梁紅英,關(guān)植芝,楊麗紅,劉永東

(廣東省開平市中醫(yī)院檢驗科　529300)

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·臨床研究·

建立尿液流水線尿沉渣分析儀檢查結(jié)果復(fù)檢規(guī)則的探討

梁紅英,關(guān)植芝,楊麗紅,劉永東

(廣東省開平市中醫(yī)院檢驗科529300)

摘要:目的通過對尿液干化學(xué)、有形成分檢查和顯微鏡鏡檢結(jié)果的綜合分析，探討尿液中紅細胞、白細胞、小圓上皮細胞及管型檢查結(jié)果之間的差異，制訂合理的顯微鏡復(fù)檢規(guī)則。方法隨機選取1 380例患者新鮮中段尿液標本，分別用Sysmex UF-500i尿沉渣分析儀、不離心顯微鏡鏡檢進行有形成分分析、用US-200尿干化學(xué)分析儀進行尿液干化學(xué)分析，并對紅細胞，白細胞、小圓上皮細胞及管型的檢測結(jié)果統(tǒng)計分析。結(jié)果1 380份標本復(fù)檢率為42.7%，以管型復(fù)檢為主，小圓上皮細胞次之，紅細胞復(fù)檢率最低。結(jié)論UF-500i尿沉渣分析儀復(fù)檢率較高，只能作為一種篩查工具。實驗室有必要建立適當?shù)娘@微鏡復(fù)檢規(guī)則，以保證尿液常規(guī)檢查結(jié)果的準確性。

關(guān)鍵詞:UF-500i尿沉渣分析儀;不離心顯微鏡鏡檢;復(fù)檢規(guī)則

尿液成分分析包括尿液干化學(xué)分析和尿液沉渣分析，其反映機體的代謝情況，不僅有助于泌尿系統(tǒng)疾病的診斷和病情監(jiān)測，對內(nèi)分泌系統(tǒng)和消化系統(tǒng)疾病的診斷及輔助診斷也有重要的臨床價值。隨著尿液干化學(xué)分析和尿沉渣分析儀的普及，尿液檢查自動化的程度和監(jiān)測速度也不斷提高。尿液檢查流水線的使用大大提高檢測速度，但是尿液干化學(xué)分析儀和尿沉渣分析儀的測試體系存在差異:干化學(xué)反應(yīng)存在反應(yīng)的局限性和或干擾因素；Sysmex UF-500i尿沉渣分析儀基于熒光染色的原理使尿液中有形成分染色后量化的細胞表面及內(nèi)部的信息，通過光的強度參數(shù)，分析和量化各個有形成分。但是實際上尿液有形成分形態(tài)、大小多變導(dǎo)致光強互相交叉，從而造成有形成分檢查結(jié)果的假陰、陽性比較高。因此，兩種檢測系統(tǒng)的檢查項目存在假陰、陽性[1]，需要以顯微鏡鏡檢為判斷標準，通過顯微鏡鏡檢進一步確定。為了提高尿液分析的檢驗質(zhì)量，規(guī)范操作流程，提高工作效率，建立合理的顯微鏡復(fù)檢規(guī)則是必要的。

1材料與方法

1.1材料與儀器US-200尿干化學(xué)分析儀及配套試紙條、質(zhì)控品；Sysmex UF-500i尿沉渣分析儀及配套試劑、原裝配套高、底值質(zhì)控品、普通光學(xué)顯微鏡。

1.2標本來源收集2014年5月至2015年2月本院門診或各區(qū)病房的新鮮中段尿標本1 380份。其中1 000份用于建立復(fù)檢規(guī)則，380份用于規(guī)則驗證。

1.3方法隨機留取標本，專人負責標本處理，并于2 h內(nèi)完成檢測，結(jié)果以顯微鏡鏡檢為準。

1.3.1尿液干化學(xué)、尿沉渣鏡檢、尿沉渣分析的陽性判斷標準以顯微鏡檢查結(jié)果作為臨床評價標準，分別對尿干化學(xué)分析儀和尿沉渣分析儀進行比較。尿沉渣鏡檢：未離心尿液非染色檢驗法檢驗參考標準為紅細胞(RBC)、管型(CAST)、小圓上皮細胞(SRC)均為(0至偶見)/HP,白細胞(WBC)(0～3)/HP。尿干化學(xué)的RBC、WBC、蛋白質(zhì)(PRO)≥1+為陽性，<1+為陰性； UF-500i尿沉渣分析儀參考值(由Sysmex公司提供)：RBC男(0～17)/HP、女(0～27)/HP， WBC男(0～16)/HP、女(0～36)/HP，CAST(0～3)/μL，小圓上皮細胞(0～3)/HP。4項檢測結(jié)果超過此范圍為陽性。互相組合建立初步復(fù)檢規(guī)則。

1.3.2復(fù)檢規(guī)則的驗證選取陽性或潛在陽性的標本380份進行3種方法的檢測，以顯微鏡檢查的結(jié)果為準，評估該復(fù)檢規(guī)則的真假陽性率和真假陰性率及復(fù)檢率。以評價此復(fù)檢規(guī)則是否可行。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理數(shù)據(jù)采用SPSS11.0統(tǒng)計軟件做統(tǒng)計分析。

2結(jié)果

2.1尿液自動化分析的顯微鏡復(fù)檢規(guī)則UF-500i尿沉渣分析儀和US-200尿干化學(xué)分析儀的檢測結(jié)果，與顯微鏡鏡檢結(jié)果相比較，如果均為陰性或均為陽性而且陽性量級相當時，結(jié)果的相符性很好，不需要復(fù)檢；下面情況需要復(fù)檢，見表1。

表1　尿液自動化分析的顯微鏡復(fù)檢規(guī)則

注：-表示無該項結(jié)果。

2.2復(fù)檢規(guī)則驗證的結(jié)果評估該復(fù)檢規(guī)則的真假陽性率和真假陰性率及復(fù)檢率見表2。UF-500i檢測尿液有形成分RBC、WBC、CAST、SRC的假陽性率各為7.5%、13.1%、38.1%、29.4%,假陰性率各為0%、0%、7.1%、5.2%。復(fù)檢率42.7%。4個檢測參數(shù)總的假陰性率1.3%(5/380)，滿足復(fù)檢評判標準假陰性率小于5%的要求，且出現(xiàn)假陰性的5例病例里沒有嚴重的、活動性的腎臟疾病。

表2　UF-500i、US-200與顯微鏡檢查尿液各參數(shù)的結(jié)果分析(n)

注：-表示無該項結(jié)果。

3討論

對尿液顯微鏡檢測是最早使用的、公認的尿液有形成分的檢測方法，而尿液檢查流水線的使用大大提高了檢測的速度與效率[2]。由于尿液有形成分的復(fù)雜性、不穩(wěn)定性，尿液沉渣檢查原理的局限性；尿液干反應(yīng)的干擾因素的影響，使尿液的沉渣和干化學(xué)的結(jié)果不匹配，可信性降低，必須要進行尿液沉渣顯微鏡復(fù)檢。為了使UF-500尿沉渣分析儀得到合理應(yīng)用，提高工作效率，并能對異常結(jié)果標準化、規(guī)范化復(fù)檢，最大可能地避免假性的結(jié)果，確定尿液有形成分顯微鏡復(fù)檢規(guī)則是有必要的。

尿液沉渣檢查或干化學(xué)檢查都存在反應(yīng)的指向性和局限性：尿干化學(xué)反應(yīng)里的LEU反應(yīng)是與中性粒細胞反應(yīng)，葡萄糖尿或高比重尿會降低檢驗結(jié)果；尿潛血反應(yīng)對血紅蛋白和肌紅蛋白敏感，高比重尿會降低靈敏度，同時分泌物污染也會造成假陽性。尿蛋白質(zhì)反應(yīng)對多種蛋白質(zhì)呈陽性反應(yīng)，對清蛋白最靈敏，但對于高度緩沖的堿性尿有可能假陽性；尿液沉渣檢查通過流式細胞技術(shù)(FCM)獲得細胞前散射光及前向熒光的強度參數(shù)，從而分析尿液中的有形成分。但儀器設(shè)定的光強度及其在散射圖中的分布區(qū)域是固定的，因此會造成各成分互相交叉，出現(xiàn)假陰陽性。

本研究對380例陽性或潛在陽性的標本進行規(guī)則驗證，經(jīng)分析得出結(jié)論。(1)UF-500i尿沉渣分析與US-200尿干化學(xué)分析結(jié)果相匹配的項目均為陰性或均為陽性且量級相當時，不需要復(fù)檢；(2)UF-500i沉渣分析儀的RBC、WBC假陰性率很低(表2)，當UF-500i測得此兩項為陰性，而干化學(xué)結(jié)果為陽性時，需要鏡檢復(fù)檢鑒別：RBC方面可能尿液中存在過類氧化物酶的物質(zhì)，與血紅蛋白一樣具有相同的氧化色原的作用，從而造成潛血試驗假陽性；WBC方面可能是中性粒細胞破碎引起。(3)UF-500i沉渣分析儀的RBC、WBC為陽性，而干化學(xué)結(jié)果為陰性時，必須復(fù)檢鑒定：RBC方面因素一般是尿液中存在大小形狀與RBC相近的結(jié)晶、細菌團或真菌，如草酸鈣結(jié)晶或非定型結(jié)晶；WBC方面因素一般是尿液中的WBC以淋巴細胞、單核細胞為主，也有可能存在體積較小的SRC。(4)尿液SRC增加，常見于腎小管損壞或尿酸代謝障礙，UF-500i沉渣檢查SRC假陽性率較高，僅次于CAST(表2)，SRC陽性時需要復(fù)檢：引起假陽性的因素多見于聚集的WBC、RBC、SRC。(5)UF-500i沉渣檢查CAST/P.C陽性，不管干化學(xué)檢查的PRO結(jié)果如何，都要復(fù)檢。在尿液的有形成分檢查里，CAST假陽性率最高，為38.1%，造成CAST假陽性的因素有很多： 大量RBC、WBC或細菌成串通過檢測孔時，易被誤判； 大量上皮細胞翻折扭曲通過檢測孔時，易被誤判多，見于女性患者； 某些結(jié)晶堆積類似于CAST[3]；(6)黏液絲易被誤判為透明CAST，當黏液絲大量存在時，其電阻強度和透明CAST接近而導(dǎo)致假陽性[4]，因此，黏液絲陽性且且沉渣與干化學(xué)結(jié)果不匹配時，檢測結(jié)果不可靠，必須復(fù)檢[5-6]；(7)當非定型結(jié)晶、細菌黏附在黏液絲或纖維等類CAST物時，易被誤判為CAST/P.C。同時，由于尿沉渣分析儀不能區(qū)分CAST的種類，凡是提示CAST陽性的標本，都必須顯微鏡鏡檢以明確CAST的類型。

有的尿沉渣分析儀，例如IQ200 ELITE尿液顯微鏡鏡檢系統(tǒng)，采用影像分析術(shù)和自動粒子識別系統(tǒng)原理，儀器將未離心尿液標本，先用CCD數(shù)字攝像機自動捕獲500幅照片，然后進行數(shù)字化圖形分析，與儀器儲存的26 000幅圖像的診斷粒子識別軟件進行比較，最后定量報告尿液12種有形成分的數(shù)量。這種原理得到的結(jié)果，也存在一定的偏差，需要檢驗人員在成像系統(tǒng)里翻查標本的細胞圖像，以確定有形成分的正確歸類。

由此可見，通過建立合理的尿液有形成分分析流水線的復(fù)檢規(guī)則，可以在充分發(fā)揮尿液檢查自動化分析優(yōu)勢的同時，又能指導(dǎo)臨床檢驗操作規(guī)范化、標準化，提高檢驗質(zhì)量。

參考文獻

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DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.13.039

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)13-1842-02

(收稿日期：2016-03-01修回日期：2016-05-10)