王曉川，韓水仲，趙文慶，孫良起，蔣歡歡，鄭國寶

多腫瘤標志物蛋白芯片在肺癌診療中的應用價值

王曉川1，韓水仲2，趙文慶3，孫良起1，蔣歡歡1，鄭國寶1

目的 探討多腫瘤標志物蛋白芯片在肺癌診療中的應用價值。方法 采用多腫瘤標志物蛋白芯片檢測肺癌患者157例、良性肺病177例、健康體檢者41例血清中的12種腫瘤標志物(CA125、CA19-9、Ferritin、CA153、CA242、CEA、AFP、NSE、PSA、f-PSA、HGH、β-HCG)。結果 肺癌組腫瘤標記物陽性率為92.36%，良性肺病組為76.83%，健康對照組為7.32%，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。肺癌組血清中腫瘤標記物CEA、CA242陽性率與良性肺病組、健康對照組比較，差異均有統(tǒng)計學意義(均P<0.05)，而β-HCG、AFP、f-PSA、PSA、HGH等差異無統(tǒng)計學意義(均P>0.05)。肺癌組血清中腫瘤標記物CA19-9、NSE、CEA、CA242、CA125、CA153水平顯著高于肺良性病變組和健康對照組(均P<0.05)，而β-HCG、f-PSA、PSA、HGH等差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。結論 多腫瘤標志物蛋白芯片僅可用于肺癌的早期輔助診斷，并不能作為肺癌的確診指標。

肺癌；腫瘤標志物；多腫瘤標志物蛋白芯片

肺癌是嚴重威脅人類健康的高發(fā)病率、高死亡率疾病之一。在世界范圍內，每年新增180萬肺癌病例，占癌癥總數的13%[1]。在中國，肺癌排名惡性腫瘤死因的第一位[2]。由于大多數肺癌早期并不呈現典型癥狀，因此70%的肺癌患者在確診時已經是局部或遠處轉移(Ⅲb/IV期)，失去了最佳的手術或治療時機，致使肺癌患者5 a生存率低于15%。如果在肺癌早期進行診斷和治療，可顯著改善肺癌的預后，并降低其死亡率。目前，對肺癌的早期診斷方法主要包括胸透、CT掃描等，但上述方法無法全面鑒別肺部良性的“結節(jié)”病變與惡性腫瘤，而且檢測取樣時對患者可能造成損害[3]。多腫瘤標志物蛋白質芯片是一種高通量、高靈敏度、高特異性和微型化的蛋白質分析工具，可用于對腫瘤進行高通量的早期篩查、輔助診斷及療效觀察等。本研究利用12種腫瘤標志物蛋白質芯片技術探討腫瘤標志物聯合檢測對肺癌診斷的意義，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料 2012年1月至2016年5月，在中國人民解放軍第150中心醫(yī)院經細胞學或組織學診斷為肺癌的患者157例，男105例，女52例，年齡(64.30±11.06)歲；良性肺病(包括慢性阻塞型肺炎、肺炎、肺結核)177例，男136例，女41例，年齡(61.82±16.91)歲；健康體檢者41例，男26例，女15例，年齡(60.12±17.59)歲。

1.2 檢測方法 所有患者或健康體檢者均清晨空腹采靜脈血，2 000 r·min-1離心5 min，收集上清進行檢測，如不能當天檢測，可于2～8 ℃保存。受檢者血清中的腫瘤標志物使用多腫瘤標志物定量檢測試劑盒(蛋白芯片—化學發(fā)光法，湖州數康生物科技有限公司，浙江)進行檢測，檢測時嚴格按照產品說明書進行，檢測結果采用HD-2001A/LU-07生物芯片檢測儀進行分析。參考試劑盒說明書，12種腫瘤標志物的臨界值為：癌抗原125(cancer antigen 125,CA125)<35 U·mL-1，糖鏈抗原19-9(carbohydrate antigen 19-9,CA19-9)<35 U·mL-1，鐵蛋白Ferritin(女性<219 ng·mL-1，男性<322 ng·mL-1)，癌抗原153(cancer antigen 153, CA153)<35 U·mL-1，糖鏈抗原242(carbohydrate antigen 242, CA242)<20 U·mL-1，癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)<5 ng·mL-1，甲胎蛋白(alpha-fetoprotein，AFP)<20 ng·mL-1，神經元烯醇化酶(neuron-specific enolase, NSE)<13 ng·mL-1，前列腺特異性抗原(prostate specific antigen, PSA)<5 ng·mL-1，游離前列腺特異性抗原(free prostate specific antigen, f-PSA)<1 ng·mL-1，生長激素(human growth hormone,HGH)<7.5 ng·mL-1，絨毛膜促性腺激素β亞基(β-human chorionic gonadotrophin, β-HCG)<3 mIU·mL-1。對患者或健康體檢者進行檢測時，當12種腫瘤標志物一種或一種以上為陽性，則認為其為陽性，當12種腫瘤標志物均陰性，則認為其為陰性。敏感性=肺癌組陽性例數/肺癌組總例數；特異性=(肺良性病變組中陰性例數+健康體檢組陰性例數)/(肺良性病變組總例數+健康體檢組總例數)；陽性預測值=肺癌組陽性例數/陽性檢測樣本總例數；陰性預測值=(健康體檢組陰性例數+肺良性病變組中陰性例數)/陰性檢測樣本總例數。

2 結果

2.1 各組腫瘤標記物蛋白芯片陽性率的比較 經檢測，肺癌組145例陽性，陽性率為92.36%，良性肺病組136例陽性，陽性率76.83%，健康對照組3例陽性，陽性率7.32%。肺癌組陽性率顯著高于良性肺病組(χ2=15.012，P<0.01)和健康對照組(χ2=124.555，P<0.01)，見表1。肺癌組血清CEA、CA242水平與良性肺病組、健康對照組比較，差異均有統(tǒng)計學意義(均P<0.05)。良性肺病組CEA、CA242、CA125與健康對照組比較，差異均有統(tǒng)計學意義(均P<0.05)，見表1。血清中的12種腫瘤標志物對肺癌診斷的敏感性最高為CA125(69.43%)，特異性最高為HGH(99.54%)，見表2。

表1 3組中12種腫瘤標志物陽性率比較 %

注：①肺癌組與良性肺病組相比:P<0.05；②肺癌組與健康對照組相比:P<0.05。

表2 腫瘤標志物對肺癌診斷的敏感性和特異性 %

2.2 3組單項腫瘤標志物的比較 肺癌組血清中CA19-9、NSE、CEA、CA242、AFP、CA125、CA153水平顯著高于良性肺病組和健康對照組，差異有統(tǒng)計學意義(均P<0.05)，而β-HCG、f-PSA、PSA、HGH差異無統(tǒng)計學意義(均P>0.05)。良性肺病組NSE、CEA、CA242、Ferritin、CA125顯著高于健康對照組，差異有統(tǒng)計學意義(均P<0.05)，見表3。

表3 各組12中血清腫瘤標志物水平比較±s)

注：①肺癌組與良性肺病組相比:P<0.05；②良性肺病組與健康對照組相比:P<0.05；③肺癌組與健康對照組相比:P<0.05。

3 討論

近年來，肺癌發(fā)病率已上升至人類惡性腫瘤的首位，由于其預后較差，嚴重威脅人類生命健康。早期診斷和治療肺癌能極大提高患者的生存率和生存時間。本研究采用蛋白芯片檢測系統(tǒng)檢測肺癌患者血清中12種腫瘤標志物，結果肺癌組陽性率為92.36%，顯著高于良性肺病組和健康對照組。

本研究中肺癌組CEA(59.24%)的陽性率顯著高于良性肺病組(29.94%)和健康對照組(2.44%)，與文獻報道基本相符[4-5]。CEA是一種細胞表面相關糖蛋白，通常在早期胎兒的胃腸道、肝、胰及成人胃腸道等產生[6]。血清中CEA的水平與癌細胞的數量有關，有報道稱血清中CEA水平可較好評價肺癌治療效果[7-8]。

CA242是一種糖鏈類黏蛋白，其在健康人際良性疾病患者血清中含量很低，但在腺癌的表達較高，特別是在胰腺癌的診斷及直腸癌的預后方面有較高的臨床價值[9-11]。研究報道CA242在肺癌中升高，而且在不同時期的肺癌中及治療前后其差異有統(tǒng)計學意義[12]。因此，CA242對肺癌的早期診斷及臨床預后判定具有參考價值。本研究中，CA242的敏感性為22.93%，特異性為92.66%，說明單獨CA242檢測對肺癌的診斷價值較低。而有報道CA242聯合其它腫瘤標志物的檢測具有重要價值，如CA242/CA19-9聯合檢測，在胰腺癌患者中100%升高，CA242/CEA在肺癌患者中80.61%升高[13]。本研究中，肺癌組中CEA、CA242血清水平均顯著高于肺良性病變組和健康對照組。兩者聯合檢測，對肺癌的敏感性為62.42%，特異性為71.60%，說明CA242聯合CEA檢測對肺癌具有較高的診斷價值。

CA125是卵巢癌患者卵巢上皮細胞分泌的一種糖蛋白，而正常卵巢細胞不分泌[14]。有報道在肺癌患者中，CA125的陽性率為44.87%[15]。本研究中，CA125在肺癌患者中的陽性率為69.43%，在肺良性病變組的陽性率為66.67%，兩者差異不顯著，但均高于健康對照2.44%，說明CA125不是肺癌特異性標志物，但可用于肺部損傷的檢測。CEA、CA242、CA125這3種腫瘤標志物聯合檢測，敏感性為89.17%，但特異性僅為67.43%。

因此，多腫瘤標志物蛋白芯片僅可用于肺癌的早期診斷，不能作為肺癌的確診指標，CEA與CA242的聯合檢測對肺癌的早期診斷意義較大。

[1] Siegel RL,Miller KD, Jemal A.Cancer statistics,2015[J].CA Cancer J Clin,2015,65(1):5-29.

[2]Zhang WL,Wang Y,Han CZ.Characteristic trend analysis of cancer patients hospitalized in Shanxi tumor hospital for the first time during 2001 and 2010[J].Asian Pac J Cancer Prev,2015,16(9):3673-3676.

[3]Xie X,Zhao Y,Snijder RA,et al.Sensitivity and accuracy of volumetry of pulmonary nodules on low-dose 16-and 64-row multi-detector CT:an anthropomorphic phantom study[J].Eur Radiol,2013,23(1):139-147.

[4]潘秀軍,王連升,沈霞.多腫瘤標志物蛋白芯片在肺癌診斷中的應用[J].上海第二醫(yī)科大學學報,2005,25(8):839-841.

[5]鄭玲,伍建蓉,楊紅,等.肺癌患者血清中12種腫瘤標志物的表達[J].腫瘤,2009,29(8):786-789.

[6]Grunnet M, Sorensen JB.Carcinoembryonic antigen (CEA) as tumor marker in lung cancer[J].Lung Cancer,2012,76(2):138-143.

[7]Tomita M,Shimizu T,Ayabe T,et al.Prognostic significance oftumour marker index based on preoperative CEA and CYFRA21-1 in NSCLC[J].Anticancer Res,2010,30(7):3099-3102.

[8]Matsuoka K,Sumitomo S,Nakashima N,et al.Prognostic value of carcinoembryonic antigen and CYFRA21-1 in patients with pathological stage I non-small cell lung cancer[J].Eur J Cardiothorac Surg,2007,32(3):435-439.

[9]Chen Y,Gao SG,Chen JM,et al.Serum CA242,CA19-9,CA125,CEA,and TSGF are biomarkers for the efficacy and prognosis of cryoablation in pancreatic cancer patients[J].Cell Biochem Biophys,2015,71(3):1287-1291.

[10]Li X,Guo X,Li H,et al.Serum carbohydrate antigen 242 expression exerts crucial function in the diagnosis of pancreatic cancer[J].Tumour Biol,2014,35(6):5281-5286.

[11]Yang XQ,Chen C,Hou JX,et al.Preoperative serum carbohydrate antigen 242 is a useful predictive and prognostic marker in colorectal cancer[J].Hepatogastroenterology,2011,58(106): 377-382.

[12]劉天舟,張琳,王慶芳.非小細胞肺癌患者血清CA153、CA242及CYFRA21-1水平測定[J].鄭州大學學報(醫(yī)學版),2012,47(1):113-115.

[13]許明芳,單錦露,仲召陽,等.多腫瘤標志物蛋白芯片檢測CA242在惡性腫瘤診斷中的價值[J].中國現代醫(yī)學雜志,2012,22(3):41-46.

[14]Wei S,Li H,Zhang B.The diagnostic value of serum HE4 and CA-125 and ROMA index in ovarian cancer[J].Biomed Rep,2016,5(1):41-44.

[15]Ma L,Xie XW,Wang HY,et al.Clinical evaluation of tumor markers for diagnosis in patients with non-small cell lung cancer in China[J].Asian Pac J Cancer Prev,2015,16(12):4891-4894.

Value of Multi-tumor Markers Protein Biochip in the Diagnosis of Lung Cancer

WANG Xiao-chuan1, HAN Shui-zhong2, ZHAO Wen-qing3, SUN Liang-qi1, JIANG Huan-huan1, ZHENG Guo-bao1

(1.Department of Clinical Laboratory,No. 150 Central Hospital of People′s Liberation Army,Luoyang 471031,China；2.Pulike Biological Engineering,Inc,Luoyang 471031,China；3.Luoyang First Hospital of Traditional Chinese Medicine,Luoyang 471031,China)

ObjectiveTo evaluate the clinical value of multi-tumor markers protein biochip in the diagnosis of lung cancer.MethodsSerum CA125, CA19-9, Ferritin, CA15-3, CA242, CEA, AFP, NSE, PSA, f-PSA, HGH, β-HCG were detected by multi-tumor markers protein biochip in 157 patients with lung cancer, 177 patients with benign lung disease, and 41 healthy people in control group.ResultsThe positive rate of 12 tumor markers(92.36%) in lung cancer was significant higher than that in benign lung disease (76.83%) and healthy people (7.32%)(allP<0.01). The positive rate of CEA and CA242 in lung cancer showed significant differences compared with benign lung disease and healthy people (allP<0.05), but no significant differences in β-HCG, AFP, f-PSA, PSA, HGH. Serum levels of CA19-9, NSE, CEA, CA242, CA125, CA153 were significant higher in lung cancer than that in benign lung disease and healthy people (allP<0.05), but no significant differences in β-HCG, f-PSA, PSA, HGH (allP>0.05).ConclusionMulti-tumor markers biochip might contribute to the early diagnosis for lung cancer, but not to be a definite diagnosis biomarker.

lung cancer；tumor markers；multi-tumor markers protein biochip

1672-688X(2016)04-0265-04

10.15926/j.cnki.issn1672-688x.2016.04.008

2016-07-04

1.中國人民解放軍第150中心醫(yī)院，河南洛陽 471031 2.普萊柯生物工程股份有限公司，河南洛陽 471031 3.洛陽市第一中醫(yī)院，河南洛陽 471031

王曉川(1985-)，男，河南洛陽人，主管技師，從事臨床檢驗工作。

鄭國寶，男，主任醫(yī)師，E-mail：zhengguobao123@126.com

R734.2

B