xué)雜志，2007，6（1）：11-13.

［5］Boissy RE，Picardo M.On the pathophysiology of vitiligo：Possible treatment options［J］.Indian J Dermatol，2012，78 （1）：24-29.

（收稿：2015-06-30 修回：2015-07-09）

大連市皮膚病醫(yī)院，116021

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ˉx±s）表示，采用配對(duì)樣本t檢驗(yàn)比較，分別采用三種療法治療白癜風(fēng)患者白斑部位皮膚組織液ET-1含量的變化，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。