曹栩菡, 黃小軍

(1 四川化工職業(yè)技術(shù)學(xué)院，四川　瀘州　646000；2 國(guó)家酒類及加工食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心，四川　瀘州　646000)

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GC/ECD測(cè)定白酒中的鄰苯二甲酸酯類化合物*

曹栩菡1, 黃小軍2

(1 四川化工職業(yè)技術(shù)學(xué)院，四川瀘州646000；2 國(guó)家酒類及加工食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心，四川瀘州646000)

建立了液液萃取-氣相色譜法測(cè)定白酒樣品中16種鄰苯二甲酸酯的方法。方法表明16種鄰苯二甲酸酯化合物能得到有效分離；在0.4～5 mg·L-1范圍內(nèi)，16種鄰苯二甲酸酯的線性相關(guān)系數(shù)R2均大于0.996；加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)表明，回收率在86.3%～99.0%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差2.4%～7.1%；檢出限低于0.10 mg·kg-1。該方法具有分離度好，較寬的線性范圍，簡(jiǎn)單快速等優(yōu)點(diǎn)，能夠滿足白酒中鄰苯二甲酸酯類化合物的日常檢測(cè)。

鄰苯二甲酸酯類；氣相色譜法；白酒

自2012年11月19日酒鬼酒被曝含鄰苯二甲酸酯超標(biāo)以來，鄰苯二甲酸酯類化合物成為白酒產(chǎn)品質(zhì)量關(guān)注的焦點(diǎn)。鄰苯二甲酸酯(phthalate esters，PAEs)又稱酚酞酸，化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定難降解，大多是無(wú)色透明的油狀液體，低沸點(diǎn)、高揮發(fā)、強(qiáng)吸附性。PAEs主要用作塑料的增塑劑，增大產(chǎn)品的可塑性和提高產(chǎn)品的強(qiáng)度，也可用作農(nóng)藥載體，驅(qū)蟲劑、化妝品、香味品、潤(rùn)滑劑和去泡劑的生產(chǎn)原料。多數(shù)鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)對(duì)人具一定的毒性，且危害多種多樣，比如致癌性、致畸性以及免疫抑制性，其中尤以造成人體生殖功能異常最為引人注目，他們?cè)谌梭w和動(dòng)物體內(nèi)，發(fā)揮著類似雌性激素的作用，干擾內(nèi)分泌，使男子精液量和精子數(shù)量減少，精子運(yùn)動(dòng)能力低下，精子形態(tài)異常等，現(xiàn)已將其歸為環(huán)境雌激素類物[1-3]。

目前，鄰苯二甲酸酯的檢測(cè)有GC法[4-6]和GC-MS法[7-8]。GC-MS具有定性能力強(qiáng)，前處理簡(jiǎn)單，干擾小，靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，是現(xiàn)行國(guó)標(biāo)的主要方法。但是對(duì)于生產(chǎn)企業(yè)在生產(chǎn)過程中的檢測(cè)，GC相對(duì)于GC-MS，具有使用成本低，易于維護(hù)，穩(wěn)定性和重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)。本文采用預(yù)加熱除去白酒中低沸點(diǎn)的醇類和酯類，然后以正己烷提取，GC/ECD 法測(cè)定，建立了液液萃取-氣相色譜法測(cè)定白酒樣品中鄰苯二甲酸酯類的方法。該方法具有分離度好，較寬的線性范圍，簡(jiǎn)單快速等優(yōu)點(diǎn)，能夠滿足白酒中鄰苯二甲酸酯類化合物的日常檢測(cè)。

1　材料與方法

1.1試劑

除特別說明外，本實(shí)驗(yàn)中所用水均為超純水，試劑均為色譜純。

正己烷(HPLC)，成都科龍化工試劑廠；氯化鈉(AR)，成都科龍化工試劑廠；16種鄰苯二甲酸酯混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000 mg·L-1)：鄰苯二甲酸二甲酯(DMP)、鄰苯二甲酸二乙酯(DEP)、鄰苯二甲酸二異丁酯(DIBP)、鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)、鄰苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯(DMEP)、鄰苯二甲酸(4-甲基-2-戊基)酯(BMPP)、鄰苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯(DEEP)、鄰苯二甲酸二戊酯(DPP)、鄰苯二甲酸二己酯(DHXP)、鄰苯二甲酸丁基芐基酯(BBP)、鄰苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯(DBEP)、鄰苯二甲酸二環(huán)己基酯(DCHP)、鄰苯二甲酸(2-乙基)己酯(DEHP)、鄰苯二甲酸二苯酯(DPhP)、鄰苯二甲酸二正辛酯(DNOP)、鄰苯二甲酸二壬酯(DNP)；以上標(biāo)準(zhǔn)均購(gòu)置于上海安譜科學(xué)儀器有限公司。

標(biāo)準(zhǔn)使用液：將標(biāo)準(zhǔn)溶液用正己烷稀釋至0.4，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 mg·L-1的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液備用。

1.2儀器

氣相色譜儀(7890A, 附ECD檢測(cè)器)，Agilent；石英毛細(xì)管柱(HP-5, 30 m×0.32 mm×0.25 μm)，Agilent；分析天平(BS224S型)，賽多利斯科學(xué)儀器公司；恒溫水浴鍋(HH-S型)，金壇市醫(yī)療儀器廠。

1.3實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1樣品前處理

分別采用(A)(B)兩種方法處理試樣：

(A)稱取5 mL酒樣于10 mL比色管中，加入2 mL正己烷和少量氯化鈉，振蕩1 min，靜置分層，取上清液進(jìn)行色譜分析。

(B)稱取5 mL酒樣于10 mL比色管中，置于沸水浴上加熱至1 mL左右，取出冷卻后補(bǔ)水至5 mL，加入2 mL正己烷和少量氯化鈉，振蕩1 min，靜置分層，取上清液進(jìn)行色譜分析。

1.3.2色譜條件

載氣：高純N2(99.999%)；

進(jìn)樣量：1 μL，不分流進(jìn)樣；

進(jìn)樣口溫度：250 ℃；隔墊吹掃流量：3 mL·min-1；吹掃流量：20 mL·min-1，開始等待時(shí)間2 min；

柱流量：1 mL·min-1；

柱箱升溫程序：初始溫度60 ℃，保持1 min，以20 ℃·min-1升溫至220 ℃，保持1 min，再以5 ℃·min-1升溫至280 ℃，保持2 min，全程共計(jì)24 min；

檢測(cè)器溫度：300 ℃；尾吹氣N2，流速：20 mL·min-1。

2　結(jié)果與討論

2.1色譜分離效果

色譜條件參考GB/T 21911-2008方法中的色譜條件，16種鄰苯二甲酸酯得到完全分離(見圖1)，完全滿足檢測(cè)需求。

圖1　鄰苯二甲酸酯混標(biāo)的氣相色譜圖

2.2方法線性、回收率和精密度

配制濃度為0.4～5.0 mg·L-1的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，依次進(jìn)樣測(cè)定，以所測(cè)得的峰面積對(duì)應(yīng)濃度進(jìn)行線性回歸，各組分的回歸方程和相關(guān)系數(shù)見表1。由表1可看出，在0.4～5.0 mg·L-1的較寬濃度范圍內(nèi)，采用GC/ECD 法測(cè)定鄰苯二甲酸酯類化合物，標(biāo)準(zhǔn)曲線線性好，線性相關(guān)系數(shù)R2均大于0.996。按3倍信噪比計(jì)算檢出限，16種鄰苯二甲酸酯的檢出限都低于0.10 mg·kg-1，DBP的檢出限低于0.05 mg·kg-1。

稱取白酒樣品，按0.3 mg·kg-1水平添加，平行做3次。結(jié)果表明，16種鄰苯二甲酸酯平均回收率在86.3%～99.0%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.4%～7.1%。

表1　方法的回收率，精密度和線性相關(guān)系數(shù)(n=3)

2.3樣品測(cè)定結(jié)果

圖2　前處理方法(A)測(cè)得的樣品色譜圖

圖3　前處理方法(B)測(cè)得的樣品色譜圖

樣品分別按前處理方法(A)和(B)進(jìn)行處理，以相同的色譜條件進(jìn)行色譜分析，色譜圖見圖2、圖3。從圖2可以看出色

譜峰數(shù)目眾多，干擾嚴(yán)重，干擾峰主要集中在10 min前。這說明白酒中成分眾多，直接液液萃取較多低沸點(diǎn)的醇和酯進(jìn)入正己烷相，對(duì)鄰苯二甲酸酯的檢測(cè)帶來干擾。圖3表明通過預(yù)先加熱除去酒中低沸點(diǎn)物質(zhì)后，樣品色譜峰的數(shù)量大大減少，分離較好，且回收率與加熱前沒有顯著差異。

3　結(jié)　論

預(yù)先加熱除去白酒中低沸點(diǎn)的醇類和酯類，然后以正己烷提取鄰苯二甲酸酯，GC/ECD 法測(cè)定。在0.02～5 mg·L-1范圍內(nèi)，16種鄰苯二甲酸酯線性良好，R2大于0.996；加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)表明，16種鄰苯二甲酸酯回收率在86.3%～99.0%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差2.4%～7.1%；檢出限低于0.10 mg·kg-1。該方法分離度好，具有較寬的線性范圍，簡(jiǎn)單快速等優(yōu)點(diǎn)，能夠滿足白酒中鄰苯二甲酸酯類化合物的日常檢測(cè)。

[1]劉慧杰,舒為群.鄰苯二甲酸酯類化合物的毒理學(xué)效應(yīng)及對(duì)人群健康的危害[J].第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2004,26(19):1178-1781.

[2]林興桃,王小逸,任仁.環(huán)境內(nèi)分泌干擾物—鄰苯二甲酸酯的研究[J].環(huán)境污染與防治,2003,25(5):286-288.

[3]張?zhí)N暉,陳秉衡,鄭力行,等.環(huán)境樣品中鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)的測(cè)定與分析[J].環(huán)境與健康雜志,2003,20(5):283-286.

[4]王思漢,溫志友,葉曉亮.GC-ECD測(cè)定水體中鄰苯二甲酸酯類化合物[J].環(huán)境科學(xué)技術(shù),1991,4(3):25-29.

[5]吳瑛,王春燕,張?jiān)戒h.超聲萃取-氣相色譜法測(cè)定棉花秸稈中鄰苯二甲酸酯[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào),2011,27(33):53-56.

[6]戚文煒,朱培瑜,吳薇.液液萃取/氣相色譜法測(cè)定環(huán)境水樣中鄰苯二甲酸酯類化合物[J].干旱環(huán)境監(jiān)測(cè),2006,20(4):196-199.

[7]國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.GB/T 21911-2008 食品中鄰苯二甲酸酯的測(cè)定[S].北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社,2008.

[8]國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.GB/T 21928-2008 食品塑料包裝材料中鄰苯二甲酸酯的測(cè)定[S].北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社,2008.

Determination of GC/ECD Phthalic Acid Esters Compounds in Liquor*

CAOXu-han1,HUANGXiao-jun2

(1 Sichuan Vocational College of Chmical Technology, Sichuan Luzhou 646000;2 China National Quality Supervision and Inspection Centre for Alcoholic Beverage Products and Processed Food, Sichuan Luzhou 646000, China)

The method of liquid-liquid extraction gas chromatography to measure phthalic acid esters content in liquor was developed which was effective to enrich sixteen species of phthalic acid ester compounds. At the concentration of 0.4～5 mg·L-1, all the linearity of the measurement were good with the coefficients of more than 0.996, the recovery were founded to be in the range of 86.3%～99.0%, the relative standard differences were 2.4%～7.1%, and the detection limit in test were lower than 0.10 mg·kg-1. The analysis manifests that the method is convenient to operate, rapidly, high resolution and of broad linear range, in routine analysis, can be capable for the determination of phthalic acid ester compounds in liquor.

phthalate esters; gas chromatography; liquor

四川化工職業(yè)技術(shù)學(xué)院2015年度教研科研課題 (No: SCHY15B04)。

曹栩菡(1987-)，女，碩士，助教。

O657.7, O657.63

B

1001-9677(2016)02-0101-03