王菲++李向飛++李鵬飛

摘要：研究了團(tuán)頭魴幼魚(yú)飼料中維生素B2的最適需求量及維生素B2水平對(duì)團(tuán)頭魴幼魚(yú)生長(zhǎng)性能、體組成、抗氧化功能和腸道消化酶活性的影響。試驗(yàn)采用單因子濃度梯度法，將魚(yú)隨機(jī)分為6組，投喂不同水平的維生素B2，分別為166、2.83、4.29、6.15、8.37、11.28 mg/kg的半純合飼料，每日3次，飽食投喂12周。結(jié)果表明，飼料中維生素B2水平對(duì)團(tuán)頭魴幼魚(yú)餌料系數(shù)、存活率和形體指標(biāo)均無(wú)顯著影響。當(dāng)飼料中維生素B2水平從1.66 mg/kg升至 6.15 mg/kg 時(shí)，團(tuán)頭魴幼魚(yú)的增質(zhì)量率和特定生長(zhǎng)率均顯著增加；當(dāng)維生素水平進(jìn)一步升高時(shí)，則顯著下降。飼料中維生素B2水平對(duì)團(tuán)頭魴幼魚(yú)全魚(yú)的水分、粗蛋白和粗灰分水平均無(wú)顯著影響。團(tuán)頭魴幼魚(yú)全魚(yú)粗脂肪水平在飼料中維生素B2水平由1.66 mg/kg升至6.15 mg/kg時(shí)則顯著升高；當(dāng)維生素B2水平進(jìn)一步升高時(shí)，則顯著下降。當(dāng)飼料中維生素B2水平從1.66 mg/kg升至4.29 mg/kg時(shí)，團(tuán)頭魴幼魚(yú)肝臟中超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶活性和還原型谷胱甘肽的含量，以及腸道淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶活性均顯著升高，當(dāng)維生素B2水平進(jìn)一步升高時(shí)，則顯著下降；丙二醛含量變化趨勢(shì)則與之相反。根據(jù)團(tuán)頭魴幼魚(yú)增質(zhì)量率、肝臟維生素B2沉積量和肝臟D-AAO活性進(jìn)行回歸分析結(jié)果，團(tuán)頭魴幼魚(yú)飼料中維生素B2最適添加量分別為5.21、4.65、6.02 mg/kg。

關(guān)鍵詞：團(tuán)頭魴；維生素B2；生長(zhǎng)性能；體組成；抗氧化；腸道酶活性

中圖分類(lèi)號(hào)： S963.73+1文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號(hào)：1002-1302（2016）05-0319-05

維生素B2，又稱核黃素，是動(dòng)物必需的水溶性維生素之一，參與機(jī)體內(nèi)氧化還原反應(yīng)、細(xì)胞代謝和呼吸鏈反應(yīng)[1]。研究表明，魚(yú)類(lèi)缺乏維生素B2一般會(huì)呈現(xiàn)食欲減退和生長(zhǎng)緩慢的癥狀[2]。鮭屬魚(yú)類(lèi)缺乏維生素B2時(shí)，除了生長(zhǎng)緩慢，眼睛還會(huì)出現(xiàn)畏光、白內(nèi)障、出血及角膜新生血管等癥狀[3-5]，大鱗大麻哈魚(yú)（Oncorhynchus tshawytscha）、虹鱒（Salmo gairdneri）還會(huì)出現(xiàn)體色變深和身體平衡失調(diào)等情況[4，6]；然而，Woodward在虹鱒幼魚(yú)缺乏維生素B2試驗(yàn)中并未發(fā)現(xiàn)以上癥狀，但缺乏維生素B2的幼魚(yú)卻表現(xiàn)出嚴(yán)重的鰭部侵蝕、體色變淺和高死亡率的情況[7]。此外，同種魚(yú)類(lèi)維生素B2的缺乏亦有不同表癥。例如，斑點(diǎn)叉尾（Ietalurus punetaus） 缺乏維生素B2時(shí)會(huì)出現(xiàn)單側(cè)或2側(cè)的白內(nèi)障[8]，Murai等發(fā)現(xiàn)維生素B2的缺乏僅會(huì)導(dǎo)致斑點(diǎn)叉尾生長(zhǎng)遲緩和體長(zhǎng)變短[9]。研究表明，維生素B2缺乏癥具有明顯的特異性，且與魚(yú)類(lèi)的種類(lèi)、生長(zhǎng)階段、環(huán)境、食性等有著密切的聯(lián)系。魚(yú)類(lèi)飼料原料中的維生素B2水平并不能滿足魚(yú)類(lèi)生長(zhǎng)的需要，必須額外添加一定量的維生素B2進(jìn)行補(bǔ)充[1-2]，充分說(shuō)明維生素B2對(duì)魚(yú)類(lèi)生長(zhǎng)的必要性。

Chen等發(fā)現(xiàn)，缺乏維生素B2會(huì)削弱草魚(yú)（Ctenopharyngodon idella）幼魚(yú)鰓部的抗氧化能力[10]；Yates等研究表明，維生素B2可提高大鼠（Rattus norvegicus）的胃腸道功能[11]；Li等也在對(duì)建鯉（Cyprinus carpio var. Jian）的研究中得出，飼料中添加維生素B2會(huì)促進(jìn)其幼魚(yú)消化能力的增強(qiáng)[12]。前人研究指出，魚(yú)類(lèi)的生長(zhǎng)和其抗氧化功能及腸道酶活性密切相關(guān)[10，13]，目前，尚未有文獻(xiàn)直接指明飼料維生素B2水平與團(tuán)頭魴（Megalobrama amblycephala）幼魚(yú)抗氧化功能和腸道酶活性的關(guān)系，因此本試驗(yàn)開(kāi)展團(tuán)頭魴幼魚(yú)營(yíng)養(yǎng)需求相關(guān)方面的研究。

團(tuán)頭魴是中國(guó)重要的草食性淡水經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi)[14]。近年來(lái)，團(tuán)頭魴的養(yǎng)殖量迅速增長(zhǎng)[15]，但針對(duì)團(tuán)頭魴營(yíng)養(yǎng)需求的研究還很有限。目前，團(tuán)頭魴的營(yíng)養(yǎng)需求研究主要集中在三大營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、氨基酸和脂溶性維生素等方面[16-20]，而水溶性維生素的研究尚較缺乏。本試驗(yàn)著重探討了團(tuán)頭魴幼魚(yú)的適宜維生素B2需求量及其對(duì)魚(yú)體抗氧化功能和腸道酶活性的影響，以期為團(tuán)頭魴維生素營(yíng)養(yǎng)需求資料的完善提供理論基礎(chǔ)，并為營(yíng)養(yǎng)飼料配方提供科學(xué)依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)飼料

本試驗(yàn)采用單因子設(shè)計(jì)，配制6組半純合飼料，分別添加維生素B2水平為0、2、4、6、8、10 mg/kg[12]（飼料中維生素B2實(shí)際水平為1.66、2.83、4.29、6.15、8.37、11.28 mg/kg）。試驗(yàn)飼料以進(jìn)口的秘魯魚(yú)粉、酪蛋白和明膠為蛋白源，以豆油和魚(yú)油為脂肪源（按照1 ∶1的比例添加），以玉米淀粉為糖源，以微晶纖維素作為填充物，以羧甲基纖維素鈉為黏結(jié)劑[14]。飼料原料先粉碎，按照配方稱重后將各原料逐級(jí)均勻混合，充分混合后加入一定量的水再混合，然后用小型制粒機(jī)加工成粒徑為2 mm左右的顆粒飼料，常溫風(fēng)干后置于4 ℃冰箱保存?zhèn)溆肹14，16，18]。飼料組成及營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1。

1.2試驗(yàn)團(tuán)頭魴及養(yǎng)殖管理

試驗(yàn)魚(yú)養(yǎng)殖于南京農(nóng)業(yè)大學(xué)浦口試驗(yàn)基地室內(nèi)流水系統(tǒng)中，馴化14 d，其間投喂不含維生素B2的基礎(chǔ)飼料，馴化后挑選體格健壯、規(guī)格整齊、體質(zhì)量為（41.52±0.15）g的幼魚(yú)288尾，隨機(jī)分成6組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)12尾。每日飽食投喂3次（時(shí)間分別在07：30、11：30、16：30），養(yǎng)殖期為12周。試驗(yàn)期間，全程微流水循環(huán)（1.5 L/min），水溫控制在 25～30 ℃，pH值為7.0～7.5，全天24 h充氧。

1.3指標(biāo)測(cè)定方法

1.3.1生產(chǎn)性能統(tǒng)計(jì)和樣本采集養(yǎng)殖結(jié)束后，將魚(yú)饑餓24 h采樣。統(tǒng)計(jì)每缸的尾數(shù)并稱總質(zhì)量，從中隨機(jī)取出6尾魚(yú)逐尾稱質(zhì)量和測(cè)量體長(zhǎng)，其中2尾魚(yú)冰凍保存用以測(cè)定全魚(yú)體組成，另外4尾魚(yú)置于冰盤(pán)上解剖，取出內(nèi)臟團(tuán)稱質(zhì)量。然后，分離出肝臟，用預(yù)冷的0.85%生理鹽水清洗，用濾紙吸干并稱質(zhì)量，將其置于-70 ℃冷凍保存，用于抗氧化功能的測(cè)定；取腸道中段，并用生理鹽水沖洗腸道內(nèi)部清除內(nèi)容物，將其置于-70 ℃冷凍保存，用于腸道酶活性的測(cè)定。

生產(chǎn)性能的計(jì)算公式如下：

增質(zhì)量率（WGR）=（mt-m0）/m0×100%；

特定生長(zhǎng)率（%/d）=[ln（mt）-ln（m0）]/t×100%；

餌料系數(shù)（FCR）=F/（mt-m0）；

肥滿度（CF）=mt（g）/體長(zhǎng)3（cm3）×100%；

肝體比（HSI）=肝臟質(zhì)量（g）/全魚(yú)質(zhì)量（g）×100%；

臟體比（VSI）=內(nèi)臟質(zhì)量（g）/全魚(yú)質(zhì)量（g）×100%；

成活率（SR）=試驗(yàn)結(jié)束時(shí)總尾數(shù)/試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)總尾數(shù)×100%。

式中：m0為魚(yú)體初質(zhì)量，g；mt為魚(yú)體末質(zhì)量，g；F為攝食量，g；t為飼養(yǎng)天數(shù)，d。

1.3.2樣品測(cè)定飼料原料和團(tuán)頭魴幼魚(yú)全魚(yú)概略養(yǎng)分測(cè)定參考AOAC的方法[21]。將飼料和全魚(yú)稱質(zhì)量后置于培養(yǎng)皿中，在（105±2） ℃的烘箱中烘至恒質(zhì)量測(cè)定水分水平。粗蛋白（N×6.25）水平采用全自動(dòng)凱氏定氮儀（FOSS KT260，瑞士）測(cè)定；粗脂肪水平采用索氏抽提法測(cè)定（2050；FOSS Tector）；將樣品置于電爐上炭化后，在馬福爐中于（550±20） ℃ 下灼燒5 h后測(cè)得飼料和全魚(yú)中粗灰分水平；飼料總能采用氧彈測(cè)熱儀（Parr 1281，美國(guó)）測(cè)定。

飼料及團(tuán)頭魴幼魚(yú)肝臟中維生素B2水平參考Callmer等的方法[22]測(cè)定。肝臟組織勻漿液的制備及酶活性的測(cè)定：將肝臟準(zhǔn)確稱質(zhì)量，以1 ∶4（組織 ∶生理鹽水）的比例加入預(yù)冷的生理鹽水后冰浴勻漿，然后于3 000 r/min離心10 min，收集上清液并存放于4 ℃冰箱。待測(cè)肝臟D-氨基酸氧化酶（D-amino acid oxidation，D-AAO）活性參考Woodward的方法[23]進(jìn)行測(cè)定。肝臟超氧化物歧化酶（SOD）活性按照J(rèn)in等描述的方法[24]測(cè)定；還原型谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）水平參照Z(yǔ)hang等的方法測(cè)定[25]；過(guò)氧化氫酶（CAT）活性測(cè)定參考Jiang等的方法測(cè)定[26]。

腸道組織勻漿液的制備及酶活性的測(cè)定：將腸道準(zhǔn)確稱質(zhì)量，按1 ∶9（組織 ∶生理鹽水）加入預(yù)冷生理鹽水后冰浴勻漿，制成20%組織勻漿，然后于3 000 r/min離心10 min，收集上清液并存放于4 ℃冰箱。腸道蛋白酶采用福林-酚法[27]測(cè)定；淀粉酶和脂肪酶活性參考Furné等的方法[28]測(cè)定。

1.4數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0軟件分析，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。先進(jìn)行單因素方差分析，采用Tukey氏法做多重比較分析組間差異顯著程度，顯著水平設(shè)定為P<0.05。

2結(jié)果與分析

2.1飼料維生素B2水平對(duì)團(tuán)頭魴幼魚(yú)生長(zhǎng)性能和形體指標(biāo)的影響

飼料中維生素B2水平量對(duì)團(tuán)頭魴幼魚(yú)餌料系數(shù)、存活率和形體指標(biāo)均無(wú)顯著影響（表2）。當(dāng)飼料中維生素B2水平從1.66 mg/kg升至6.15 mg/kg時(shí)，團(tuán)頭魴幼魚(yú)的增質(zhì)量率和特定生長(zhǎng)率均顯著增加；而當(dāng)維生素水平進(jìn)一步升高時(shí)，又顯著下降。以飼料中維生素B2水平為橫坐標(biāo)，團(tuán)頭魴幼魚(yú)增質(zhì)量率為縱坐標(biāo)進(jìn)行雙折線回歸分析，得出y=4.032 7x+64.532（r=0.978 0）和y=-0.643 2x+88.905（r=0.943 2） 2個(gè)方程式。對(duì)其求解，得出當(dāng)飼料中維生素B2水平為 5.21 mg/kg 時(shí)，團(tuán)頭魴幼魚(yú)有最大增質(zhì)量率（圖1）。

2.2飼料維生素B2水平對(duì)團(tuán)頭魴幼魚(yú)肝臟維生素B2沉積量和D-氨基酸氧化酶活性的影響當(dāng)飼料中維生素B2水平由1.66 mg/kg升至8.37 mg/kg時(shí)，團(tuán)頭魴幼魚(yú)肝臟中維生素B2沉積量顯著增加；當(dāng)維生素B2水平進(jìn)一步升高時(shí)，則無(wú)顯著差異。飼料中維生素B2水平由1.66 mg/kg升至6.15 mg/kg時(shí)，團(tuán)頭魴幼魚(yú)肝臟D-AAO 活性顯著增加；當(dāng)維生素B2水平進(jìn)一步升高時(shí)，則顯著下降（表3）。

2.3飼料維生素B2水平對(duì)團(tuán)頭魴幼魚(yú)全魚(yú)體組成的影響

飼料中維生素B2水平對(duì)團(tuán)頭魴幼魚(yú)全魚(yú)的水分、粗蛋白和粗灰分均無(wú)顯著影響（表4）。當(dāng)飼料中維生素B2水平由1.66 mg/kg升至6.15 mg/kg時(shí)，團(tuán)頭魴幼魚(yú)全魚(yú)粗脂肪含量顯著增加；當(dāng)維生素B2水平進(jìn)一步增加時(shí)，則顯著下降。

2.4飼料維生素B2水平對(duì)團(tuán)頭魴幼魚(yú)肝臟抗氧化功能的影響

當(dāng)飼料中維生素B2水平由1.66 mg/kg升至4.29 mg/kg時(shí)，團(tuán)頭魴幼魚(yú)肝臟中超氧化物歧化酶、還原型谷胱甘肽和過(guò)表4不同維生素B2水平對(duì)團(tuán)頭魴幼魚(yú)全魚(yú)組成的影響

維生素B2水平氧化氫酶都顯著升高；當(dāng)維生素B2水平進(jìn)一步升高時(shí)，則顯著下降。飼料中維生素B2水平由1.66 mg/kg升至 2.83 mg/kg 時(shí)，團(tuán)頭魴幼魚(yú)肝臟丙二醛含量顯著降低；當(dāng)維生素B2水平進(jìn)一步升高時(shí)，則差異不顯著（表5）。

2.5飼料維生素B2水平對(duì)團(tuán)頭魴幼魚(yú)腸道消化酶活性的影響

飼料中維生素B2水平由1.66 mg/kg升至4.29 mg/kg時(shí)，團(tuán)頭魴幼魚(yú)腸道蛋白酶活性顯著升高，當(dāng)維生素B2水平進(jìn)一步升高時(shí)，則差異不顯著；飼料中維生素B2水平由1.66 mg/kg 升至6.15 mg/kg時(shí)，團(tuán)頭魴幼魚(yú)腸道淀粉酶和脂肪酶活性顯著升高，當(dāng)維生素B2水平進(jìn)一步升高時(shí)，淀粉酶活性則差異不顯著，而脂肪酶活性顯著下降（表6）。

3討論與結(jié)論

3.1飼料維生素B2最適需求量

根據(jù)前人研究，有些魚(yú)類(lèi)缺乏維生素B2會(huì)出現(xiàn)眼球出血、畏光等情況[3-5]。Deng等飼喂肉食性魚(yú)類(lèi)雜交鱸（Morone chrysops ♀ × Morone saxatilis ♂） 8周試驗(yàn)中，出現(xiàn)上述缺乏癥[1]。而本試驗(yàn)中，團(tuán)頭魴幼魚(yú)卻并未出現(xiàn)此種癥狀。這可能是由于養(yǎng)殖試驗(yàn)環(huán)境、周期、魚(yú)的種類(lèi)和食性不同所致[1，12]。魚(yú)類(lèi)缺乏維生素B2最為普遍的癥狀便是生長(zhǎng)減緩[3-6]，與本試驗(yàn)結(jié)果一致。當(dāng)飼料中維生素B2水平是1.66 mg/kg 時(shí)，團(tuán)頭魴幼魚(yú)末質(zhì)量、增質(zhì)量率和特定生長(zhǎng)率均最小，與維生素B2水平較多的處理組相比有顯著差異；當(dāng)維生素B2水平達(dá)到6.15 mg/kg時(shí)，末質(zhì)量、增質(zhì)量率和特定生長(zhǎng)率達(dá)到最大值，這可能是由于在此條件下，團(tuán)頭魴幼魚(yú)有較高腸道消化酶活性，從而提高其對(duì)飼料的利用率[29]。根據(jù)團(tuán)頭魴幼魚(yú)增質(zhì)量率和飼料中維生素B2水平進(jìn)行回歸分析，得出團(tuán)頭魴幼魚(yú)維生素B2最適需求量為5.21 mg/kg，比建鯉維生素B2最適需求量4.22 mg/kg[12]偏大，這可能是因?yàn)槠湓囼?yàn)采用的建鯉幼魚(yú)初質(zhì)量在23.39 g左右，比本試驗(yàn)所用的團(tuán)頭魴幼魚(yú)小，而小魚(yú)對(duì)于維生素B2的缺乏較為敏感[1]。

肝臟維生素B2的沉積量也是衡量魚(yú)類(lèi)維生素B2需求量的一個(gè)重要指標(biāo)[30]。通過(guò)對(duì)團(tuán)頭魴幼魚(yú)肝臟維生素B2沉積量進(jìn)行回歸分析，飼料中維生素B2最適添加量為 4.65 mg/kg，與Halver在鮭魚(yú)6～8 mg/kg[30]和Amezaga在虹鱒4.4～11.4 mg/kg[31]中所得的結(jié)果有所差別，這可能是由于魚(yú)的種類(lèi)不同導(dǎo)致肝臟維生素B2沉積量的差異，同時(shí)也證明了維生素B2并不會(huì)在肝臟中累積。除此之外，Woodward在針對(duì)虹鱒的試驗(yàn)中表明，D-AAO活性是衡量其維生素B2需求量一個(gè)更為敏感穩(wěn)定的指標(biāo)[32]，該論斷也在本試驗(yàn)中得到驗(yàn)證。以肝臟D-AAO活性為考量進(jìn)行回歸分析，得出團(tuán)頭魴幼魚(yú)飼料中維生素B2最適添加量為6.02 mg/kg，與 Serrini 在斑點(diǎn)叉尾研究中所得最適需求量為6 mg/kg結(jié)果[33]基本一致，表明團(tuán)頭魴幼魚(yú)維持生理需求的維生素B2水平高于正常生長(zhǎng)需要水平。

生產(chǎn)實(shí)踐中一般推薦以增質(zhì)量率為指標(biāo)，回歸分析所得最適需求量作為考量，但鑒于魚(yú)類(lèi)對(duì)維生素B2的需求量與很多環(huán)境因素相關(guān)[1，14]，且日糧中合理的原料配比可以降低其對(duì)維生素B2的需求量[32]，所以試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)若要應(yīng)用于生產(chǎn)，應(yīng)仔細(xì)考慮生產(chǎn)實(shí)踐與試驗(yàn)條件的差異，并進(jìn)行合理調(diào)整。

3.2飼料維生素B2水平對(duì)團(tuán)頭魴幼魚(yú)全魚(yú)體組成的影響

本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼料中維生素添加量對(duì)團(tuán)頭魴幼魚(yú)全魚(yú)水分、蛋白質(zhì)和灰分均無(wú)顯著影響。根據(jù)以往的研究可知該結(jié)果是合理的，魚(yú)類(lèi)全魚(yú)體組成中，粗蛋白和粗灰分水平與日糧組成并無(wú)直接聯(lián)系，而與其年齡與規(guī)格有關(guān)[34-35]。當(dāng)飼料中維生素B2水平由1.66 mg/kg升至6.15 mg/kg時(shí)，團(tuán)頭魴幼魚(yú)全魚(yú)粗脂肪水平顯著增加，當(dāng)維生素B2水平進(jìn)一步增加時(shí)，則又呈顯著下降趨勢(shì)，這也與Li等在草魚(yú)中所得結(jié)果[12]一致。由前人研究可知，維生素B2確實(shí)與機(jī)體脂肪代謝相關(guān)[2]，但其粗脂肪水平的變化是否因?yàn)榫S生素B2水平變化而直接引起的還有待進(jìn)一步研究。

3.3飼料維生素B2水平對(duì)團(tuán)頭魴幼魚(yú)肝臟抗氧化功能的影響

機(jī)體在呼吸和細(xì)胞代謝過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生氧自由基，當(dāng)氧自由基及代謝過(guò)程副產(chǎn)物過(guò)量時(shí)，機(jī)體會(huì)出現(xiàn)不同程度的氧化損傷[14，36]，及時(shí)清除過(guò)量的自由基可以降低機(jī)體氧化損傷的程度。本試驗(yàn)中當(dāng)維生素B2水平由1.66 mg/kg升至4.29 mg/kg 時(shí)，肝臟MDA含量顯著下降，當(dāng)維生素B2水平進(jìn)一步上升時(shí)，則差異不顯著。表明維生素B2水平的升高可以在一定范圍內(nèi)減弱魚(yú)體遭受自由基攻擊的程度，減輕魚(yú)體的氧化應(yīng)激損傷[36-38]。當(dāng)維生素B2水平由1.66 mg/kg升至4.29 mg/kg時(shí)，肝臟SOD、CAT活性和GSH含量均呈上升趨勢(shì)，并與對(duì)照組差異顯著；而當(dāng)維生素B2水平進(jìn)一步升高時(shí)，則差異不顯著。表明維生素B2水平的升高可以促使CAT活性提高，使之能更好地消除體內(nèi)過(guò)多的過(guò)氧化氫，避免多余自由基的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞免受過(guò)氧化損傷；促使SOD和GSH清除自由基的能力增強(qiáng)，減弱自由基對(duì)魚(yú)體的脅迫程度[36-38]。因此，在飼料中適當(dāng)升高維生素B2水平可以降低MDA含量，提高SOD、CAT活性，增加GSH含量，進(jìn)而提高團(tuán)頭魴幼魚(yú)的抗氧化功能。

3.4飼料維生素B2水平對(duì)團(tuán)頭魴幼魚(yú)腸道消化功能的影響

腸道是魚(yú)類(lèi)進(jìn)行消化吸收的主要場(chǎng)所，尤其對(duì)無(wú)胃魚(yú)類(lèi)來(lái)說(shuō)[12，38]，腸道消化酶參與細(xì)胞腔消化，可在一定程度上反映魚(yú)類(lèi)的消化能力，對(duì)魚(yú)類(lèi)生長(zhǎng)起著重要作用[12，29]。本試驗(yàn)中隨著維生素B2水平的升高，團(tuán)頭魴幼魚(yú)腸道淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶活性也顯著增加，但當(dāng)維生素B2水平進(jìn)一步升高時(shí)，淀粉酶和蛋白酶活性無(wú)顯著差異，表明維生素B2可以在一定范圍內(nèi)提高團(tuán)頭魴腸道消化酶的活性，從而增強(qiáng)其對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化，增加其消化功能，這與Li等對(duì)建鯉的研究結(jié)果[12]一致。本試驗(yàn)中腸道酶活性較高的組也有較好的增質(zhì)量率，進(jìn)一步證明腸道酶活性對(duì)魚(yú)類(lèi)生長(zhǎng)起重要作用[29]。

綜上所述，分別根據(jù)團(tuán)頭魴幼魚(yú)增質(zhì)量率、肝臟維生素B2沉積量和肝臟D-AAO活性進(jìn)行回歸分析，飼料中維生素B2最適添加水平分別為5.21、4.65、6.02 mg/kg，并且在一定范圍內(nèi)添加飼料中維生素B2水平可以顯著提高團(tuán)頭魴幼魚(yú)的抗氧化能力，增強(qiáng)腸道消化功能。

參考文獻(xiàn)：

[1]Deng D F，Wilson R P. The riboflavin requirement of juvenile sunshine bass（Morone chrysops♀×Morone saxatilis♂）[J]. Aquaculture，2003，218：695-701.

[2]National Research Council. Nutrient requirements of fish and shrimp[M]. Washington D C：the National Academies Press，2011.

[3]McLaren B A，Keller E，O'Donnell D J，et al. The nutrition of rainbow trout. 1. Studies of vitamin requirements[J]. Archives of Biochemistry and Biophysics，1947，15：169-178.

[4]Halver J E. Nutrition of salmonids fishes. 4. Water-soluble vitamin requirements of Chinook salmon[J]. The Journal of Nutrition，1957，62：225-243.

[5]Takeuchi L，Takeuchi T，Ogino C. Riboflavin requirements in carp and rainbow trout[J]. Bullentin of the Japanese Society of Scientific Fisheries，1980，46：733-737.

[6]Kitamura S，Suwa T，Ohara S，et al. Studies on vitamin requirements of rainbow trout. 2. The deficiency symptoms of fourteen kinds of vitamins[J]. Bullentin of the Japanese Society of Scientific Fisheries，1967，33：1120-1125.

[7]Woodward B. Symptoms of severe riboflavin deficiency without ocular opacity in rainbow trout（Salmo gairdneri）[J]. Aquaculture，1984，39：275-281.

[8] Dupree H K. Vitamins essential for growth of channel catfish，Ietalurus punetaus：Technical Paper No. 7 [R]. Washington D C：U. S. Bureau of Sport Fisheries and Wildlife，1966：7.

[9]Murai T，Andrews J W. Riboflavin requirement of channel catfish fingerlings[J]. The Journal of Nutrition，1978，108（9）：1512-1517.

[10]Chen L，F(xiàn)eng L，Jiang W D，et al. Dietary riboflavin deficiency decreases immunity and antioxidant capacity，and changes tight junction proteins and related signaling molecules mRNA expression in the gills of young grass carp （Ctenopharyngodon idella）[J]. Fish & Shellfish Immunology，2015，45（2）：307-320.

[11]Yates C A，Evans G S，Pearson T，et al. Absence of luminal riboflavin disturbs early postnatal development of the gastrointestinal tract[J]. Digestive Diseases and Sciences，2003，48（6）：1159-1164.

[12]Li W，Zhou X Q，F(xiàn)eng L，et al. Effect of dietary riboflavin on growth，feed utilization，body composition and intestinal enzyme activities of juvenile Jian carp （Cyprinus carpio var. Jian）[J]. Aquaculture Nutrition，2010，16（2）：137-143.

[13]Hakim Y，Uni Z，Hulata G，et al. Relationship between intestinal brush border enzymatic activity and growth rate in tilapias fed diets containing 30% or 48% protein[J]. Aquaculture，2006，257（1/2/3/4）：420-428.

[14]Qian Y，Li X F，Sun C X，et al. Dietary biotin requirement of juvenile blunt snout bream，Megalobrama amblycephala[J]. Aquaculture Nutrition，2014，20（6）：616-622.

[15]農(nóng)業(yè)部漁業(yè)局. 中國(guó)漁業(yè)年鑒[M]. 北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2013：31-32.

[16]Li X F，Liu W B，Jiang Y Y，et al. Effects of dietary protein and lipid levels in practical diets on growth performance and body composition of blunt snout bream（Megalobrama amblycephala） fingerlings[J]. Aquaculture，2010，303：65-70.

[17]Zhou Z，Ren Z，Zeng H，et al. Apparent digestibility of various feedstuffs for blunt snout bream，Megalobrama amblycephala[J]. Aquaculture Nutrition，2008，14：153-165.

[18]姜雪姣，梁丹妮，劉文斌，等. 團(tuán)頭魴對(duì)8種非常規(guī)飼料原料中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率[J]. 水產(chǎn)學(xué)報(bào)，2011，35（6）：932-939.

[19]劉梅珍，石文雷，朱晨煒，等. 飼料中脂肪的含量對(duì)團(tuán)頭魴魚(yú)種生長(zhǎng)的影響[J]. 水產(chǎn)學(xué)報(bào)，1992，16（4）：330-336.

[20]周明，劉波，戈賢平，等. 飼料維生素E添加水平對(duì)團(tuán)頭魴生長(zhǎng)性能及血液和肌肉理化指標(biāo)的影響[J]. 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2013，25（7）：1488-1496.

[21]Association of Official Analytical Chemists. Official methods of analysis[M]. Washigton D C：AOAC，1980.

[22]Callmer K，Davies L. Separation and determination of vitamin B1，B2，B6 and nicotinamide in commercial vitamin preparations using high performance cation-exchange chromatography[J]. Chromatographia，1974，7：644-650.

[23]Woodward B. Riboflavin requirement for growth，tissue saturation and maximal flavin-dependent enzyme activity in young rainbow trout（Salmo gairdneri）at two temperatures[J]. The Journal of Nutrition，1985，115：78-84.

[24]Jin Y，Tian L X，Zeng S L，et al. Dietary lipid requirement on non-specific immune responses in juvenile grass carp （Ctenopharyngodon idella）[J]. Fish & Shellfish Immunology，2013，34（5）：1202-1208.

[25]Zhang X D，Zhu Y F，Cai L S，et al. Effects of fasting on the meat quality and antioxidant defenses of market-size farmed large yellow croaker （Pseudosciaena crocea）[J]. Aquaculture，2008，280（1/2/3/4）：136-139.

[26]Jiang W D，F(xiàn)eng L，Liu Y，et al. Myo-inositol prevents oxidative damage，inhibits oxygen radical generation and increases antioxidant enzyme activities of juvenile Jian carp （Cyprinus carpio var. Jian）[J]. Aquaculture Research，2009，40（15）：1770-1776.

[27]Lowry O H，Rosebrough N J，F(xiàn)arr A L，et al. Protein measurement with the Folin phenol reagent[J]. The Journal of Biological Chemistry，1951，193（1）：265-275.

[28]Furné M，Hidalgo M C，López A，et al. Digestive enzyme activities in Adriatic sturgeon Acipenser naccarii and rainbow trout Oncorhynchus mykiss：a comparative study[J]. Aquaculture，2005，250（1/2）：391-398.

[29]Hakim Y，Uni Z，Hulata G，et al. Relationship between intestinal brush border enzymatic activity and growth rate in tilapias fed diets containing 30 or 48 protein[J]. Aquaculture，2006，257（1/2/3/4）：420-428.

[30]Halver J E. The vitamins[M]//Halver J E. Fish nutrition. 3nd ed. New York：Academic Press，2002：66-98.

[31]Amezaga M R，Knox D. Riboflavin requirements in on-growing rainbow trout，Oncorhynchus mykiss[J]. Aquaculture，1990，88：87-98.

[32]Woodward B. Sensitivity of hepatic D-amino acid oxidase and glutathione reductase to the riboflavin status of the rainbow trout（Salmo gairdneri）[J]. Aquaculture，1983，34：193-201.

[33]Serrini G，Zhang Z，Wilson R P. Dietary riboflavin requirement of fingerling Channel catfish（Ictalurus punctatus）[J]. Aquaculture，1996，139：285-290.

[34]Woodward B. Dietary vitamin requirements of cultured young fish，with emphasis on quantitative estimates for salmonids[J]. Aquaculture，1994，124：133-168.

[35]Lanari D，Poli B M，Ballestrazzi R. The effects of dietary fat and NFE levels on growing European sea bass（Dicentrarchus labrax L.）：Growth rate，body and fillet composition，carcass traits and nutrient retention efficiency[J]. Aquaculture，1999，179：351-364.

[36]Lackner R. Oxidative stress in fish by environmental pollutants[J]. Fish Ecotoxicology，1998，86：203-224.

[37]韓雨哲，姜志強(qiáng)，任同軍，等. 氧化魚(yú)油與棕櫚油對(duì)花鱸肝臟抗氧化酶及組織結(jié)構(gòu)的影響[J]. 中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)，2010，17（4）：798-806.

[38]錢(qián)妤，孫存鑫，劉文斌，等. 飼糧生物素水平對(duì)團(tuán)頭魴幼魚(yú)腸道消化酶活性、胴體組成及肝臟抗氧化能力的影響[J]. 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2014，26（2）：309. 314.周西，詹政軍，季亞培，等. 餌料種類(lèi)對(duì)黃顙魚(yú)仔稚魚(yú)不同階段生長(zhǎng)和存活的影響[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2016，44（5）：324-327.