何如平　葉健烽　張曉明　簡政威　黃志超　李大強(qiáng)　劉　楊

(東莞市人民醫(yī)院心血管內(nèi)科，廣東　東莞　523000)

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調(diào)肝降壓顆粒對(duì)高血壓肝火亢盛證大鼠生物學(xué)相關(guān)指標(biāo)的影響

何如平葉健烽張曉明簡政威黃志超李大強(qiáng)劉楊1

(東莞市人民醫(yī)院心血管內(nèi)科，廣東東莞523000)

〔摘要〕目的研究調(diào)肝降壓顆粒對(duì)高血壓肝火亢盛證大鼠生物學(xué)相關(guān)指標(biāo)的影響。方法選擇15周齡經(jīng)屬性證候分類，篩選出肝火亢盛證高血壓大鼠72只，隨機(jī)分為對(duì)照組與觀察組。觀察組大鼠給予調(diào)肝降壓顆粒，對(duì)照組大鼠給予去離子水，作為對(duì)照組本次研究對(duì)兩組大鼠用藥過程中血壓、心率及體重變化情況、用藥過程中的癥狀、用藥過程中內(nèi)皮素(ET)、一氧化氮(NO)、心房鈉尿肽(ANP)變化以及用藥過程中腎素活性(PRA)、血漿降鈣素基因相關(guān)肽(GGRP)、血管緊張素(Ang)Ⅱ變化進(jìn)行觀察分析。結(jié)果治療后，觀察組和對(duì)照組血壓、心率以及體重相比差異顯著(P<0.05)。治療后，觀察組小鼠的易激惹程度明顯下降，痛閾以及眼球突出度同治療前比差異顯著(P<0.05)，同對(duì)照組相比差異顯著(P<0.05)；治療前兩組大鼠的ET 、NO、ANP值均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，具有可比性；治療后，觀察組ET值以及ANP明顯下降，NO值明顯升高，治療前后差異顯著(P<0.05)，觀察組變化不明顯，且向惡化的方向發(fā)展。另外，兩組療效相比差異顯著(P<0.05)；觀察組治療前后PRA、AngⅡ均有下降(P<0.05)，GGRP值有一定的下降，但是治療前后無顯著差異(P>0.05)；同對(duì)照組相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。觀察組治療前后PRA、AngⅡ均有下降(P<0.05)，GGRP值有一定的下降，但是治療前后無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；同對(duì)照組相比差異顯著(P<0.05)。 結(jié)論調(diào)肝降壓顆粒對(duì)高血壓肝火亢盛證大鼠的生物學(xué)相關(guān)指標(biāo)都有顯著改善。

〔關(guān)鍵詞〕調(diào)肝降壓顆粒；高血壓肝火亢盛證

醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)高血壓肝火亢盛證是大鼠在14～18周齡的集中表現(xiàn)〔1〕。本研究擬分析調(diào)肝降壓顆粒對(duì)高血壓肝火亢盛證大鼠生物學(xué)相關(guān)指標(biāo)的影響。

1材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇15周齡經(jīng)屬性證候分類，篩選出高血壓肝火亢盛證雌性大鼠72只，體重155～220 g，平均(190±12)g。隨機(jī)分為對(duì)照組與觀察組。將兩組大鼠樣本連續(xù)喂養(yǎng)7 d后進(jìn)行每組的血壓測(cè)量、行為學(xué)實(shí)驗(yàn)和宏觀表征采集等前期調(diào)整型訓(xùn)練后，按照臨床證候標(biāo)準(zhǔn)采取對(duì)動(dòng)物實(shí)施宏觀表征等效轉(zhuǎn)化，并判別證候?qū)傩?，收縮壓情況，易激怒狀態(tài)，宏觀彼表征的評(píng)判，篩選出肝火亢盛證的大鼠。兩組大鼠年齡、體重類型等方面無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異具有可比性(P>0.05)。

1.2藥品與儀器調(diào)肝降壓顆粒主要由柴胡、香附、佛手、夏枯草、梔子、黃芩、丹皮、菊花、雙鉤藤組成，本次實(shí)驗(yàn)用藥是由山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院制劑室包裝無糖免煎顆粒；其中實(shí)驗(yàn)儀器及藥劑有SoftronBP-98A 型動(dòng)脈測(cè)壓儀，JD-01GSZ型平衡旋轉(zhuǎn)儀。大鼠血清內(nèi)皮素(ET)、一氧化氮(NO)、心房鈉尿肽(ANP)等酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)藥劑盒以及動(dòng)物行為實(shí)時(shí)記錄并分析的系統(tǒng)。

1.3用藥方法觀察組大鼠給予調(diào)肝降壓顆粒，對(duì)照組大鼠給予去離子水。觀察組大鼠在15周齡開始服用藥物，一次9 g/kg(用藥量換算成成人劑量的16倍，相當(dāng)于按公斤算是的轉(zhuǎn)換方法)，1次/d，連續(xù)服藥6 w。對(duì)照組給予相同體積的去離子水，通過灌胃胃藥，作為空白對(duì)照。

1.4大鼠各項(xiàng)體征指標(biāo)的測(cè)量

1.4.1大鼠血壓、心率及體重的測(cè)量采用SoftronBP-98A 型動(dòng)脈測(cè)壓儀檢測(cè)大鼠安靜狀態(tài)下的血壓。測(cè)前連接好儀器，開啟熱泵控制溫度36～37℃，固定大鼠，預(yù)熱10 min后，按照儀器說明書嚴(yán)格操作，測(cè)量大鼠尾牙，測(cè)量3次，并做好記錄。

1.4.2大鼠易激惹程度的評(píng)分1分：握持頸部處時(shí)驚跳、尖叫；2分：握持頸部處時(shí)欲咬人或咬人；3分：提攜尾部處時(shí)馬上驚跳、尖叫，欲咬人，甚至與同籠其他大鼠打斗頻繁；0分：無上述狀況者。

1.4.3大鼠宏觀表現(xiàn)采集記錄大鼠常見狀態(tài)包括精神情況、活動(dòng)量和痛閾以及眼球突出度等一般狀態(tài)。

1.4.4血清制備與提取及分析檢測(cè)用藥過程中ET、NO、ANP變化以及用藥過程中腎素活性(PRA)、血漿降鈣素基因相關(guān)肽(GGRP)、血管緊張素(Ang)Ⅱ變化進(jìn)行觀察分析。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS18.0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)。

2結(jié)果

2.1兩組大鼠用藥過程中血壓、心率及體重變化情況比較治療前兩組小鼠的血壓、心率以及體重?zé)o統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；但觀察組治療6 w后，血壓下降明顯；心率顯著(P<0.05)；體重也略微下降，但是與治療前相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療后，兩組血壓、心率以及體重相比差異顯著(P<0.05)，見表1。

2.2兩組大鼠用藥過程中的癥狀比較治療前兩組的易激惹程度、痛閾以及眼球突出度均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，治療后，觀察組小鼠的易激惹程度明顯下降，痛閾以及眼球突出度同治療前比差異顯著(P<0.05)，同對(duì)照組相比差異顯著(P<0.05)，見表2。

2.3兩組大鼠用藥過程中ET 、NO、ANP變化比較治療前兩組大鼠的ET 、NO、ANP值均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；治療后，觀察組ET值以及ANP明顯下降，NO值明顯升高(P<0.05)，觀察組變化不明顯，且向惡化的方向發(fā)展。另外，兩組療效相比差異顯著(P<0.05)，見表3。

2.4兩組大鼠用藥過程中PRA 、GGRP、AngⅡ變化比較用藥前兩組大鼠各項(xiàng)指標(biāo)均無明顯差異(P>0.05)；觀察組治療后PRA、AngⅡ均有顯著的下降(P<0.05)，GGRP值有輕微的下降，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；觀察組變化不明顯，且向惡化的方向發(fā)展。另外，兩組療效相比差異顯著(P<0.05)，見表4。

表1　兩組的大鼠用藥過程中血壓、心率及體重變化情況比較±s,n=36)

與治療前比較:1)P<0.05；下表同

表2　兩組大鼠用藥過程中的癥狀比較±s,n=36)

表3　兩組大鼠用藥過程中ET 、NO、ANP變化比較

表4　兩組大鼠用藥過程中PRA 、GGRP、AngⅡ變化比較

3討論

高血壓肝火亢盛證在臨床上有各種表現(xiàn)，主要為在外部刺激下，患者會(huì)出現(xiàn)反復(fù)、持續(xù)時(shí)間較長的神經(jīng)緊張、煩躁不安、焦慮等情緒上的變化〔2〕，內(nèi)部表現(xiàn)為肝郁氣滯證以及患者的交感神經(jīng)活動(dòng)會(huì)增強(qiáng)，進(jìn)而舒縮血管中樞傳出收縮血管的沖動(dòng)占優(yōu)勢(shì)，各種表現(xiàn)導(dǎo)致患者的小動(dòng)脈收縮〔3～5〕，小動(dòng)脈與血管阻力直接相關(guān)，小動(dòng)脈收縮會(huì)使得周圍血管阻力上升，進(jìn)而患者血壓上升〔6～9〕，隨著病情的推移血壓會(huì)繼續(xù)上升，最后發(fā)展為高血壓肝火亢盛證〔10〕。ET是一種21肽的血管活性物質(zhì)，該物質(zhì)由內(nèi)皮細(xì)胞分泌，是到目前為止發(fā)現(xiàn)的活性最為強(qiáng)大的內(nèi)源性的血管收縮劑，ET與靶細(xì)胞膜上的受體結(jié)合后，激活鳥苷酸環(huán)化酶和Ca2+通道，引起Ca2+內(nèi)流,升高胞質(zhì)內(nèi)Ca2+濃度，從而使血管收縮痙攣，外圍阻力增加，引起血壓升高。所以ET是一種高效的、長期致高血壓劑，其作用機(jī)制主要就是ET直接收縮血管，進(jìn)而增加了血管外周阻力，同時(shí)與其他的血管活性物質(zhì)之間相互作用，從而使血壓持續(xù)上升。ANP是一種多肽類激素〔11〕，是由心房肌細(xì)胞合成、存儲(chǔ)且分泌的具有排鈉利尿、對(duì)抗升壓激素的作用。本研究說明調(diào)肝降壓顆粒有很好的降壓作用，可以明顯地抑制高血壓的增長趨勢(shì)，同時(shí)調(diào)肝降壓顆粒在降低血壓的同時(shí)能過對(duì)大鼠的體重的下降有一定的緩解作用。本研究另外調(diào)肝降壓顆粒在降血壓的同時(shí)對(duì)患者出現(xiàn)的各類病癥有很大的改善，充分體現(xiàn)了中藥的整體調(diào)整作用。調(diào)肝降壓顆粒對(duì)高血壓肝火亢盛證大鼠的生物學(xué)相關(guān)指標(biāo)都有顯著改善，提高大鼠的生存質(zhì)量，為臨床實(shí)踐及中醫(yī)研究的提供可靠保障。

4參考文獻(xiàn)

1薛曉興,李玉波,廉洪建,等.高血壓肝火亢盛證動(dòng)物模型相關(guān)指標(biāo)的研究〔J〕.中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2015;21(8):97-101.

2盧律達(dá),黃義,郭曉蘭,等.原花青素對(duì)腎血管性高血壓大鼠血壓及血清抗氧化能力的影響〔J〕.中國醫(yī)院藥學(xué)雜志,2012;32(20):1631-3,1639.

3趙雅寧,李建民,劉樂,等.內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)分子GRP78在高血壓加重全腦缺血大鼠神經(jīng)損傷中的作用〔J〕.南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2012;32(11):1675-9.

4張立娟,王康鋒,楊傳華,等.電針督脈穴對(duì)高血壓復(fù)合阿爾茨海默病大鼠學(xué)習(xí)記憶能力及血清一氧化氮和內(nèi)皮素水平的影響〔J〕.中國全科醫(yī)學(xué),2015;18(3):317-21.

5劉曉燕,郭霞珍,李立華,等.寒邪誘發(fā)高血壓大鼠腦出血發(fā)病中血管活性因子的變化〔J〕.中醫(yī)雜志,2012;53(6):507-9,512.

6盧偉,馬曉麗,蘭怡,等.兩色金雞菊醇提物對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠尿液的代謝組學(xué)研究〔J〕.中國藥理學(xué)通報(bào),2014;(9):1311-4,1315.

7張根水,羅柳金,侯寧,等.辛伐他汀對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠血管功能作用研究〔J〕.中國藥理學(xué)通報(bào),2012;28(9):1205-8.

8梁小輝,李偉健,陳文樸,等.絞股藍(lán)總皂苷對(duì)實(shí)驗(yàn)性高血壓大鼠的降壓作用的研究〔J〕.時(shí)珍國醫(yī)國藥,2012;23(10):2417-9.

9雷燕,陶麗麗,王國利,等.人參三七川芎提取物對(duì)增齡和高血壓大鼠血管平滑肌細(xì)胞的影響〔J〕.中國中西醫(yī)結(jié)合雜志,2012;32(10):1374-9.

10周建斌,劉小葉,歐陽新平,等.妊娠高血壓綜合征大鼠血清硫化氫濃度的變化及意義〔J〕.中國動(dòng)脈硬化雜志,2013；21(9):797-801.

11余常輝,陳燕,李婷,等.煙熏聯(lián)合脂多糖氣管內(nèi)滴注建立原發(fā)性高血壓大鼠慢性肺阻塞模型〔J〕.南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2013;(9):1341-6.

〔2015-10-22修回〕

(編輯李相軍/滕欣航)

基金項(xiàng)目：東莞市科技計(jì)劃醫(yī)療衛(wèi)生類科研項(xiàng)目(No.201110515001085)

〔中圖分類號(hào)〕R541.4

〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A

〔文章編號(hào)〕1005-9202(2016)13-3133-03；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.13.017

1山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院心內(nèi)科

第一作者：何如平(1981-)，男，碩士，主治醫(yī)師，主要從事冠心病臨床研究。