黃　偉，蘇　穎，邵建英，孫　利，夏明月，李明麗

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·臨床醫(yī)學(xué)·

·論著·

輪狀病毒腸炎嬰幼兒血清細(xì)胞因子與血清25-羥維生素D水平的研究

黃偉，蘇穎，邵建英，孫利，夏明月，李明麗

目的觀察輪狀病毒腸炎(RVE)嬰幼兒血清細(xì)胞因子與血清25-羥維生素D的水平及臨床意義。方法選擇輪狀病毒腸炎68例嬰幼兒作為研究組，同期體檢的56名健康嬰幼兒作為對(duì)照組，分別空腹采集靜脈血，測(cè)定血清細(xì)胞因子及血清25-羥維生素D水平。結(jié)果研究組患兒血清白細(xì)胞介素(IL)-2、IL-6 、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)明顯高于對(duì)照組(P<0.01)，研究組患兒血清25-羥維生素D明顯低于對(duì)照組(P<0.05)。結(jié)論RVE患兒血清IL-2、IL-6 、TNF-α水平升高與血清25-羥維生素D水平降低具有相關(guān)性。

輪狀病毒腸炎；細(xì)胞因子；25-羥維生素D；嬰幼兒

輪狀病毒腸炎(rotavirus enteritis,RVE)為嬰幼兒常見腹瀉病因之一，在發(fā)展中國家住院的嬰幼兒急性腹瀉約80%為輪狀病毒(rotavirus,RV)感染所致[1-2]，常引起脫水和電解質(zhì)紊亂，世界上每年有近100萬兒童死于 RV 感染[3]，目前無特殊治療方法，維生素D主要的生理功能是維持血鈣和磷的正常濃度，近年來發(fā)現(xiàn)它具有重要的抗感染及免疫調(diào)節(jié)作用。筆者通過研究RVE患兒血清細(xì)胞因子與血清25-羥維生素D(25-OH-D)的水平，探討兩者的關(guān)系。

1　對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象將2008年1月至2012年12月來我院住院的68例確診為RVE的嬰幼兒，男38例，女30例，大便呈水樣或蛋花湯樣，每日數(shù)次至數(shù)十次，大便RV抗原呈陽性反應(yīng)，大便常規(guī)鏡檢無異常，大便細(xì)菌培養(yǎng)均為陰性，年齡在4～24個(gè)月，同期健康體檢的嬰幼兒56例作為對(duì)照組，男32例，女24例，2組入選對(duì)象排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)1個(gè)月內(nèi)補(bǔ)充過維生素D；(2)1個(gè)月內(nèi)用過糖皮質(zhì)激素藥物；(3)有嚴(yán)重肝腎疾病。2組在年齡、性別經(jīng)χ2檢驗(yàn)差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2標(biāo)本采集分別于清晨6:00-7:00抽取空腹靜脈血2 ml，分離血清置于-20℃冰箱內(nèi)保存，批量測(cè)定。對(duì)照組標(biāo)本處理方法相同。

1.3血清白細(xì)胞介素-2(IL-2)、白細(xì)胞介素-6(IL-6) 、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平的檢測(cè)采用DSL美國原裝進(jìn)口檢測(cè)試劑盒用ELISA的方法測(cè)定，采用雙抗體夾心法、上?？ㄅ锕旧a(chǎn)的試劑檢測(cè)其血清25-OH-D。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理結(jié)果數(shù)據(jù)采用SPSS 18.00軟件處理，數(shù)據(jù)資料采用t檢驗(yàn)與χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2組血清細(xì)胞因子水平及血清25-羥維生素D水平，見表1。表明研究組患兒血清IL-2、IL-6、TNF-α明顯高于對(duì)照組(P<0.01)，研究組患兒血清25-OH-D明顯低于對(duì)照組(P<0.05)。

表1　2組血清IL-2、IL-6、TNF-α和25-OH-D水平(x±s)

注：IL為白細(xì)胞介素，TNF-α為腫瘤壞死因子-α，25-OH-D為25-羥維生素D

3　討論

RVE常見于秋冬季節(jié)，故又名秋季腹瀉，呈散發(fā)性或小流行，經(jīng)糞-口途徑傳播，也可通過氣溶膠形式經(jīng)呼吸道感染而致病，潛伏期1～3 d，多發(fā)生于6～24個(gè)月嬰幼兒，病初1～2 d常出現(xiàn)嘔吐，隨后出現(xiàn)腹瀉，大便次數(shù)多，為黃色水樣或蛋花湯樣便帶有少量粘液，無腥臭味。有研究表明RVE患兒的血細(xì)胞因子IL-2、IL-6 、TNF-α明顯升高，并且與病情輕重成正相關(guān)性[4]，維生素D與感染的關(guān)系近年來成為臨床感染基礎(chǔ)研究的一個(gè)熱點(diǎn)，維生素D具有明確的抗感染作用，可調(diào)控抑菌肽的表達(dá)，維生素D缺乏可使消化道、呼吸道等黏膜組成的部位感染風(fēng)險(xiǎn)明顯增高[5-6]，國外研究表明維生素D有維持黏膜屏障完整功能，可維持表皮屏障的完整[7-8]。 Murphy等[9]用Caco-2單層細(xì)胞模型發(fā)現(xiàn)維生素D可影響連接黏附分子(junction adhesion molecule，JAM)的表達(dá)，修復(fù)腸黏膜通透性。Fujita等[10]應(yīng)用RNA干擾及過表達(dá)策略，通過活體及離體實(shí)驗(yàn)證實(shí)維生素D使腸黏膜上皮細(xì)胞緊密連接蛋白Claudin-2和Claudin-12表達(dá)上調(diào)，認(rèn)為上皮細(xì)胞存在維生素D依賴性的鈣通道，對(duì)維持腸上皮屏障的功能具有重要作用。本研究RVE患兒的血清細(xì)胞因子水平明顯高于健康兒童水平，維生素D水平明顯低于健康兒童水平，并且研究時(shí)間覆蓋時(shí)間長(zhǎng)，除外了季節(jié)、光照時(shí)間等因素的影響，表明RVE患兒體內(nèi)維生素D缺乏，但因維生素D在體內(nèi)半衰期約為3周左右，RVE患兒住院時(shí)間較短未做補(bǔ)充維生素D治療后的對(duì)比研究，有研究表明維生素D的生物學(xué)作用遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過傳統(tǒng)的范圍，直接抑制IL-2、IFN的合成和分泌，抑制免疫球蛋白的產(chǎn)生[11]，本研究亦提示兩者存在負(fù)相關(guān)性。

[1]杜嗣廉，鄭明新.小兒胃腸病學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1996：72-80.

[2]陳樹寶.兒科學(xué)新理論與新技術(shù)[M].上海:上海科技教育出版社,1997：407-414.

[3]Linhares AC, Bresee JS. Rotavirus vaccines and vaccination in Latin America[J]. Pan American journal of public health, 2000, 8(5):305-331.

[4]李建軍，劉作義. 細(xì)胞因子與嬰幼兒輪狀病毒腸炎的關(guān)系[J]. 實(shí)用兒科臨床雜志, 2003, 18(7):533-534. DOI:10.3969/j.issn.1003-515X.2003.07.017.

[5]Lynch S. Influence of infection/inflammation, thalassemia and nutritional statuson iron absorption[J]. Int J Vitam Nutr Res， 2007， 77: 217-223.

[6]Babb C, van der Merwe L, Beyers N, et al. Vitamin D receptor gene polymorphisms and sputum conversion time in pulmonary tuberculosis patients[J]. Tuberculosis (Edinb), 2007, 87(4):295-302. DOI:10.1016/j.tube.2007.03.001.

[7]Zouboulis CC, Baron JM, B?hm M, et al. Frontiers in sebaceous gland biology and pathology[J]. Exp Dermatol, 2008, 17(6):542-551. DOI:10.1111/j.1600-0625.2008.00725.x.

[8]Michalik L, Wahli W. Peroxisome proliferator-activated receptors (PPARs) in skin health, repair and disease[J]. Biochim Biophys Acta, 2007, 1771(8):991-998. DOI:10.1016/j.bbalip.2007.02.004.

[9]Murphy EF, Jewell C, Hooiveld GJ, et al. Conjugated linoleic acid enhances transepi the lialcal ciumtransportin human intestinal-like Caco-2 cells: an insight into molecular changes[J]. Prostaglandins Leukot Essent Fatty Acids 2006; 74: 295-301.

[10] Fujita H, Sugimoto K, Inatomi S, et al.Tight Junction Proteins Claudin-2 and -12 Are Critical for Vitamin D-dependent Ca2+Absorption between Enterocytes. Mol Biol Cell2008; 19: 1912-1921.

[11] 周文娣，張佩斌. 維生素D受體及維生素D作用進(jìn)展[J]. 中國兒童保健雜志, 2008, 16(5):560-562. DOI:10.3969/j.issn.1008-6579.2008.05.026.

(本文編輯：甘輝亮)

Levels of cytokine and 25-hydroxyvitamin D in the blood of infants with rotavirus enteritis

HuangWei,SuYing,ShaoJianying,SunLi,XiaMingyue,LiMingli

(FirstHospitalofQinhuangdaoCity，Qinhuangdao066000，China)

ObjectiveTo explore levels of cytokine and 25-hydroxyvitamin D in the blood of infants with rotavirus enteritis and their clinical significance.Methods Sixty-eight infants with rotavirus enteritis were recruited as the research group, while 56 healthy infants who underwent normal physical checks were assigned as the control group. Fasting venous blood samples were collected for the detection of cytokine and 25-hydroxyvitamin D levels by RP-HPLC method.ResultsThe levels of IL-2, IL-6, TNF-α in the infants of the research group were significantly higher than those of the infants of the control group (P<0.01). The level of 25-hydroxyvitamin D of the study group was obviously lower than that of the control group (P<0.05).ConclusionThe elevated levels of IL-2, IL-6, TNF-α in the infants with rotavirus enteritis were associated with the decreased level of 25-hydroxyvitamin D.

Rotavirus enteritis; Cytokine; 25-hydroxyvitamin D; Infant

秦皇島市科技計(jì)劃項(xiàng)目(201401A126)

單位]066000河北 秦皇島，秦皇島市第一醫(yī)院

R725.7

A

10.3969/j.issn.1009-0754.2016.04.018

2015-12-20)