曾艷　梁桂云

【摘要】 目的 探討凋亡抑制基因 Livin與宮頸癌前病變及宮頸癌的關系。方法 64例宮頸癌、56例宮頸上皮內(nèi)瘤變和 32例正常宮頸患者作為研究對象。用免疫組織化學 SABC法進行Livin 基因表達檢測， 比較三者之間表達的差異， 探討Livin 表達與正常宮頸、宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌患者的病理相關關系。結(jié)果 宮頸癌、宮頸上皮內(nèi)瘤變及正常宮頸組織中 Livin的表達率分別為70.3%（45/64）、57.1%（32/56）、0（0/32）， 三者比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。Livin在宮頸癌組織與宮頸上皮內(nèi)瘤變組織中的表達率比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。Livin基因表達與宮頸癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及宮頸癌的臨床分期具有相關性（r=0.56、0.52， P<0.05）。Livin基因表達與宮頸癌的病理分型、病理分級、患者年齡無明顯相關性（P>0.05）。結(jié)論 Livin 基因在宮頸癌的發(fā)生中具有抑制腫瘤細胞凋亡的作用， 可以做為宮頸癌診斷及預后的相關指標。

【關鍵詞】 Livin基因；宮頸上皮內(nèi)瘤變；宮頸癌

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.16.070

Livin是近年來發(fā)現(xiàn)的人類凋亡抑制蛋白 （IAP）家族的新成員之一， 認為與腫瘤的發(fā)生、進展及預后有密切聯(lián)系。Livin蛋白能夠與 Caspase蛋白結(jié)合， 抑制細胞凋亡， 對Livin研究在腫瘤發(fā)生、發(fā)展及預后有著重要的作用[1]。本研究擬采用免疫組化方法探討 Livin在宮頸癌組織中及正常宮頸組織中的表達， 并研究其與年齡、組織類型、病理分級、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床生物學行為及預后之間的關系和其臨床意義， 現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取 2004～2012年本院治療的 64例宮頸癌患者， 年齡 35～72歲， 平均年齡 （51.7±6.8）歲， 組織學分型為宮頸鱗癌；臨床分期：Ⅱa期14例， Ⅱb期8例， Ⅲa期42例；病理分型：潰瘍型 8例， 結(jié)節(jié)型16例， 菜花型 24例， 混合型16例。宮頸上皮內(nèi)瘤變患者56例， 另選取 32例正常宮頸組織患者作為對照。

1. 2 實驗方法 切取活組織檢查標本， 用 10%甲醛固定， 石蠟包埋后切片。采用SABC。一抗為兔抗人 Livin多克隆抗體 （武漢博士德公司）， 用 PBS液作為陰性對照。采用免疫組化染色。免疫組化方法參照 SABC試劑盒說明進行， Livin 多克隆抗體按 1∶50 稀釋， 主要試劑為 Livin 多克隆兔抗人抗體， SABC試劑盒 （武漢博士德公司）。

1. 3 評價標準 觀察宮頸上皮組織或?qū)m頸癌組織切片病變位置染色， 參考 Kawasaki 等[2]報道的方法計算各指標表達程度， 依染色程度將陽性信號分為 3類 ：染色強度弱、染色強度強、染色強度中等。

1. 4 統(tǒng)計學方法 采用 SPSS19.0統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以率 （%）表示， 采用 χ2檢驗；相關性采用 Spearman相關分析。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2. 1 Livin表達情況 Livin的陽性表達為棕黃色陽性反應， 在細胞胞漿及少部分胞核也有不同程度著色。宮頸癌、宮頸上皮內(nèi)瘤變及正常宮頸組織中 Livin的表達率分別為70.3%（45/64）、57.1%（32/56）、0（0/32）， 三者比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。Livin在宮頸癌組織與宮頸上皮內(nèi)瘤變組織中的表達率比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。

2. 2 Livin的相關性 Livin基因表達與宮頸癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及宮頸癌的臨床分期具有相關性（r=0.56、0.52， P<0.05）。Livin基因表達與宮頸癌的病理分型、病理分級、患者年齡無明顯相關性 （P>0.05）。

3 討論

Livin是新發(fā)現(xiàn)的人類凋亡抑制蛋白， 同其他凋亡抑制蛋白相似， Livin可通過抑制凋亡抑制通路中 Caspase 3、7的活性， 發(fā)揮抑制腫瘤細胞凋亡的作用， 在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的一些腫瘤組織如乳腺癌、胃腸癌等腫瘤組織中高表達。凋亡抑制蛋白是細胞凋亡抑制因子家族新成員， 它能夠抑制細胞凋亡， 促進腫瘤細胞形成及增長[3]。

本文通過對宮頸癌 Livin基因表達與臨床病理的關系研究表明， 宮頸癌的腫瘤病理分型、病理分級與 Livin基因表達程度無明顯相關關系（P>0.05）；Livin基因表達與宮頸癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及宮頸癌的臨床分期具有相關性（P<0.05）， 說明Livin在宮頸癌的細胞凋亡過程中產(chǎn)生重要抑制作用， 并促進了腫瘤細胞的不斷增殖。對于宮頸良性病變發(fā)展為上皮內(nèi)瘤變的病例， 應密切監(jiān)測 Livin表達情況， 有利于指導臨床早期診斷及早期治療。

在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸癌病例中， 宮頸癌組織中 Livin 高表達， 提示對于宮頸癌組織中 Livin 高表達的病例， 應實施手術、化療、生物治療等綜合治療， 最大程度提高腫瘤生存率。凋亡抑制蛋白 Livin在宮頸癌的演近過程中， 抑制細胞凋亡活動增強， 對其進行檢測可以做為判定宮頸癌發(fā)生及預后的重要指標。目前對 Livin 的研究仍有許多問題尚未闡明， 通過反義阻斷或 Si-RNA技術， 降低 Livin 表達， 能否逆轉(zhuǎn)宮頸癌細胞增殖， 促進腫瘤細胞凋亡， 成為宮頸癌治療的新途徑， 有待進一步研究證實。

總之， Livin 基因在宮頸癌的發(fā)生中具有抑制腫瘤細胞凋亡的作用， 可以做為宮頸癌診斷及預后的相關指標。

參考文獻

[1] Ka H， Hunt JS. Temporal and spatial patterns of expression of inhibitors of apoptosis in human placentas. Am J Pathol， 2003， 163（2）：413-422.

[2] Kawasaki H， Altieri DC， Lu CD， et al. Inhibition of apoptosis by survivin predicts shorter survival rates in colorectal cancer. Cancer Res， 1998， 58（22）：5071-5074.

[3] 吳曉梅， 袁濤. Survivin、Livin、CD44v6在宮頸癌以及癌前病變中的表達及其臨床意義. 中國老年學雜志， 2014， 34（3）：660-662.

[收稿日期：2016-01-26]