俞云貞，鄭彩云

(福清市醫(yī)院，福建福清 350300)

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狹苞橐吾化學(xué)成分研究

俞云貞，鄭彩云

(福清市醫(yī)院，福建福清 350300)

[目的]研究狹苞橐吾Ligulariaintermedia的化學(xué)成分。[方法]采用甲醇提取，經(jīng)硅膠柱層析和重結(jié)晶等方法提取分離活性成分，通過(guò)波譜技術(shù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。[結(jié)果]得到7種化合物，分別為蜂斗菜素(Ⅰ)、8β-hydroxyeremophil-7(11)-ene-12，8α(4β，6α)-diolide(Ⅱ)、蒲公英甾醇(Ⅲ)、 2-acetyl-5，6-dimetboxybenzofuran(Ⅳ)、8β-metboxyeremophil-7(11)-en-6α，15；8α，12-diolide(Ⅴ)、euparone(Ⅵ)、胡蘿卜苷(Ⅶ)。[結(jié)論]化合物Ⅲ～Ⅵ均為首次從該植物中分離得到。

狹苞橐吾；倍半萜；苯并呋喃；三萜

菊科(Compositae)橐吾屬是中藥界熟知的藥用植物，全世界約130種。絕大多數(shù) 種類產(chǎn)自亞洲，我國(guó)有111種，分布于全國(guó)各地，主產(chǎn)于西南山區(qū)，其中河南有 11種。狹苞橐吾(Ligulariaintermedia)是該屬植物中的一種，為多年生草本，生長(zhǎng)于海拔1 500 m以上的山坡林下、水邊及草甸[1-2]。其根及根狀莖名為山紫菀，在民間用于潤(rùn)肺化痰、止咳、平喘[3]。其化學(xué)成分主要有倍半萜類化合物如蜂斗菜素、 異蜂斗菜素，三萜類化合物如羽扇豆醇。研究表明，這幾類化合物具有 豐富而獨(dú)特的藥理活性[4-7]。由于植物種類、生長(zhǎng)地區(qū)不同，化合物成分差異較大[8-9]。為從狹苞橐吾中尋找新的生物活性較好的天然藥物，筆者對(duì)采自河南牛 兒山的狹苞橐吾進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分研究，通過(guò)硅膠柱層析和重結(jié)晶的方法對(duì)化合物進(jìn)行分離，從其甲醇提取物中分離鑒定了7個(gè)化合物。

1　材料與方法

1.1材料狹苞橐吾于2010年6月采自河南省牛兒山，經(jīng)山 東大學(xué)威海分校海洋學(xué)院趙宏副教授鑒定。

1.2儀器Bruker AM-400 核磁共振波譜儀測(cè)定(內(nèi)標(biāo)為T(mén)MS，德國(guó)Bruker 公司)；紫外分析儀(上海康華生化儀器制造有限公司)；色譜用硅膠和薄層色譜 GF 254 硅膠板均為青島海洋化工廠產(chǎn)品。所用試劑均為分析純。

1.3提取方法狹苞橐吾根約 15 kg，陰干粉碎，甲醇冷浸提取 4 次(每次7 d)，合并提取液，減壓蒸餾得浸膏 800 g。所得浸膏經(jīng)硅膠柱色譜，以正己烷-丙酮體系(20∶1、10∶1、5∶1、2∶1)梯度洗脫，分段收集。

2　結(jié)果與分析

2.1分離結(jié)果TLC 檢測(cè)得4個(gè)部分 Fr.1～4。Fr.1(1.89 g)經(jīng)石油醚-丙酮體系梯度洗脫得化合物Ⅲ(12 mg)；Fr.2(55 g)經(jīng)硅膠色譜，以正己烷-乙酸乙酯體系梯度洗脫后，重結(jié)晶得化合物Ⅰ(55 mg)；Fr.3(3.21 g)以石油醚-丙酮體系梯度洗脫，分段收集得到化合物Ⅳ(15 mg)、化合物Ⅶ(23 mg)、化合物Ⅴ(3.0 mg)；Fr.4(1.89 g)以石油醚-丙酮體系經(jīng)硅膠柱層析梯度洗 脫得化合物Ⅱ(6 mg)、重結(jié)晶得化合物Ⅵ(2 mg)。

2.2結(jié)構(gòu)鑒定

2.2.1化合物Ⅰ。無(wú)色透明塊狀晶體，TLC 檢識(shí)，遇 5%硫酸-乙醇溶液加熱顯色 后呈粉紅色；1H NMR(500 MHz，CDCl3)δ：0.98(3H，d，J= 6.8 Hz，H-15)，1.25(3H，s，H-14)，1.52(1H，m，H-1β)1.66(2H，m，H-2)，1.75(3H，s，H-13)，1.89(3H，brs，H-5’)，1.99(3H，d，J=1.5 Hz，H-4’)，2.03(1H，m，H-1α)，2.24(2H，m，H-6)，2.55(1H，m，H-4)，3.13(1H，dd，J=4.6，4.6 Hz，H-7)，4.83(1H，d，J=0.7 Hz，H-12α)，4.96(1H，ddd，J=3.8，4.4，4.4 Hz，H-3)，5.80(1H，d，J=1.8 Hz，H-12β)，5.80(H，s，H-9)，6.09(6H，m，H-3’)；13C NMR(500 MHz，CDCl3)δ：10.5(C-14)，15.8(C-15)，15.76(C-5’)，20.0(C-13)，20.6(C-4’)，30.6(C-2)，31.6(C-1)，40.0(C-5)，41.7(C-6)，47.3 (C-7)，50.3(C-4)，73.0(C-3)，114.4(C-12)，124.6(C-9)，127.9(C-2’)，138.1(C-3’)，143.3(C-11)，166.8(C-10)，167.6(C-1’)，198.5(C-8)。其核磁數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]基本一致，故確定化合物 Ⅰ 為蜂斗菜素(圖1)。

2.2.2化合物Ⅱ。無(wú)色透明針狀晶體，TLC 檢識(shí)，在 254 nm 紫外燈下有強(qiáng)烈熒光，經(jīng) 5%硫酸-乙醇溶液加熱難顯色，于碘瓶中易顯色；1H NMR(500 MHz，CH3COCH3)δ：1.26(3H，s，H-14)，1.43(1H，m，H-2β)1.45(1H，m，H-3α)，1.46(1H，m，H-2α)，1.67(1H，m，H-4)，1.77(1H，m，H-1β)，1.84(3H，d，J=2.1 Hz，H-13)，1.92(1H，m，H-3β)，2.06(1H，m，H-10)，2.17(1H，dd，J=5.2，5.2 Hz，H-9β)，2.25(1H，m，H-1α)，2.65(1H，dd，J=3.2，3.1 Hz，H-9α)，5.13(1H，q，J=5.9 Hz，H-6)；13C NMR(500 MHz，CH3COCH3)δ：9.0(C-13)，20.1(C-1)，20.2(C-14)，21.5(C-2)，25.1(C-3)，36.2(C-10)，37.0(C-9)，40.9(C-4)，45.4(C-5)，83.4(C-6)，104.1(C-8)，127.1(C-11)，153.78(C-7)，171.5(C-12)，176.0(C-15)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]基本一致，故確定化合物Ⅱ?yàn)?β-hydroxyeremophil-7(11)-ene-12，8α(4β，6α)-diolide。其結(jié)構(gòu)經(jīng) DEPT135 進(jìn)一步確認(rèn)(圖1)。

2.2.3化合物Ⅲ。無(wú)色透明塊狀晶體，經(jīng)薄層檢識(shí)，于 254 nm 紫外燈下無(wú)熒光，遇 5%硫酸-乙醇溶液加熱呈紫紅色；1H NMR(500 MHz，CDCl3)δ：0.76(3H，s，H-24)，0.79(3H，s，H- 28)，0.83(3H，s，H- 25)，0.94(3H，s，H- 23)，0.97(3H，s，H- 27)，1.03(1H，s，H- 26)，1.68(3H，s，H-30)，3.19(1H，dd，J=5.0，5.0 Hz，H-3)，4.56(1H，s，H-29b)，4.69(1H，s，H-29a)；13C NMR(500 MHz，CDCl3)δ：14.6(C-27)，15.4(C-24)，16.1(C-25)，16.1(C-26)，18.1(C-6)，18.4(C-28)，19.4(C-11)，21.0(C-29)，25.3(C-21)，27.6(C-12)，28.1(C-15)，29.7(C-2)，30.0(C-23)，34.4(C-7)，35.7(C-17)，37.3(C-10)，38.2(C-16)，38.8(C-1)，38.8(C-4)，40.1(C-22)，41.0(C-13)，42.9(C-19)，43.1(C-8)，48.1(C-14)，48.4(C-18)，50.6(C-9)，55.4(C-5)，79.1(C-3)，109.3(C-30)，151.0(C-20)。譜圖顯示其為三 萜類化合物，經(jīng)解析并與文獻(xiàn)[12]對(duì)照，其波譜數(shù)據(jù)基本一致，故確定化合物Ⅲ為蒲公英甾醇(圖1)。

2.2.4化合物Ⅳ。無(wú)色透明塊狀晶體，TLC檢測(cè)于254 nm紫外燈下有強(qiáng)烈藍(lán)色熒光，遇5%硫酸-乙醇溶液加熱呈黃綠色；1H NMR(500 MHz，CDCl3)δ：2.57(3H，s，H-11)，3.94(3H，s，5-OMe)，3.97(3H，s，6-OMe)，7.06(H，s，H-7)，7.07(1H，s，H-4)，7.43(1H，s，H-3)；13C NMR(500 MHz，CDCl3)δ：26.2(C-11)，56.3(5-OMe)，56.3(6-OMe)，95.1(C-3)，102.8(C-7)，113.8(C-4)，119.1(C-9)，147.8(C-2)，151.5(C-5)，151.7(C-6)，152.4(C-8)，187.6(C-10)。其核磁數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[13]基本一致，故確定化合物Ⅳ為2-acetyl-5，6-dimetboxybenzofuran(圖1)。

2.2.5化合物Ⅴ。無(wú)色透明針狀晶體，薄層層析后，于254 nm紫外燈下有較強(qiáng)熒光，并置于碘瓶中易顯色；1H NMR(500 MHz CDCl)δ：1.28(3H s H-14) 1.45(2H，m，H-2)，1.45(2H，m，H-3)，1.78(1H，dd，J=13.6，13.6 Hz，H-9α)，1.91(2H，m，H-1)，2.01(3H，d，J=2.01 Hz，H-13)，2.20(1H，m，H-10)，2.24(1H，dd，J=12.2，3.3 Hz，H-4)，2.29(1H，dd，J=1.36，5.1 Hz，H-9β)，3.22(3H，s，H-OMe)，4.90(2H，q，J=2.0 Hz，H-6)；13C NMR(500 MHz，CDCl3)δ：9.1(C-13)，19.3(C-1)，20.1(C-14)，20.9(C-2)，24.2(C-3)，34.6(C-9)，35.3(C-10)，40.9(C-4)，44.7(C-5)，77.3(C-8)，82.6(C-6)，129.3(C-11)，151.2(C-7)，170.4(C-12)，174.9(C-15)，50.5(C-16)。分析波譜數(shù)據(jù)，推測(cè)該化合物與化合物Ⅱ?yàn)橥活?。與文獻(xiàn) [14]核磁數(shù)據(jù)對(duì)照表明化合物Ⅴ為8β-metboxyeremophil-7(11)-en-6α，15；8α，12-diolide。其結(jié)構(gòu)經(jīng)DEPT135進(jìn)一步證明(圖1)。

2.2.6化合物Ⅵ。淡黃色粉末，TLC檢測(cè)于254 nm紫外燈下有較強(qiáng)熒光，5%硫酸-乙醇溶液顯色后置于365 nm紫外燈下可見(jiàn)強(qiáng)烈橙色熒光；1H NMR(500 MHz，CDCl3)δ：2.59(3H，s，H-Me)，2.60(1H，s，H-13)，2.73(1H，s，H-11)，7.10(1H，s，H-7)，7.46(1H，s，H-4)，8.17(1H，s，H-3)，12.54(1H，s，H-OH)；13C NMR(500 MHz，CDCl3)δ：26.4(C-13)，26.8(C-11)，100.4(C-7)，113.1(C-3)，118.4(C-5)，119.7(C-9)，126.9(C-4)，153.7(C-2)，160.0(C-6)，163.4(C-8)，187.9(C-12)，204.0(C-10)。其核磁數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[15]對(duì)照基本一致，故確定化合物Ⅵ為euparone(圖1)。

2.2.7化合物Ⅶ。白色粉末，薄層層析遇5%硫酸-乙醇加熱顯色，為粉紅色。與胡蘿卜苷標(biāo)準(zhǔn)品共薄層，Rf值一致，故確定化合物Ⅶ為胡蘿卜苷(圖1)。

圖1　化合物結(jié)構(gòu)示意Fig.1　Structural formulas of the compounds

3　小結(jié)

該研究對(duì)采自河南牛兒山的狹苞橐吾進(jìn)行系統(tǒng)的化學(xué)成分研究，通過(guò)硅膠柱層析和重結(jié)晶的方法對(duì)化合物進(jìn)行分離，從其甲醇提取物中分離鑒定了7個(gè)化合物，分別為蜂斗菜素(Ⅰ)、8β- hydroxyeremophil-7(11)-ene-12，8α(4β，6α)-diolide(Ⅱ)、蒲公英甾醇(Ⅲ)、 2-acetyl-5，6-dimetboxybenzofuran(Ⅳ)、8β-metboxyeremophil-7(11)-en-6α，15；8α，12-diolide(Ⅴ)、euparone(Ⅵ)、胡蘿卜苷(Ⅶ)。其中，化合物Ⅲ～Ⅵ均為首次從該植物中獲得。部分化合物的生物活性還有待進(jìn)一步測(cè)定，以期為該藥材的品質(zhì)鑒定及新藥開(kāi)發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

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Study of Chemical Components ofLigulariaintermedia

YU Yun-zhen, ZHENG Cai-yun

(Fuqing Hospital, Fuqing, Fujian 350300)

[Objective] To study the chemical components ofLigulariaintermedia. [Method] Active components were isolated fromL.intermediaby methanol extraction, silica column chromatography, and recrystallization, and their structures were determined by spectral analysis. [Result] Eight compounds were isolated fromL.intermedia, including petasitin (Ⅰ), 8β-hydroxyeremophil-7(11)-ene-12,8α(4β,6α)-diolide(Ⅱ), taraxasterol (Ⅲ), 2-acetyl-5,6-dimetboxybenzofuran (Ⅳ), 8β-metboxyeremophil-7(11)-en-6α,15;8α,12-diolide (Ⅴ), euparone (Ⅵ), and daucosterol (Ⅶ). [Conclusion] Compounds Ⅲ-Ⅵ were firstly isolated from the plant.

Ligulariaintermedia; Sesquiterpenes; Benzofuran; Triterpenoid

俞云貞(1970- )，女，福建福清人，主管藥師，從事天然藥物化學(xué)研究。

2016-05-18

S 567.23+9

A

0517-6611(2016)19-121-03