肖　莉　萬(wàn)義增　高　月　孫雪竹　李亞娟　張　歡

(遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第三醫(yī)院婦產(chǎn)科，遼寧　錦州　121000)

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再生基因Ⅳ在子宮內(nèi)膜樣腺癌中的表達(dá)及與細(xì)胞增殖的關(guān)系

肖莉萬(wàn)義增1高月2孫雪竹李亞娟張歡

(遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第三醫(yī)院婦產(chǎn)科，遼寧錦州121000)

〔摘要〕目的檢測(cè)子宮內(nèi)膜樣腺癌中再生基因Ⅳ(RegⅣ)和增殖相關(guān)抗體增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)、Ki67表達(dá)，分析其臨床意義。方法65例子宮內(nèi)膜樣腺癌術(shù)后存留的蠟塊組織作為觀察組，30例復(fù)雜性增生的子宮內(nèi)膜組織作為對(duì)照組，21例因子宮肌瘤行子宮全切后的非腫瘤性子宮內(nèi)膜組織作為正常對(duì)照組。應(yīng)用免疫組化SP法檢測(cè)三組中RegⅣ、PCNA和Ki67的表達(dá)。結(jié)果三組中RegⅣ、PCNA和Ki67的表達(dá)差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。觀察組中RegⅣ、PCNA和Ki67的表達(dá)均與腫瘤的浸潤(rùn)深度和最大徑均密切相關(guān)，RegⅣ的表達(dá)與分化程度密切相關(guān)。相關(guān)分析顯示觀察組中RegⅣ和PCNA、RegⅣ和Ki67的表達(dá)均呈正相關(guān)性。結(jié)論子宮內(nèi)膜樣腺癌中RegⅣ高表達(dá)是腫瘤形成和進(jìn)展的重要因素，RegⅣ對(duì)腫瘤細(xì)胞的增殖有一定的調(diào)節(jié)作用。

〔關(guān)鍵詞〕子宮內(nèi)膜樣腺癌；RegⅣ；增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)；Ki67；免疫組化

子宮內(nèi)膜樣腺癌病變形成與子宮內(nèi)膜上皮的不典型增生密切相關(guān)，蛋白表達(dá)失常被認(rèn)為與病變的形成密切相關(guān)〔1〕。再生基因蛋白家族是鈣依賴性凝集素超家族，高表達(dá)在部分惡性腫瘤中，參與細(xì)胞的增殖和分化過(guò)程〔2〕。再生基因(Reg)Ⅳ是家族的新成員，其在炎癥反應(yīng)、炎性相關(guān)的腫瘤性病變及侵襲性癌中可以高表達(dá)，對(duì)促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)、增殖可能有一定作用〔3〕。但是關(guān)于RegⅣ激活及轉(zhuǎn)導(dǎo)信號(hào)通路的發(fā)現(xiàn)很少。本研究關(guān)注子宮內(nèi)膜樣腺癌中RegⅣ、增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)和Ki67的表達(dá)，分析其臨床意義及相關(guān)性。

1資料與方法

1.1臨床資料我院行子宮內(nèi)膜樣腺癌根治手術(shù)的65例患者作為觀察組，留取術(shù)后的蠟塊組織及完整臨床資料，同時(shí)經(jīng)病理醫(yī)師再次閱片證實(shí)，并符合WHO中的病理診斷標(biāo)準(zhǔn)。年齡42～79歲，平均57.9歲。30例復(fù)雜性增生的子宮內(nèi)膜組織作為對(duì)照組，年齡34～77歲，平均54.3歲。21例因子宮肌瘤行子宮全切后的非腫瘤性子宮內(nèi)膜組織作為正常對(duì)照組，年齡35～76歲，平均51.9歲。三組常規(guī)資料無(wú)明顯差別。

1.2RegⅣ、PCNA和Ki67表達(dá)的檢測(cè)RegⅣ、PCNA和Ki67蛋白的檢測(cè)均應(yīng)用免疫組化SP法、二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色。嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，做好質(zhì)量控制。

1.3RegⅣ、PCNA和Ki67的判定RegⅣ以細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜中出現(xiàn)淡黃色-棕褐色顆粒為陽(yáng)性，PCNA和Ki67以細(xì)胞核中出現(xiàn)淡黃色-棕褐色定為陽(yáng)性。選擇上皮細(xì)胞分布密集的區(qū)域進(jìn)行觀察，共選擇5個(gè)400倍視野計(jì)數(shù)。陽(yáng)性根據(jù)以下兩個(gè)方面：①陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)：<5%為0分；5%～25% 1分，26%～50% 2分，51%～75% 3分，≥76% 4分。②染色強(qiáng)度：無(wú)色為0分；淡黃色為1分；棕黃色為2分；棕褐色為3分。兩者計(jì)分相乘作為最終判定結(jié)果。RegⅣ：0～3分為陰性，4～12分為陽(yáng)性。PCNA和Ki67：0～6分為陰性，7～12分為陽(yáng)性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SAS6.12統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)、線性相關(guān)分析。

2結(jié)果

2.1三組RegⅣ、PCNA和Ki67表達(dá)比較三組RegⅣ、PCNA和Ki67的表達(dá)差異均顯著(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1　三組中RegⅣ、PCNA和Ki67表達(dá)的比較〔n(%)〕

2.2觀察組中RegⅣ、PCNA和Ki67的表達(dá)在不同臨床特征中的比較觀察組中RegⅣ、PCNA和Ki67的表達(dá)與腫瘤浸潤(rùn)深度和最大徑均密切相關(guān)，RegⅣ的表達(dá)與分化程度密切相關(guān)。見(jiàn)表2。

表2　觀察組中RegⅣ、PCNA和Ki67的表達(dá)在不同臨床特征中的比較〔n(%)〕

2.3觀察組中RegⅣ、PCNA和Ki67的相關(guān)性分析觀察組中RegⅣ和PCNA(r=0.51,P<0.05)、RegⅣ和Ki67(r=0.48,P<0.05)的表達(dá)均呈正相關(guān)性。

3討論

子宮內(nèi)膜樣腺癌常與肥胖及雌激素刺激有關(guān)，其癌前病變?yōu)椴坏湫驮錾蛢?nèi)膜的上皮內(nèi)瘤變〔4〕。病變多為彌漫型，少部分為局限型。腫瘤由異型增生的腺樣結(jié)構(gòu)組成，常排列成密集的腺管狀、背靠背、搭橋、篩狀或迷路狀結(jié)構(gòu)，多數(shù)病例為高分化，很少有實(shí)性區(qū)，而低分化腫瘤常表現(xiàn)為實(shí)性片狀結(jié)構(gòu)。癌基因的作用與子宮內(nèi)膜樣腺癌的形成有關(guān)〔5〕。RegⅣ是2001年在對(duì)炎癥性腸病庫(kù)的高頻序列進(jìn)行分析時(shí)發(fā)現(xiàn)并分離出的一種新型基因，有的學(xué)者也認(rèn)為其為癌基因〔6〕。RegⅣ位于染色體1p12-13.1，編碼分泌型蛋白〔7〕。研究顯示RegⅣ主要在消化系統(tǒng)腫瘤如胰腺癌、結(jié)直腸癌、胃癌和胰腺癌中表達(dá)〔7,8〕。張軍等〔9〕通過(guò)觀察RegⅣ在胃癌中的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)RegⅣ在胃癌中高表達(dá)，RegⅣ與癌細(xì)胞增殖、血管形成有關(guān)，聯(lián)合檢測(cè)RegⅣ和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子可以作為判斷胃癌生物學(xué)行為的指標(biāo)。近年也有人關(guān)注RegⅣ在其他腫瘤中的表達(dá)情況〔10〕。王樹(shù)香等〔11〕觀察RegⅣ在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)后發(fā)現(xiàn)RegⅣ在正常子宮內(nèi)膜、不典型增生子宮內(nèi)膜、子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)依次升高，認(rèn)為RegⅣ可能對(duì)子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展中起重要作用，同時(shí)可以指導(dǎo)預(yù)后的評(píng)估。子宮內(nèi)膜樣腺癌是高增殖狀態(tài)的腫瘤，臨床標(biāo)記增殖指數(shù)的常用抗體為PCNA和Ki67，其標(biāo)記準(zhǔn)確，客觀〔12,13〕。

本研究提示RegⅣ高表達(dá)及PCNA、Ki67標(biāo)記的增殖指數(shù)對(duì)子宮內(nèi)膜癌的形成及癌變進(jìn)展有一定促進(jìn)作用；三者高表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)及浸潤(rùn)，使腫瘤處于高度侵襲狀態(tài)，細(xì)胞的異型性增加，惡性潛能增加。RegⅣ的表達(dá)與分化程度密切相關(guān)，由于分化是細(xì)胞幼稚與成熟變化的過(guò)程，因此RegⅣ在一定程度上可以調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞從幼稚向成熟的分化，此點(diǎn)也在一定程度上間接提示RegⅣ參與腫瘤惡變的內(nèi)在過(guò)程，提示RegⅣ可以有效促進(jìn)腫瘤的增殖過(guò)程，也說(shuō)明RegⅣ對(duì)細(xì)胞增殖的作用是其促進(jìn)腫瘤形成和進(jìn)展的重要內(nèi)在調(diào)節(jié)因素之一〔14,15〕。研究認(rèn)為在MKN28和TMK1細(xì)胞系中RegⅣ與表皮生長(zhǎng)因子受體的高磷酸化水平有關(guān)〔16〕。也有學(xué)者認(rèn)為RegⅣ可以與通過(guò)趨化因子CCL7結(jié)合腫瘤表面趨化因子受體CCR1和CCR3，進(jìn)而誘發(fā)腫瘤基質(zhì)蛋白酶的表達(dá)升高促進(jìn)腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移。因此RegⅣ在腫瘤中的作用可能具有多樣性，其需要更多的實(shí)驗(yàn)來(lái)證實(shí)和發(fā)現(xiàn)〔17〕。

綜上，子宮內(nèi)膜樣腺癌中RegⅣ高表達(dá)是腫瘤形成和進(jìn)展的重要因素，RegⅣ對(duì)腫瘤細(xì)胞的增殖有一定的調(diào)節(jié)作用。

4參考文獻(xiàn)

1Bohilea RE,Sajin M,Furtunescu F,etal.Clinical and pathological correlations in endometrial pathology〔J〕.J Med Life,2015;8(4):552-62.

2馬華,梅峰,馬千里,等.RegⅣ在胃癌中的表達(dá)及其臨床意義〔J〕.第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2006;28(5):441-3.

3鄭聲琴,何杰,黃培林,等.RegⅣ在大腸癌中表達(dá)及其臨床意義〔J〕.世界華人消化雜志,2010;18(33):3594-8.

4Chen M,Jin Y,Li Y,etal.Oncologic and reproductive outcomes after fertility-sparing management with oral progestin for women with complex endometrial hyperplasia and endometrial cancer〔J〕.Int J Gynaecol Obstet,2016;132(1):34-8.

5Sakai K,Yamagami W,Susumu N,etal.Pathological factors associated with omental metastases in endometrial cancer〔J〕.Eur J Gynaecol Oncol,2015;36(4):397-401.

6秦先鋒,朱惠明,劉玉杰.RegⅣ和EGFR在大腸癌中的表達(dá)〔J〕.中國(guó)醫(yī)藥指南,2013;11(36):10-1.

7Moon JH,Fujiwara Y,Nakamura Y,etal.REGⅣ as a potential biomarker for peritoneal dissemination in gastric adenocarcinoma〔J〕.J Surg Oncol,2012;105(2):189-94.

8Guo Y,Xu J,Li N,etal.RegⅣ potentiates colorectal carcinoma cell migration and invasion via its CRD domain〔J〕.Cancer Genet Cytogenet,2010;199(1):38-44.

9張軍,鄒賽英,董雅璐.RegⅣ、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在胃癌中表達(dá)及其與微血管密度關(guān)系的研究〔J〕.中華臨床醫(yī)師雜志,2012;6(9):2344-6.

10Yang L,Lan S,Liu J,etal.Expression of MK-1 and RegⅣ and its clinicopathological significances in the benign and malignant lesions of gallbladder〔J〕.Diagn Pathol,2011;21(6):100-6.

11王樹(shù)香,陳秀瑋,李雪婷,等.再生基因Ⅳ在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及臨床意義〔J〕.臨床腫瘤學(xué)雜志,2015;20(4):317-9.

12Steinbrecher KA,Harmel-Laws E,Sitcheran R,etal.Loss of epithelial RelA results in deregulated intestinal proliferative/apoptotic homeostasis and susceptibility to inflammation〔J〕.J Immunol,2008;180(4):2588-99.

13Numata M,Oshima T.Significance of regenerating islet-derived type Ⅳ gene expression in gastroenterological cancers〔J〕.World J Gastroenterol,2012;18(27):3502-10.

14楊德生,康玉華,李福春,等.再生基因蛋白Ⅳ、骨橋蛋白、表皮生長(zhǎng)因子受體蛋白在胃腺癌中的表達(dá)及臨床意義〔J〕.中國(guó)老年學(xué)雜志,2015;35(8):2214-6.

15楊德生,康玉華,李福春,等.胃腺癌組織再生基因蛋白Ⅳ的表達(dá)及臨床意義〔J〕.第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),2014;35(7):786-8.

16Nishnupuri KS,Luo Q,Murmu N,etal.RegⅣ activates the epidermal growth factor receptor/Akt/AP-1 signaling pathway in colon adenocarcinomas〔J〕.Gastroenterology,2006;130(1):137-49.

17嚴(yán)偉,徐細(xì)明,湯俊,等.RegⅣ和CCL7在胃癌中的表達(dá)及相關(guān)性分析〔J〕.現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展〔J〕.2015;15(26):5063-5.

〔2014-12-16修回〕

(編輯苑云杰)

〔中圖分類號(hào)〕R737

〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A

〔文章編號(hào)〕1005-9202(2016)12-2935-03；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.12.053

1遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第三醫(yī)院病理科

2遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第三醫(yī)院檢驗(yàn)科

第一作者：肖莉(1971-)，女，碩士，副主任醫(yī)師，主要從事婦科腫瘤及產(chǎn)科危重癥研究。