陳桂遠(yuǎn)

（廣西清川仁源藥業(yè)有限公司 廣西南寧 530007）

關(guān)于薄層色譜鑒別丹參五味子片的效果

陳桂遠(yuǎn)

（廣西清川仁源藥業(yè)有限公司 廣西南寧 530007）

目的：研究薄層色譜鑒別丹參五味子片的效果，進(jìn)而將制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)有效提高。方法：采用薄層色譜法對(duì)丹參五味子片中含有的五味子和丹參進(jìn)行鑒別，研究其鑒別效果。結(jié)果：在五味子與丹參酮ⅡA供試品色譜中，和對(duì)照品色譜互相對(duì)應(yīng)位置上出現(xiàn)了顏色相同的半點(diǎn)，并且陰性對(duì)照沒(méi)有受到干擾。結(jié)論：薄層色譜鑒別丹參五味子片的效果顯著，并且具有快速、簡(jiǎn)單、良好重現(xiàn)性等諸多優(yōu)點(diǎn)，可以將其用在丹參五味子片的質(zhì)量控制。

薄層色譜；鑒別；丹參五味子片；效果

前言

臨床上，丹參五味子片主要被用來(lái)治療慢性肝炎、神經(jīng)衰弱、冠心病等疾病，田七、刺五加、甘草、五味子、丹參扥中藥材為該制劑的主要組成部分。該制劑在臨床上具有開(kāi)竅理氣、祛邪扶正、化瘀活血等諸多功效。丹參五味子片中的丹參中含有丹酚酸B、丹參素、丹參酮ⅡA、ⅡB、丹參酮Ⅰ等成分，它們?yōu)樗苄曰蛘咧苄远苹衔锘蛘叻铀犷愋偷幕衔?。在丹參所包含的所有成分中，丹參酮ⅡA屬于一種能夠?qū)?xì)胞內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化物以及核糖核酸之間的相互作用進(jìn)行有效抑制的因子。其次，五味子也屬于丹參五味子片一個(gè)重要組成部分，脂肪油、揮發(fā)油、有機(jī)酸、多糖以及木脂素等均屬于五味子的重要組成部分。研究顯示，五味子能夠?qū)C(jī)體中樞進(jìn)行有效抑制，具有較廣的作用范圍，能夠用發(fā)揮出與鎮(zhèn)靜安定相類似的效果。丹參五味子片中最重要的成分為五味子與丹參酮ⅡA，采用一種科學(xué)合理的方法對(duì)丹參五味子片中含有的五味子和丹參進(jìn)行鑒別，不僅能夠有效控制丹參五味子片的藥物質(zhì)量，而且能夠有效控制與監(jiān)督藥物臨床使用的安全性與有效性。本研究主要采用的是薄層色譜法對(duì)丹參五味子片進(jìn)行鑒別，將五味子甲素與丹參酮ⅡA進(jìn)行對(duì)照，以此來(lái)鑒別制劑中的五味子與丹參，通過(guò)研究分析獲得了一些體會(huì)，現(xiàn)將其總結(jié)如下：

1 儀器與方法

1.1 儀器

儀器：由杭州子新華紙業(yè)有限公司提供的定性濾紙；由青島譜科分離材料有限公司提供的硅膠GF254薄層板、硅膠G板；由廣州市藥品檢驗(yàn)所提供的5μl與2μl定量毛細(xì)管；由上海市實(shí)驗(yàn)儀器總廠提供的理化干燥箱；由寧波自動(dòng)化儀表廠提供的電熱恒溫水浴鍋；由上海市安亭電子儀器廠提供的三用紫外儀；由廣州經(jīng)濟(jì)開(kāi)發(fā)區(qū)明珠電器有限公司提供的超聲波清洗器，其功率為150W；來(lái)自瑞士的電子分析天平。

1.2 藥物

藥物：甲酸乙酯、石油醚（溫度在30～60℃之間）、甲苯、乙酸乙酯、三氯甲烷、五味子甲素、丹參酮ⅡA、純凈水。

2 方法與結(jié)果

2.1 五味子薄層色譜鑒別方法與結(jié)果

丹參五味子片溶液的制備方法：選取10片丹參五味子片，將其研細(xì)，然后加入20mL三氯甲烷，采用超聲對(duì)其進(jìn)行30min的提取，將其過(guò)濾，蒸干濾液，將2mL三氯甲烷加入到殘?jiān)羞M(jìn)行溶解，將其作為供試品溶液。

五味子甲素對(duì)照品溶液制備方法：對(duì)五味子甲素對(duì)照品進(jìn)行稱取，在其中加入三氯甲烷進(jìn)行溶解，將其配制成為每1mL五味子甲素對(duì)照品溶液含1mg五味子甲素的溶液，并且將其當(dāng)作對(duì)照品溶液。

五味子陰性對(duì)照品溶液制備方法：以處方工藝為依據(jù)，對(duì)缺五味子陰性對(duì)照品溶液進(jìn)行制備，以薄層鑒別方法中的供試品溶液制備方法為標(biāo)準(zhǔn)，制備出陰性對(duì)照溶液。

薄層鑒別方法：以《中國(guó)藥典》中薄層色譜試驗(yàn)為依據(jù)，吸取5μl供試品溶液與2μl對(duì)照品溶液，將其分別點(diǎn)在相同的一塊硅膠GF254薄層板上，展開(kāi)劑為甲酸（15：5：1）-甲酸乙酯-石油醚（溫度為30～60℃）的上層溶液，按照展開(kāi)→取出→晾干→置紫外燈下的步驟，對(duì)其進(jìn)行檢視。

結(jié)果：在供試品色譜中，和對(duì)照品色譜互相對(duì)應(yīng)位置上出現(xiàn)了顏色相同的半點(diǎn)，并且陰性對(duì)照沒(méi)有受到干擾。具體色譜圖見(jiàn)圖1。

圖1 五味子薄層色譜鑒別圖譜

2.2 丹參薄層色譜鑒別方法與結(jié)果

丹參五味子片溶液的制備方法：選取10片丹參五味子片，將其研細(xì)，然后加入20mL三氯甲烷，采用超聲對(duì)其進(jìn)行30min的提取，將其過(guò)濾，蒸干濾液，將2mL三氯甲烷加入到殘?jiān)羞M(jìn)行溶解，將其作為供試品溶液。

丹參酮ⅡA對(duì)照品溶液制備方法：對(duì)丹參酮ⅡA對(duì)照品進(jìn)行稱取，在其中加入子酸乙酯進(jìn)行溶解，將其配制成為每1mL丹參酮ⅡA對(duì)照品溶液中含1mg丹參酮ⅡA的溶液，并且將其當(dāng)作對(duì)照品溶液。

缺丹參陰性對(duì)照品溶液制備方法：以處方工藝為依據(jù)，對(duì)丹參陰性對(duì)照品溶液進(jìn)行制備，以薄層鑒別方法中的供試品溶液制備方法為標(biāo)準(zhǔn)，制備出陰性對(duì)照溶液。

薄層鑒別方法：以《中國(guó)藥典》中薄層色譜試驗(yàn)為依據(jù)，吸取5μl供試品溶液，將其分別點(diǎn)在相同的一塊硅膠GF254薄層板上，展開(kāi)劑為甲甲苯—乙酸乙酯（19：1），在展開(kāi)缸上放置薄層板，并將其展開(kāi)，然后取出，再晾干。

結(jié)果：在供試品色譜中，和對(duì)照品色譜互相對(duì)應(yīng)位置上出現(xiàn)了顏色相同的半點(diǎn)，并且陰性對(duì)照沒(méi)有受到干擾。具體色譜圖見(jiàn)圖2。

3 討論

薄層色譜法是把涂布在支持板上的支持物當(dāng)成固定相，并且采用恰當(dāng)?shù)娜軇┳鳛榱鲃?dòng)相，進(jìn)而分離、鑒定與定量混合樣品，它屬于一種層析分離技術(shù)[1]。這種方式能夠以加快的速度對(duì)生物堿、核苷酸、氨基酸、類固醇以及脂肪酸等多種物質(zhì)進(jìn)行層析。薄層色譜法屬于一種吸附薄層色譜分離方法，它對(duì)各個(gè)成分對(duì)相同吸附劑具有不同吸附能力這一特點(diǎn)進(jìn)行充分利用，進(jìn)而使得流動(dòng)相溶液在流過(guò)吸附劑的過(guò)程中，會(huì)出現(xiàn)連續(xù)性的吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的現(xiàn)象，通過(guò)這樣方式能夠促使各個(gè)成份之間進(jìn)行相互分離[2]。以薄層層析固定相不同支持物為依據(jù)，可以分為薄層凝膠層析、薄層離子交換層析、薄層分配層析以及薄層吸附層析等。通常情況下，薄層吸附層析使用的頻率最高。物體表面一個(gè)十分重要的性質(zhì)便為吸附，不同相之間均可以有表面形成，吸附指的是一個(gè)相中的物質(zhì)在表面表現(xiàn)出密集的現(xiàn)象。在氣體與吸附液體、液體與固體、氣體與固體之間的表面上均可能有吸附現(xiàn)象的出現(xiàn)。固體表面之所以能夠停留物質(zhì)分子，就是因?yàn)楣腆w內(nèi)部分子以及固體表面分子的吸引力存在差異性，固體內(nèi)部分子之間有著對(duì)稱的相互作用，所以通常會(huì)抵消力場(chǎng)。但是固體表面分子所受的力具有不對(duì)稱性，如表面層力的作用小，向內(nèi)一面的作用力大，進(jìn)而會(huì)促使溶質(zhì)分子或者氣體在進(jìn)行運(yùn)動(dòng)的過(guò)程中，在與固體表面相遇時(shí)，因?yàn)槭艿搅耸Ｓ嗔τ绊?，所以便?huì)停留下來(lái)。

圖2 五味子薄層色譜鑒別圖譜

本研究主要是在參考藥典的基礎(chǔ)上，將石油醚當(dāng)成提取溶劑，對(duì)其超聲之后10min、20min、以及30min所獲得的結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析，研究結(jié)果顯示，采用石油醚進(jìn)行10min的超聲提取之后，能夠?qū)⒌⑼駻斑點(diǎn)有效顯示出來(lái)，但是卻不能將五味子甲素斑點(diǎn)顯示出來(lái)，將超聲提取時(shí)間延長(zhǎng)到30min之后，也還是不能將斑點(diǎn)清楚的顯示出來(lái)。在采用三氯甲烷作為提取劑之后，便能夠?qū)⑽逦蹲右约暗唿c(diǎn)均清楚顯示出來(lái)。因此本研究將三氯甲烷當(dāng)成丹參以及五味子的提取溶液，將其當(dāng)成質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，具有更大便利性。其次，為了選擇更好的丹參展開(kāi)系統(tǒng)，本研究對(duì)環(huán)己烷一乙酸乙酯（17：3）以及甲苯一乙酸乙酯（19：1）進(jìn)行了對(duì)比性的研究分析，研究結(jié)果顯示甲苯一乙酸乙酯（19：1）具有更好的展開(kāi)效果。

綜上所述，丹參五味子片在臨床上屬于一種復(fù)方制劑，成分具有較大復(fù)雜性，薄層色譜法能夠?qū)ζ溥M(jìn)行有效鑒別，具有快速、簡(jiǎn)單、良好重現(xiàn)性等諸多優(yōu)點(diǎn)，可以將其用在丹參五味子片的質(zhì)量控制，在臨床上具有良好的推廣價(jià)值。

[1]秦建平，吳建雄，畢宇安，林夏，趙賓江，王振中，蕭偉.HPLC同時(shí)測(cè)定益心舒片中五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素和丹參酮Ⅱ_A的含量[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2012，18（02）：77～80.

[2]李廣生，王凌波，筆雪艷，李慧勇，林林，張清波.HPLC法同時(shí)測(cè)定益心舒片中丹酚酸B、五味子醇甲和丹參酮Ⅱ_A的含量[J].黑龍江醫(yī)藥，2016，29（01）：1～3.

R286.0

A

1004-7344（2016）26-0307-02

2016-8-26

陳桂遠(yuǎn)（1984-），男，大專，主要從事藥品生產(chǎn)、研究等工作。