朱 瀾

（撫順市中心醫(yī)院檢驗科，遼寧 撫順 113006）

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三種不同免疫檢驗方法檢測HIV結果可靠性的對比研究

朱 瀾

（撫順市中心醫(yī)院檢驗科，遼寧 撫順 113006）

【摘要】目的 對免疫層析試驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗和明膠顆粒凝集試驗檢測HIV結果的可靠性進行對比分析。方法 運用ELISA、PA、ICA三種檢測方法檢測人體血清中含有的HIV1+2抗體。結果 ELISA法1∶16382陽性，PA法1∶2046陽性，ICA法1∶4092陽性。結論 ELISA有很高的靈敏度和特異性，操作簡單，僅需要實驗室配備酶標儀和洗板機即可應用，特別適合于試驗室大規(guī)模篩檢使用。

【關鍵詞】HIV抗體檢測；酶聯(lián)免疫吸附試驗；明膠顆粒凝集試驗；免疫層析法

HIV病毒，會對人體免疫力造成威脅。構成人體免疫系統(tǒng)最重要的因素，就是T淋巴細胞，而HIV尤其會破壞該細胞，使人體免疫功能下降，從而感染各種疾病，甚者會導致惡性腫瘤，病死率較高，會導致危害性極大的傳染病艾滋病。這嚴重影響了人們的生活，威脅人類身體健康。隨著艾滋病患者的不斷增加，人們越來越重視對HIV的檢查。目前，醫(yī)院、疾病預防控制中心等HIV抗體初篩實驗室普遍采用ELISA、PA、ICA對可疑高危人群進行篩查。不同的檢測方法都有不同的優(yōu)點和缺陷，這對結果的準確性，會造成一定的影響。本次研究分別對患有HIV病毒的患者進行 ELISA、PA、ICA試劑試驗分析。

1 材料與方法

1.1標本來源：本次接受試驗的146例HIV患者，均經(jīng)過國家疾病預防控制中心用免疫印跡法（WB）檢測確認。其中，HIV抗體陽性患者96例，HIV抗體陰性患者50例。國家衛(wèi)生部臨床檢驗中心，提供了本次試驗的質(zhì)控品，抗-HIV1+2抗體高值（500 NCU/mL）和低值（1 NCU/mL）。

1.2檢測試劑：ELISA試劑由上海川翔生物科技有限公司提供；PA試劑由浙江愛康生物專業(yè)供應；ICA試劑則使用美國雅培公司產(chǎn)品。

1.3儀器：RT-6100酶標儀。

1.4檢測方法。ELISA法：主要原理是根據(jù)抗體和抗原間的特殊反應，進行檢測。該反應的主要呈現(xiàn)形式，就是通過催化水解試驗和氧化還原反應，看二者結合后，是否會有顏色變化，如果結合后，呈現(xiàn)出顏色，那么樣本患有HIV1+2；PA法：對HIV-1抗體和HIV-2抗原進行重組，然后將他們包被在人工載體明膠顆粒上，觀察明膠顆粒和HIV-1或HIV-2抗體的反應，如果其發(fā)生凝集現(xiàn)象，可以檢出血清和血漿中的HIV-1/2抗體；ICA法：主要操作原理，就是在免疫層析基礎上，檢驗樣本中是否含有HIV1+2抗體，如果存有此抗體，那么它會和硒膠體結合，檢測儀器上會出現(xiàn)明顯標識，一條紅線。

2 結 果

2.1三種方法檢測HIV抗體高值、低值質(zhì)控血清結果：分別用ELISA、PA和ICA檢驗HIV高、低值質(zhì)控血清。檢測結果見表1。

表1　三種方法檢測HIV抗體高、低值質(zhì)控血清結果

2.2三種方法檢測的符合率：96例患有HIV抗體的陽性標本，ELISA法、PA法和ICA法的檢出符合率分別是100%、99.1%、97.9%，通過三種方法進行對比，符合率差距不大。

2.3三種方法結果比較：用ELISA法、PA法和ICA法對96例HIV抗體陽性患者樣本，50例HIV抗體陰性患者樣本進行HIV抗體檢測，并對檢測結果的敏感性、特異性和準確性，進行分析對比，結果見表2。

表2　三種方法HIV抗體檢測結果比較

ELISA法檢測的敏感度為96.0%（96/100）、特異度為92.0% （46/50）、準確度為97（142/146）；PA法檢測的敏感度為97.9% （95/97）、特異度為94.0%（47/50）、準確度為97.3%（142/146）；ICA法檢測的敏感度為92.1%（94/102）、特異度為84.0%（42/50）、準確度為90.4%（132/146）。

2.4HIV抗體檢測陽性血清結果：研究表明 ELISA法1∶16382陽性，PA法1∶2046陽性，ICA法1∶4092陽性。

3 討 論

本次研究對HIV樣本分別進行ELISA法、PA法和ICA法檢測，ELISA有很高的靈敏度和特異性［1-2］，操作簡單，僅需要實驗室配備酶標儀和洗板機即可應用。顆粒凝集實驗是另一種操作簡單方便，成本低廉的檢測方法，該方法結果可通過肉眼判定，靈敏度很高，特別適合發(fā)展中國家或大量篩選供血員時使用，缺點是必須使用新鮮樣品，特異性較差。人類免疫缺陷病毒抗體口腔黏膜滲出液檢測試劑盒（膠體金法）就屬于側向免疫層析法（金免疫）類別［3-4］，基于免疫層析技術通過手工操作、肉眼讀取結果、20 min即可定性得出檢測結果的快速診斷試劑，用于檢測口腔黏膜滲出液樣本中的HIV-1型和HIV-2型抗體?？捎糜谧栽缸稍儥z測、不愿采血、暈針患者的初篩。該方法適用于初篩檢測，凡由該試劑測定為陽性者，需進行進一步篩查確認。綜上所述，ELISA適合于試驗室大規(guī)模篩檢使用。

參考文獻

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中圖分類號：R512.91；446

文獻標識碼：B

文章編號：1671-8194（2016）04-0144-01