王秋波

(同濟(jì)大學(xué)醫(yī)學(xué)院，上海　201135)

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慢性阻塞性肺疾病患者血清中Clara細(xì)胞分泌蛋白CC16和SP-D濃度與肺功能的相關(guān)性

王秋波1

(同濟(jì)大學(xué)醫(yī)學(xué)院，上海201135)

〔摘要〕目的研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血清中Clara細(xì)胞分泌蛋白CC16和肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D(SP-D)濃度與患者肺功能的關(guān)系。方法選取2013年12月至2014年12月呼吸內(nèi)科住院及門診受試患者。將患者隨機(jī)分為三組，A組為COPD 的急性加重期(AECOPD) 患者組(n=25)，B組為COPD 穩(wěn)定期患者組(n=25)，C組為非 COPD對(duì)照組(n=25)。收集患者及對(duì)照組臨床資料和血清標(biāo)本，采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法測(cè)定血清CC16、SP-D 水平。檢測(cè)受試者第1秒用力呼氣量占預(yù)計(jì)值的百分比(FEV1%)、FEV1和用力肺活量的比值(FEV1/FVC)、肺一氧化碳彌散量占預(yù)計(jì)值百分比(DLCO %)。結(jié)果A組患者血清CC16和SP-D濃度最高，其次是B組，C組濃度最低。而且，三組COPD患者肺功能的變化與血清中CC16和SP-D濃度密切相關(guān)，Clara細(xì)胞分泌蛋白CC16與患者肺功能均呈現(xiàn)出高度的一致性，呈正相關(guān)關(guān)系；SP-D濃度與患者肺功能均呈現(xiàn)出高度的反向性，呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(P<0.05)。結(jié)論COPD患者血清中CC16和SP-D濃度升高，Clara細(xì)胞分泌蛋白CC16與患者肺功能呈正相關(guān)關(guān)系；SP-D濃度與患者肺功能呈負(fù)相關(guān)。

〔關(guān)鍵詞〕慢性阻塞性肺疾??；Clara細(xì)胞分泌蛋白；肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D；肺功能；預(yù)后轉(zhuǎn)歸

人Clara細(xì)胞的分泌蛋白(CCSP)是該細(xì)胞分泌物的主要組成部分，包含二條肽鏈〔1～3〕。該蛋白屬于特異性的標(biāo)志蛋白，可以作為上皮屏障完整或者損傷的標(biāo)志〔2,4〕。該蛋白具有抗感染和免疫調(diào)節(jié)等多種活性〔5〕。該蛋白的異常與慢性阻塞性肺疾病(COPD)有關(guān)〔6〕。本文研究COPD患者血清中Clara細(xì)胞分泌蛋白CC16和肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D(SP-D)濃度與患者肺功能和患者預(yù)后轉(zhuǎn)歸的關(guān)系，可為COPD的防治研究奠定理論基礎(chǔ)。

1資料與方法

1.1一般資料隨機(jī)選擇2013年12月至2014年12月我院呼吸內(nèi)科住院及門診受試患者。(1)入組標(biāo)準(zhǔn)：①COPD的患者；②性別不拘；③年齡25～65歲。 (2)排除標(biāo)準(zhǔn)：①各型肝炎病毒感染者；②自身免疫性疾病患者；③其他惡性腫瘤患者；④各種高血壓患者；⑤糖尿病患者；⑥各種精神疾患的患者；⑦艾滋病毒感染者。(3)失聯(lián)原因及其應(yīng)對(duì)措施，預(yù)計(jì)原因：患者中途退出試驗(yàn)；患者在試驗(yàn)過程中轉(zhuǎn)院治療；應(yīng)對(duì)措施：按照1∶1比例相應(yīng)補(bǔ)充受試患者進(jìn)試驗(yàn)組。(4)倫理學(xué)考量：①患者及其直系家屬在充分了解研究的過程的基礎(chǔ)之上簽署參與該臨床研究的知情同意書；②入選患者相關(guān)診治和監(jiān)護(hù)措施均以臨床指南相關(guān)原則為依據(jù)，對(duì)患者的醫(yī)療治療和安全有充分保障。③對(duì)入選患者的信息及診療記錄予以保密，保護(hù)患者的隱私權(quán)。④在中國臨床試驗(yàn)注冊(cè)中心注冊(cè)試驗(yàn)方案，試驗(yàn)中遵循《渥太華工作組關(guān)于臨床試驗(yàn)注冊(cè)的聲明》(Ottawa Group Statement for Clinical Trial Registration)。

1.2受試者的分組將患者隨機(jī)分為三組，A組為COPD 的急性加重期(AECOPD)組(n=25)，平均年齡(52.33±9.42)歲；男13例，女12例，病程(10.25±3.41)年，體重指數(shù)〔BMI，(25.04±4.48)kg/m2〕，B組為COPD 穩(wěn)定期組(n=25)，年齡(51.25±8.83)歲，男11例，女14例，病程(10.53±3.46)年，BMI(24.86±5.52)kg/m2。C組為非 COPD對(duì)照組(n=25)，平均年齡(51.09±12.45)歲，男10例，女15例，平均病程(10.18±3.15)年，BMI(25.10±4.15)kg/m2。三組受試者的一般情況比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。此外，研究過程中所有受試者均完成了全部試驗(yàn)，無中途退出者，亦無因血壓控制不佳而改用其他療法者。

1.3儀器與試劑BIOBASE-EL10A型全自動(dòng)酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀(山東博科公司)；C-8800D 肺功能儀(日本捷斯特公司)。

1.4觀察指標(biāo)和手段①收集患者及對(duì)照組臨床資料、血清標(biāo)本，采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法測(cè)定血清CC16、SP-D 水平；②受試者第1秒用力呼氣量占預(yù)計(jì)值的百分比(FEV1%)；③受試者FEV1和用力肺活量的比值(FEV1/FVC)；④受試者肺一氧化碳彌散量所占預(yù)計(jì)值的百分比(DLCO%)；⑤患者血清中Clara細(xì)胞分泌蛋白CC16和SP-D濃度與患者肺功能的相關(guān)性分析。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS19.0軟件行χ2檢驗(yàn)及方差分析。

2結(jié)果

2.1三組患者血清CC16和SP-D濃度比較A組患者血清CC16和SP-D濃度最高，其次是B組，再次是C組(P<0.05)。見表1。

表1　各組患者血清CC16和SP-D濃度比較

與A組比較：1)P<0.05；與B組比較：2)P<0.05；下表同

2.2各組患者肺功能比較A組患者肺功能最差，其次是B組，再次是C組(P<0.05)。見表2。

表2　各組患者肺功能比較

2.3各組患者血清CC16和SP-D濃度與患者肺功能的相關(guān)性各組患者血清CC16蛋白和與患者肺功能均呈正相關(guān)(P<0.05)；SP-D濃度與患者肺功能呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。見表3。

表3　各組患者血清CC16、SP-D蛋白濃度與肺功能的相關(guān)性

3討論

COPD的特點(diǎn)是吸氣和呼氣的氣流受限，而且這種氣流受限是一種不可逆的病變進(jìn)程。該病變和有害顆粒誘發(fā)的氣道和肺臟的炎癥反應(yīng)關(guān)系密切〔7〕。該疾病近年來已經(jīng)成為造成人類死亡的第四位原因。

Clara細(xì)胞屬于非纖毛類的上皮細(xì)胞，其多襯覆在遠(yuǎn)端的細(xì)支氣管。該類細(xì)胞的分泌非?；钴S，同時(shí)Clara細(xì)胞還具有較強(qiáng)的增殖分化以及生物轉(zhuǎn)化的特性〔8，9〕。CCSP是該細(xì)胞的分泌物，大概占支氣管肺泡的灌洗液之中可溶性蛋白的3%〔10,11〕。CCSP蛋白的二條肽鏈多呈現(xiàn)反向排列，這兩條肽鏈分別通過3位半胱氨酸和69位半胱氨酸的二硫鍵連接。CCSP在人體血清中的正常濃度為10～15 μg/L。在慢性肺損傷時(shí)氣道Clara細(xì)胞數(shù)目減少，血清CCSP水平降低〔11,12〕。目前，CC-SP在血清中的濃度是檢測(cè)Clara細(xì)胞的損傷程度和評(píng)估上皮屏障的主要標(biāo)志物〔13,14〕。

SP-D是包括肺泡的Ⅱ型上皮細(xì)胞以及遠(yuǎn)端細(xì)支氣管的Clara細(xì)胞等呼吸道上皮細(xì)胞的主要分泌物。SP-D蛋白是膠原凝集家族蛋白的一員，其具有天然免疫功能。此外，SP-D蛋白還能抑制炎癥的發(fā)生和發(fā)展。尤其值得指出的是，SP-D蛋白能夠協(xié)助機(jī)體的免疫系統(tǒng)清除病原體。故而，SP-D蛋白在COPD的發(fā)展中具有重要作用〔15～17〕。

CCSP能夠抑制分泌性磷脂酶A2的活性，同時(shí)減少花生四烯酸衍生的炎癥介質(zhì)，抑制單核細(xì)胞干擾素(IFN-γ)的濃度。而且，CCSP蛋白還能夠降低巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、成纖維細(xì)胞的趨化活性，抑制血小板的聚集。CCSP在肺內(nèi)感染性和變態(tài)反應(yīng)性炎癥的調(diào)控中有重要作用。COPD患者小氣道CCSP的表達(dá)降低，提示CCSP與COPD的發(fā)生有關(guān)。

人體血清中SP-D 蛋白的水平增高與其肺部急慢性炎癥關(guān)系密切。急慢性氣道炎癥是COPD的致病原因，故而推測(cè)SP-D 蛋白可以通過肺泡與支氣管上皮間隙進(jìn)入血流，而炎癥程度的變化導(dǎo)致肺泡與上皮細(xì)胞的間隙變大，導(dǎo)致肺部炎癥部位更多的 SP-D 蛋白滲漏入血，故而能夠解釋 COPD 患者血清中SP-D蛋白水平上調(diào)的根本原因。

本文顯示，COPD患者血清CC16和SP-D濃度升高，CC16與肺功能正相關(guān)；SP-D與肺功能負(fù)相關(guān)。

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〔2015-12-09修回〕

(編輯曹夢(mèng)園)

〔中圖分類號(hào)〕R563.3

〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A

〔文章編號(hào)〕1005-9202(2016)12-2980-02；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.12.074

1上海市浦東新區(qū)周浦醫(yī)院呼吸科

第一作者：王秋波(1976-)，男，主治醫(yī)師，主要從事COPD臨床研究。