謝瑋，楊濤，趙雯霖（.銅仁學院生物與農(nóng)林工程學院，貴州銅仁554300；.華中農(nóng)業(yè)大學食品科學與技術(shù)學院，湖北武漢430070）

黑老虎籽功能成分分析及其應用前景展望

謝瑋1，楊濤1，趙雯霖2
（1.銅仁學院生物與農(nóng)林工程學院，貴州銅仁554300；2.華中農(nóng)業(yè)大學食品科學與技術(shù)學院，湖北武漢430070）

對黑老虎籽的主要功能成分進行分析。研究結(jié)果表明：黑老虎籽中粗多糖的含量為2.68 g/100 g，總黃酮（以蘆丁計）的含量為1.84 g/100 g，總皂苷（以人參皂苷計）的含量為0.21 g/100 g。還含有維生素B1、維生素B2、維生素C、維生素D、維生素E，以及豐富的礦質(zhì)元素，特別是人體必需的微量元素鐵、鋅、硒。黑老虎籽中共含有12種脂肪酸，其中，不飽和脂肪酸含量占脂肪酸總量的87.19%，亞油酸的含量占不飽和脂肪酸的比例高達81.18%。除此之外，黑老虎籽中還包括16種氨基酸，其中7種為人體的必需氨基酸，9種為非必需氨基酸，氨基酸的種類較為齊全。由此可見，黑老虎籽可以開發(fā)具有抗氧化、抗疲勞、延緩衰老、降血脂、降血壓、調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)、提高免疫力等功能的保健食品。

黑老虎籽；功能成分；應用前景

黑老虎Kadsura coccinea（Lem.），別名冷飯團、布福娜，雙子葉植物，南五味子屬（Kadsura Kaempf.ex Juss.）。廣泛分布于貴州、云南、廣西、福建等地[1]。其莖藤俗稱大血藤，是一種重要的藥用植物，特征活性成分為木脂素和三萜類物質(zhì)，具有抗艾滋病病毒、抗腫瘤、抗肝炎、抗氧化、抗血小板聚集和神經(jīng)保護作用[2-5]。黑老虎的果實為聚合漿果，成熟果實呈紫紅色，較大、無毒、可生食，富含多種人體必需的氨基酸和微量元素[6-7]，用超聲微波協(xié)同水蒸氣蒸餾法鑒定出的揮發(fā)油化合物數(shù)目為54種[8]，具有一定的抗氧化性[9]，能夠調(diào)節(jié)血脂[10]，是一種開發(fā)潛力較高的食藥兩用型野生水果。

黑老虎籽為黑老虎果實的成熟種子，約占單粒果質(zhì)量的31.6%。黑老虎籽脂肪酸含量豐富，粗脂肪的含量遠高于同種類型的野生水果[11]，但目前尚未見到有關(guān)黑老虎籽功能性成分及其開發(fā)利用方面的研究。本文通過測定黑老虎籽中粗蛋白、粗脂肪、粗多糖、總黃酮、總皂苷、礦物質(zhì)、維生素、氨基酸和脂肪酸等成分的含量，探究黑老虎籽潛在的功能性營養(yǎng)價值，為其綜合開發(fā)利用提供一定的理論參考。

1　材料與方法

1.1材料

野生黑老虎果實：采自貴州省銅仁市碧江區(qū)瓦屋鄉(xiāng)蘭坪村，采摘后將果實除去雜質(zhì)，取種子部分，將其真空冷凍干燥后磨粉，置于-20℃冰箱避光貯藏，待測。

1.2主要試劑

氫氧化鈉、無水乙醇、硝酸鈉、氯化鋁、硝酸、高氯酸、2，6-二氯靛酚、偏磷酸、草酸、碳酸氫鈉、無水硫酸鈉、乙酸酐、三氯化銻、三氯甲烷、氫氧化鉀、酚酞、辛烷基磺酸鈉、冰醋酸、三乙胺、茚三酮、苯、石油醚、甲醇、正己烷、環(huán)己烷、異丙醇、正丁醇：均為國產(chǎn)分析純；甲醇、乙腈（均為色譜純）：國藥集團化學試劑有限公司。

蘆丁標品、鉀、鈣、鈉、鐵、鋅、硒標準溶液、維生素C標品、維生素B1標品、維生素B2標品、維生素D2標品、視黃醇（純度85%）、α-生育酚（純度95%）、γ-生育酚（純度95%）、δ-生育酚（純度95%）、苯并芘（純度98%）、16種氨基酸標品、人參皂苷標品（質(zhì)量分數(shù)＞98%）：購自Sigma公司。

1.3主要儀器

LC-10A高效液相色譜儀：日本島津；Milli-Q超純水儀：德國默克密理博；JP-100S超聲波清洗器：廣州潔盟；Sorvall ST16R高速冷凍離心機：美國Thermo；LGJ-30F真空冷凍干燥機：北京松原華興；754N紫外可見分光光度計：上海奧普勒；R-210旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：瑞士BUCHI；S433D全自動氨基酸分析儀：德國Sykam；7890A氣相色譜儀：美國Agilent；AAS-900原子吸收光譜儀：美國Perkin Elmer。

1.4方法

1.4.1粗多糖的測定

參考王強等方法[12]。

1.4.2總黃酮的測定

參考張琪等測定方法[13]，以蘆丁為對照品。

1.4.3總皂苷的測定

參考王玲等方法[14]。

1.4.4維生素與礦物質(zhì)的測定

參考歐行奇等方法[15]。

1.4.5氨基酸的組分分析

參考GB/T 5009.124-2003中《食品中氨基酸的測定》。

1.4.6脂肪酸的測定

參考王瑞等方法[16]，略有改動。

1.5數(shù)據(jù)分析

試驗數(shù)據(jù)用Microsoft Excel2013進行分析。

2　結(jié)果與分析

黑老虎籽的主要功能成分含量如表1所示。

表1　黑老虎籽主要功能成分含量列表（以每100克中含量計）Table 1　The major functionalcomponentcontent list of Kadsura coccinea seed（per 100 g）

2.1粗多糖

多糖是生物體內(nèi)重要的大分子物質(zhì)，具有特殊活性，如膳食纖維，果膠是生物體中必不可少的成分。由表1可知，每100克黑老虎籽中粗多糖的含量為2.68 g，均略高于同類漿果中葡萄籽和石榴籽的多糖含量（分別為2.37 mg/100 g和2.66 mg/100 g），說明黑老虎籽具有一定的免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗病毒、降血糖和抗氧化作用[13，17]，但其功能活性還需要進一步的探究。

2.2總黃酮

黃酮類化合物是植物中廣泛存在的一類活性物質(zhì)，具有抗菌殺菌、抗癌防癌、改善心血管功能、降血脂血壓、延緩衰老等功效，每100克黑老虎籽中總黃酮（以蘆丁計）的含量為1.84 g，高于甜石榴籽的總黃酮平均提取量（1.26 mg/100 g）[18]，可以推測黑老虎籽可能也具有一定生理活性功能。

2.3總皂苷

人參皂苷具有調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)，調(diào)節(jié)內(nèi)分泌系統(tǒng)，有些皂苷還有抗癌、抗菌的作用[14]。黑老虎籽的總皂苷（以人參皂苷計）含量僅有0.21 g/100 g，因此其可能具有的功能活性較弱。

2.4維生素與礦物質(zhì)

維生素參與人體的正常新陳代謝，是人體必需的營養(yǎng)要素之一。維生素B1在體內(nèi)主要參與糖和部分氨基酸的代謝；維生素B2在體內(nèi)是直接參與氧化還原反應，在細胞代謝的某些生物化學反應中起控制作用；維生素C在體內(nèi)保護細胞免受氧化損害，能減低血液中膽固醇含量；維生素D在體內(nèi)維持血鈣平衡，促使骨骼、牙齒的礦化；生素E在體內(nèi)保護細胞免受氧化損害，參與酶系的合成[19]。黑老虎籽中脂溶性維生素和水溶性維生素的含量均不高，其中維生素A未檢出，維生素B1、維生素B2、維生素C、維生素D和維生素E的含量分別為0.10、0.12、0.37、0.78、0.86 mg/100 g。

黑老虎籽中含有宏量元素鉀、鈣、鎂，含量分別為562.94、71.54、263.51 mg/100 g，鉀對于維持滲透壓起著重要作用，鈣與骨骼健康密切相關(guān)，鎂對于心臟血管有重要保護作用[20]。除此之外，黑老虎籽中還含有人體必需微量元素鐵、鋅、硒，含量分別為4.26×103、577.10、3.29μg/100 g。鐵是人體內(nèi)含量最高的必需微量元素，它能參與氧的運輸和貯存、細胞色素和多種金屬酶的合成以及增強機體免疫等重要的生理作用；鋅對促進機體生長和智利發(fā)育、維持細胞功能、調(diào)節(jié)機體免疫具有重要作用；硒是人體免疫調(diào)節(jié)素，能激活淋巴細胞和刺激免疫球蛋白及抗體產(chǎn)生，提高人體免疫力和抗衰老，且對于心血管病和癌癥的防治有一定的功效[21]。

2.5脂肪酸

黑老虎籽中共含有12種脂肪酸，其中8種飽和脂肪酸：葵酸、月桂酸、豆蔻酸、棕櫚酸、十七碳酸、硬脂酸、花生酸；4種不飽和脂肪酸：棕櫚油酸、油酸、亞油酸和α-亞麻酸，不飽和脂肪酸的總量為2.13×104mg/100 g，占脂肪酸總量的87.19%，是非常理想的優(yōu)質(zhì)植物脂肪酸，對于防止血清中膽固醇的增加和沉積、軟化血管、防止高血壓和心血管疾病具有重要的作用[22]。

黑老虎籽中還含有α-亞麻酸和亞油酸，這是人體必需的兩種脂肪酸。α-亞麻酸是n-3多不飽和脂肪酸中唯一的必需脂肪，具有調(diào)節(jié)血脂、增強免疫力、預防心腦血管疾病、抑制癌癥的發(fā)生及轉(zhuǎn)移等主要生理功能[23]。亞油酸為人體必需脂肪酸，在體內(nèi)代謝可產(chǎn)生具有重要生理功能的ω-6，具有抗癌、防止動脈粥樣硬化、增強肌體免疫能力以及參與脂肪分解與新陳代謝等作用。黑老虎籽中亞油酸的含量高達1.85×104mg/100 g，占不飽和脂肪酸的比例為81.18%，其相對含量高于葡萄籽、石榴籽，甚至花生、黑芝麻、核桃等食物[24-28]，因此在醫(yī)療健康、保健食品等行業(yè)有廣泛的應用前景。

2.6氨基酸

氨基酸是蛋白質(zhì)的組成單元，對于人體營養(yǎng)和生理健康有重要作用。由表1可知，黑老虎籽一共含有16種氨基酸，包括7種必需氨基酸和9種非必需氨基酸。必需氨基酸總量為3.13×103mg/100 g，占總氨基酸含量的32.5%，分別為賴氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸、蘇氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸。其中，亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸含量較高，分別為751.31、413.76、468.21 mg/100 g，這3種氨基酸能一起合作修復肌肉，控制血糖，并給身體組織提供能量，亮氨酸在參與糖代謝、免疫功能調(diào)節(jié)、蛋白質(zhì)合成和分解等多方面發(fā)揮重要調(diào)控作用。此外，作為谷物蛋白質(zhì)的第一氨限制氨基酸，賴氨酸含量也較高，為598.87 mg/100 g，賴氨酸能促進人體發(fā)育、增強免疫和提高中樞神經(jīng)組織功能[29]。在非必需氨基酸中包括3種功能性氨基酸，第一種是谷氨酸，含量為1.73×103mg/100 g，谷氨酸在生物體內(nèi)的蛋白質(zhì)代謝過程中占重要地位，可通過調(diào)控免疫細胞（如粒細胞及巨噬細胞）代謝參與機體免疫功能；第二種是精氨酸，含量為1.02×103mg/100 g，作為參與機體內(nèi)重要生理代謝調(diào)控的一種半必需氨基酸，精氨酸主要通過自身及其代謝產(chǎn)物參與生理代謝，在提高免疫功能、促進激素分泌、維持大腦及骨骼肌功能等多方面起著重要作用。第三種是脯氨酸，含量為500.87 mg/100 g，能使免疫細胞參與創(chuàng)傷以及直接參與機體膠原蛋白結(jié)構(gòu)功能和神經(jīng)系統(tǒng)功能[30]。

3　結(jié)論與討論

黑老虎籽中含有2.68 g/100 g的粗多糖、1.84 g/100 g總黃酮（以蘆丁計）和0.21 g/100 g總皂苷（以人參皂苷計）。由于粗多糖的含量均高于葡萄籽和石榴籽，因此可將其作為生產(chǎn)粗多糖的原料，提高原料利用率的同時產(chǎn)生優(yōu)質(zhì)活性多糖，還可以開發(fā)具有抗氧化、抗疲勞、降血脂血壓、延緩衰老、提高免疫力等功能的保健食品。

黑老虎籽中有豐富的礦質(zhì)元素，包括宏量元素K、Ca、Mg和微量元素Fe、Zn、Se，其中，Se對于心血管病和癌癥的防治有一定的功效，這是黑老虎籽相對葡萄籽和石榴籽的另一大優(yōu)勢，因此可將其添加到焙烤制品、谷物制品、茶葉中作為富硒食品，提高附加營養(yǎng)價值。由于黑老虎籽中水溶性維生素和脂溶性維生素含量均不高，相對其他水果的優(yōu)勢不明顯，因此其開發(fā)利用價值較小。

每100克黑老虎籽中含有2.44×104mg脂肪酸，其中不飽和脂肪酸占87.19%，包括棕櫚油酸、油酸、亞油酸和α-亞麻酸，可以將黑老虎籽中的不飽和脂肪酸提取純化，將其制成軟膠囊型保健食品，能大大提高這一寶貴資源的附加利用值。由于黑老虎籽中亞油酸的含量占不飽和脂肪酸的81.18%，可以利用化學或生物方法將亞油酸合成共軛亞油酸（Conjugated Linoleic Acid，CLA），作為新型的保健脂肪酸，CLA能預防癌癥、糖尿病和心血管疾病，調(diào)節(jié)免疫促進發(fā)育，對人體有有意的生理功能[31]。

黑老虎籽含有豐富的氨基酸，總含量為9.61× 103mg/100 g，包含7種必需氨基酸，其中谷物蛋白質(zhì)的第一氨限制基酸賴氨酸的含量為5.99 mg/g。此外，還含有3種功能性氨基酸：谷氨酸、精氨酸和脯氨酸，因此，黑老虎籽可作為開發(fā)氨基酸補充劑等保健食品的原料，還可開發(fā)符合國家標準的且保濕效果佳氨基酸潤膚霜[32]，將進一步開拓其在化妝品行業(yè)的市場潛力。

綜上可知，黑老虎籽具有一定的生理活性功能，在保健食品行業(yè)中有廣泛的研究和應用前景，是一種具有發(fā)展前途的新食品資源。因此，深入開展黑老虎籽功能成分及其營養(yǎng)價值的研究，對綜合利用黑老虎資源、促進產(chǎn)業(yè)發(fā)展具有一定意義。

[1]舒永志,成亮,楊培明.黑老虎的化學成分及藥理作用研究進展[J].中草藥,2011,42(4):805-812

[2]Liu H T,Liu J S,Zhang J,et al.Chemical Constituents in Plants of Genus Kadsura Kaempf.ex Juss[J].Chinese HerbalMedicines,2014, 6(3):172-197

[3]黃澤豪.三種南五味子屬藥用植物的化學成分及其生物活性研究[D].上海:復旦大學,2010

[4]Liu J S,Qi Y D,Lai H W,etal.Genus Kadsura,a good source with considerable characteristic chemical constituents and potential bioactivities[J].Phytomedicine,2014,21(8/9):1092-1097

[5]Fang L Z,Xie C F,Wang H,etal.Lignans from the roots of Kadsura coccinea and their inhibitory activities on LPS-induced NO production[J].Phytochemistry Letters,2014,9(1):158-162

[6]毛云玲,付玉嬪,祁榮頻,等.云南黑老虎不同種源氨基酸和其他指標的分析與評價[J].氨基酸和生物資源,2015,37(2):14-19

[7]黃鎖義,龍碧波,文輝忠,等.廣西黑老虎中微量元素測定[J].理化檢驗-化學分冊,2006,42(10):807-808

[8]李昕,聶晶,高正德,等.超聲微波協(xié)同水蒸氣蒸餾-GC-MS分析南、北五味子揮發(fā)油化學成分[J].食品科學,2014,35(8):269-274

[9]Sun J,Yao J Y,Huang S X,et al.Antioxidantactivity of polyphenol and anthocyanin extracts from fruits of Kadsura coccinea(Lem.)A. C.Smith[J].Food Chemistry,2009,117(2):276-281

[10]李志春,孫健,封毅,等.黑老虎果毒理實驗及其對血脂的調(diào)節(jié)作用[J].食品科學,2011,32(1):203-205

[11]卓雄標,林雄平,蘇巧玲.南五味子果實營養(yǎng)成分的研究[J].寧德師范學院學報(自然科學版),2015,27(4):418-420

[12]王強,趙欣.葡萄籽粗多糖的超聲波提取工藝優(yōu)化及抗氧化活性[J].食品科學,2013,34(10):62-66

[13]Al-MataniS K,Al-WahaibiRN,Hossain MA.Totalflavonoids contentand antimicrobialactivity of crude extract from leaves of Ficus sycomorus native to Sultanate of Oman[J].Karbala International Journalof Modern Science,2015,1(3):166-171

[14]邱萍,馮煦,單宇,等.分光光度法測定堿蓬中總黃酮、總皂苷的含量[J].食品研究與開發(fā),2015,46(9):54-56

[15]魯長豪.食品理化檢驗學[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1993:46-71

[16]王瑞,劉海學,馬儷珍,等.幾種食用油中脂肪酸含量的測定與分析[J].食品研究與開發(fā),2011,32(7):106-109

[17]李鳳華.石榴籽多糖的提取分離及降糖飲料的初步開發(fā)[D].濟南:齊魯工業(yè)大學,2015

[18]熱孜萬·吐爾遜.酸、甜石榴皮、籽總黃酮提取工藝研究[D].烏魯木齊:新疆大學,2015

[19]李軍明,張軍.體內(nèi)維生素的生理功能和日常保健的科學合理攝取[J].中國食物與營養(yǎng),2009(3):53-55

[20]張雪紅,謝蘭強,黃淑媛.輻照和充氧處理對六堡茶中礦物質(zhì)含量的影響[J].食品研究與開發(fā),2011,9(32):23-26

[21]Tsuji P A,Canter J A,Rosso L E.Trace Minerals and Trace Elements[J].Encyclopedia of Food and Health,2016:331-338.DOI:10. 1016/B978-0-12-384947-2.00699-1

[22]SanGiovanni JP,Chew EY.The role ofomega-3 long-chain polyunsaturated fatty acids in health and disease of the retina[J].Progress in Retinaland Eye Research,2005,24(1):87-138

[23]李加興,李忠海,劉飛,等.α-亞麻酸的生理功能及其富集純化[J].食品與機械,2009,25(5):172-177

[24]李銀平,薛雪萍,袁春龍,等.葡萄籽成分與營養(yǎng)評價[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2006,12(26):108-113

[25]高忠梅.3種石榴籽的油脂、蛋白質(zhì)及多酚研究[D].楊凌:西北農(nóng)林科技大學,2014

[26]Martín M P,Nepote V,Grosso N R.Chemical,sensory,and microbiological stability of stored raw peanuts packaged in polypropylene ventilated bags and high barrier plastic bags[J].LWT-Food Science and Technology,2016,68:174-182

[27]Botelho JR S,Medeiros N G,Rodrigues A M C,et al.Black sesame (Sesamum indicum L.)seeds extracts by CO2supercritical fluid extraction:Isotherms of global yield,kinetics data,total fatty acids, phytosterols and neuroprotective effects[J].The Journalof SupercriticalFluids,2014,93:49-55

[28]趙書崗,趙悅平,王紅霞,等.核桃油脂理化特性與脂肪酸成分的研究[J].中國糧油學報,2008,23(2):85-88

[29]Wu G Y.Amino acids:metabolisim,functions,and nutrition[J]. Amino Acids,2009,37(1):1-17

[30]王蜀金,陳惠娜,方思敏,等.功能性氨基酸在動物機體內(nèi)的代謝利用與生理功能[J].家畜生態(tài)學報,2014,35(8):6-12

[31]劉佩,沈生榮,阮暉,等.共軛亞油酸的生理學功能及健康意義[J].中國糧油學報,2009,24(6):161-165

[32]朱玉婷.鹿藥游離氨基酸的提取及在化妝品中的應用[D].長春:吉林農(nóng)業(yè)大學,2014

The Functional Components Analysis and Application Prospect of Kadsura coccinea Seed

XIE Wei1，YANG Tao1，ZHAO Wen-lin2
（1.College of Biologicaland Agricultural Engineering，Tongren University，Tongren 554300，Guizhou，China；2.Institute of Food Science and Technology，Huazhong Agricultural University，Wuhan 430070，Hubei，China）

The main functional components of Kadsura.coccinea seeds were analyzed.The results showed that the content of crude polysaccharide was 2.68 g/100 g，the content of total flavonoids（rutin）was 1.84 g/100 g and the total saponins（ginsenosides）content was 0.21 g/100 g.Itcontained vitamin B1vitamin B2，vitamin C，vitamin D，vitamin E as well as the abundant mineral elements，especially the essential trace elements，such as Fe，Zn，Se.K.coccinea seeds had 12 kinds of fatty acids，in which contained 87.19% unsaturated fatty acids. Itwas worth mentioning that linoleic acid contentac counted for the proportion of unsaturated fatty acids as high as 81.18%.In addition，the resultshowed that16 amino acids were found in K.coccinea seeds，including 7 essential amino acids and 9 nonessential amino acids，the kinds of amino acids was relatively complete.It could be derived that K.coccinea seeds coud develop functional food which had the effect of antioxidant，antifatigue，antiaging，antilipidemic，antihypertensive，regulating central nervous system or improving immunity.

Kadsura coccinea seed；functional components；application prospect

10.3969/j.issn.1005-6521.2016.12.001

貴州省教育廳重點學科項目（黔學位合字ZDXK[2013]09號）；貴州省教育廳重點實驗室項目[黔教合KY字（2011）005]

謝瑋（1990—），女（漢），講師，碩士，主要從事天然產(chǎn)物方向研究。

2016-03-01