任煒煒，嚴(yán)　羽，殷曉威，蔣衛(wèi)民

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血脂康膠囊對高脂喂養(yǎng)大鼠內(nèi)臟脂肪及代謝指標(biāo)的影響

任煒煒1，嚴(yán)羽1，殷曉威1，蔣衛(wèi)民2

1．南京中醫(yī)藥大學(xué)(南京 210000)；2.南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院

江蘇省自然科學(xué)基金資助課題(No.BK20131456)；江蘇省中醫(yī)藥局資助課題(No.LZ13030)；江蘇高校優(yōu)勢學(xué)科建設(shè)工程資助項目(No.PAPD)

摘要：目的 探討血脂康膠囊對高脂喂養(yǎng)大鼠內(nèi)臟脂肪及代謝指標(biāo)的影響。方法 選擇6周齡健康雄性Wistar大鼠36只，隨機(jī)分為對照組(n=12)組和高脂組(n=24)，分別飼以基礎(chǔ)飼料和高脂飼料，高脂組大鼠再隨機(jī)分成兩組：高脂模型組(n=12)和血脂康組(n=12)，分別給予等劑量0.5%纖維素鈉安慰劑和血脂康300 mg/(kg·d)灌胃，共觀察12周后，檢測各組大鼠附睪、腎周脂肪等內(nèi)臟脂肪重量，計算體脂比，同時檢測各組大鼠空腹血糖、胰島素、總膽固醇、三酰甘油，計算胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)。結(jié)果高脂喂養(yǎng)組大鼠12周后的體重和附睪、腎周脂肪重量及體脂比均顯著高于正常對照組(P<0.01)，血脂康組雖較正常對照組大鼠也有增加(P<0.05)，但仍顯著低于高脂喂養(yǎng)組大鼠(P<0.01)；高脂喂養(yǎng)組大鼠空腹血糖、空腹胰島素、總膽固醇、三酰甘油及HOMA-IR均顯著高于正常對照組大鼠(P<0.01)。血脂康組空腹血糖高于正常對照組(P<0.01)，空腹胰島素和HOMA-IR與正常對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，而較高脂喂養(yǎng)組顯著降低(P<0.05)；總膽固醇、三酰甘油雖較正常對照組有明顯增加(P<0.05或P<0.01)，但也顯著低于高脂喂養(yǎng)組(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論 血脂康膠囊干預(yù)可以有效減少高脂喂養(yǎng)大鼠內(nèi)臟脂肪聚集，從而顯著改善糖脂代謝異常和胰島素抵抗。

關(guān)鍵詞：代謝紊亂；血脂康膠囊；內(nèi)臟脂肪；空腹血糖；空腹胰島素；血脂

肥胖、糖尿病、脂代謝異常是心血管疾病的重要危險因素，最新國內(nèi)外相關(guān)心血管病治療指南無一不強(qiáng)調(diào)整體心血管風(fēng)險的控制。近年來，由于對脂肪組織認(rèn)識的不斷深入，其已成為改善代謝紊亂的重要靶點，是整體心血管風(fēng)險控制的重要方面。特別是內(nèi)臟脂肪的堆積更易導(dǎo)致胰島素抵抗、糖利用障礙及脂肪分解增加，因此降低內(nèi)臟脂肪聚集成為改善代謝紊亂，抑制動脈粥樣硬化的新熱點[1]。本研究探討中藥血脂康對高脂喂養(yǎng)大鼠內(nèi)臟脂肪及代謝指標(biāo)的影響。

1材料與方法

1.1實驗動物6周齡健康雄性Wistar大鼠36只，體重130 g～210 g，購自南京軍區(qū)南京總醫(yī)院實驗動物中心。

1.2分組及給藥方法按體重隨機(jī)分為對照組(NC，n=12)組和高脂組(HF，n=24)，分別飼以基礎(chǔ)和高脂飼料(美國Research Diet公司，基礎(chǔ)飼料：D12450B；高脂飼料：D12451)。高脂組大鼠隨機(jī)分成兩組：高脂模型組(n=12)和血脂康組(n=12)，分別給予血脂康(北大維信)300 mg/(kg·d)和等劑量0.5%纖維素鈉安慰劑灌胃，共12周。自由攝取食物及飲水。所有大鼠均飼養(yǎng)在溫度16 ℃～24 ℃，12 h人工光照清潔的飼養(yǎng)室內(nèi)，動物的處置均遵循實驗動物看護(hù)原則。

1.3生理和生化指標(biāo)檢測每周監(jiān)測體重(BW)，喂養(yǎng)10周后尾靜脈取血檢測空腹血糖(FBG)、空腹胰島素(FINS)、總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)水平。全血葡萄糖測定采用One Touch Ultra 血糖儀(強(qiáng)生，美國)，血漿胰島素測定采用大鼠胰島素ELISA試劑盒(Mercodia，瑞典)，TC、TG、LDL-C和HDL-C測定采用酶分析法(美國Stanbio Laboratory)。計算胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)=(FBG×FINS)/22.5，評價大鼠的胰島素敏感性。12周后給予大鼠1%戊巴比妥鈉腹腔麻醉，迅速分離附睪脂肪及腎周脂肪，稱取脂肪重量。體脂比=[(附睪脂肪重量+腎周脂肪重量)/體質(zhì)量]×100%。

2結(jié)果

2.1血脂康膠囊對高脂喂養(yǎng)大鼠體重及內(nèi)臟脂肪含量的影響基線時3組大鼠體重差異無統(tǒng)計學(xué)意義，12周后高脂喂養(yǎng)組大鼠體重較正常對照組顯著增加(P<0.01)，血脂康組大鼠體重較正常對照組明顯增加(P<0.05)，但顯著低于高脂喂養(yǎng)組(P<0.05)；高脂喂養(yǎng)組大鼠附睪及腎周脂肪重量顯著高于正常對照組(P<0.01)，血脂康組大鼠附睪及腎周脂肪重量較正常對照組大鼠也有增加(P<0.05)，但仍顯著低于高脂喂養(yǎng)組大鼠(P<0.01)；高脂喂養(yǎng)組和血脂康組體脂比均顯著高于正常對照組大鼠(P<0.01)，但血脂康組也顯著低于高脂喂養(yǎng)組(P<0.01)。詳見表1。

表1　血脂康對高脂喂養(yǎng)大鼠體重及內(nèi)臟脂肪含量的影響(±s)

2.2血脂康膠囊對高脂喂養(yǎng)大鼠糖脂代謝的影響12周后，高脂喂養(yǎng)組大鼠空腹血糖、空腹胰島素和總膽固醇、三酰甘油均顯著高于正常對照組(P<0.01)，HOMA-IR也顯著高于正常對照組(P<0.01)，提示高脂喂養(yǎng)組大鼠存在較為顯著的糖、脂代謝異常和胰島素抵抗。血脂康組空腹血糖高于正常對照組(P<0.01)，但空腹胰島素、HOMA-IR與正常對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，而較高脂喂養(yǎng)組顯著降低(P<0.05或P<0.01)；總膽固醇、三酰甘油雖較正常對照組有明顯增加(P<0.05或P<0.01)，但顯著低于高脂喂養(yǎng)組(P<0.05或P<0.01)，提示血脂康膠囊干預(yù)可以明顯改善高脂喂養(yǎng)大鼠糖脂代謝異常和胰島素抵抗。詳見表2。

表2　血脂康對高脂喂養(yǎng)大鼠糖脂代謝的影響(±s)

3討論

人體的脂肪組織一般占體重的21%，在肥胖/超重者、年長者和女性中的含量更高[2]，根據(jù)脂肪組織儲存部位不同可分為皮下脂肪(subcutaneous adipose tissue，SAT)與內(nèi)臟脂肪(visceral adipose tissue，VAT)，按照性質(zhì)不同還可分為白色脂肪和棕色脂肪及近年來有學(xué)者提出的淺棕色脂肪等。不同部位及性質(zhì)的脂肪組織在形態(tài)學(xué)和功能學(xué)上均存在明顯差異[3]。既往研究認(rèn)為脂肪組織僅是儲能器官，而近年來的研究顯示脂肪組織更是重要的內(nèi)分泌器官，可通過其分泌因子如脂肪因子、炎癥因子、棕色化因子等調(diào)控周圍器官的功能而與代謝及心血管疾病等密切相關(guān)[4-5]。

脂肪細(xì)胞的大小及功能與脂肪組織的分布密切聯(lián)系，內(nèi)臟脂肪組織(臟器周圍)細(xì)胞體積明顯較皮下脂肪細(xì)胞大[6]。擴(kuò)張的脂肪組織，因血液供應(yīng)減少，引起脂肪細(xì)胞中細(xì)胞器如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體的氧化應(yīng)激功能障礙，且VAT細(xì)胞脂肪分解活動強(qiáng)于SAT細(xì)胞，從而分泌大量炎性物質(zhì)和游離脂肪酸，如瘦素、脂聯(lián)素、抵抗素、白介素-6、內(nèi)脂素、腫瘤壞死因子等，在動脈粥樣硬化及其相關(guān)疾病(胰島素抵抗、代謝綜合征、糖尿病等) 的進(jìn)程中起重要作用[7]。在Framingham 研究中發(fā)現(xiàn)，使用腹部CT掃描測量腹部脂肪體積，在校正了年齡、性別、體重指數(shù)和腰圍之后，腹部脂肪體積與心血管疾病發(fā)病率相關(guān)，但在多變量分析時這一因素減弱[8]。一項來源于多種族，以概率為基礎(chǔ)的隊列研究顯示腹膜后脂肪與高血壓的相關(guān)性最強(qiáng)[9]。國內(nèi)一項研究也證實腹部脂肪分布與2型糖尿病病人胰島素抵抗關(guān)系密切[10]。由于脂肪組織的儲存部位和形式與代謝綜合征、糖尿病、心血管疾病等關(guān)系密切。因此，降低VAT聚集對于改善肥胖和減輕胰島素抵抗有著重要意義，也成為心血管風(fēng)險控制的新靶點。劉亞軍等[11]采用18-F脫氧葡萄糖(18F-FDG)正電子發(fā)射斷層掃描(PET)和計算機(jī)斷層掃描(CT)成像技術(shù)發(fā)現(xiàn)，吡格列酮能減少2型糖尿病或IGT病人內(nèi)臟脂肪量及其代謝活性。阿托伐他汀也被證實能減少代謝綜合征病人的腹內(nèi)脂肪厚度，并與腎功能的改善具有相關(guān)性[12]?？喙弦掖继崛∥锿ㄟ^抑制肥胖大鼠內(nèi)臟脂肪聚積和附睪脂肪細(xì)胞肥大以及降低空腹血糖濃度發(fā)揮減肥和抗糖尿病作用[13]。

血脂康是以紅曲為原料經(jīng)發(fā)酵加工的中藥制劑，其除含有少量洛伐他汀外，還含有同系列的其他他汀(天然復(fù)合他汀)、脂肪酸、氨基酸及微量元素等有益成分。中國冠心病二級預(yù)防研究(CCSPS研究)已證實其對心血管疾病的治療作用[14]，我們的前期研究也發(fā)現(xiàn)其對糖脂代謝方面的有益作用[15]，本研究進(jìn)一步探討了血脂康對內(nèi)臟脂肪的影響及與其改善代謝指標(biāo)的相關(guān)性，結(jié)果表明：高脂喂養(yǎng)大鼠12周后，附睪脂肪及腎周脂肪等內(nèi)臟脂肪重量較正常對照組顯著增加，同時高脂喂養(yǎng)組空腹血糖、空腹胰島素及總膽固醇、三酰甘油水平也顯著增加，存在明顯的胰島素抵抗及糖脂代謝紊亂，而同時給予血脂康干預(yù)的大鼠其附睪脂肪及腎周脂肪等內(nèi)臟脂肪重量較高脂喂養(yǎng)組顯著降低，同時糖脂代謝也得到顯著改善。提示血脂康膠囊改善糖脂代謝的有益作用可能與其減少內(nèi)臟脂肪聚集有關(guān)。關(guān)于內(nèi)臟脂肪目前研究多集中在內(nèi)臟脂肪與心血管風(fēng)險的相關(guān)性及探討可能機(jī)制等方面，但缺乏針對內(nèi)臟脂肪干預(yù)的有效手段，盡管有少量研究證實他汀類、胰島素增敏劑等對內(nèi)臟脂肪減少的有益作用，但缺乏以臨床終點為目標(biāo)的證據(jù)。血脂康具有廣泛的調(diào)脂、改善糖代謝、抑制炎癥反應(yīng)等綜合作用的優(yōu)勢，已積累了豐富的心血管獲益的循證醫(yī)學(xué)證據(jù)，對血脂康以內(nèi)臟脂肪為干預(yù)靶點，特別是減少內(nèi)臟脂肪聚焦，促進(jìn)脂肪棕色化等方面值得進(jìn)一步深入研究。

參考文獻(xiàn)：

[1]劉瓊，肖新華.皮下脂肪組織與內(nèi)臟脂肪組織[J].國際病理科學(xué)與臨床雜志，2013，33(6)：544-547.

[2]Shen W，Wang Z， Punyanita M， et al． Adipose tissue quantification by imaging methods：a proposed classification[J]．Obes Res，2003，11：5-16．

[3]Hassan M，Latif N，Yacoub M.Adipose tissue：friend or foe? [J].Nature Reviews Cardiology，2012，9(12)：689-702.

[4]Lamacchia O，Nicastro V，Camarchio D，et al． Para and perirenal fat thickness is an independent predictor of chronic kidney disease，increased renal resistance index and hyperuricaemia in type-2 diabetic patients[J]．Nephrol Dial Transplant，2011，26(3)：892-898．

[5]Cherian S，Lopaschuk GD，Carvalho E．Cellular cross-talk between epicardial adipose tissue and myocardium in relation to the pathogenesis of cardiovascular disease[J]．Am J Physiol Endocrinol Metab，2012，303(8)：937-949．

[6]Ibrahim MM．Subcutaneous and visceral adipose tissue：structural and functional differences[J]．Obes Rev，2010，11(1)：11-18．

[7]李康，霍勇.內(nèi)臟脂肪與動脈粥樣硬化[J].中國介入心臟病學(xué)雜志，2014，22(12)：801-802

[8]Ahabadi AA，Massaro JM，Rosito GA，et al．Association of mpericardial fat，intrathoracic fat，and visceral abdominal fat with cardiovascular disease burden：the Framingham Heart Study[J]．Eur Heart J，2009，30：850-856.

[9]Chandra A，Neeland IJ，Berry JD，et al.The relationship of body mass and fat distribution with incident hypertension：observations from the Dallas Heart Study[J].J Am Coll Cardiol，2014，64(10)：997-1002.

[10]王丹彤，彭定瓊.腹部脂肪組織分布與2型糖尿病患者胰島素抵抗的相關(guān)性研究[J].中國糖尿病雜志，2015，23(7)：587-591.

[11]劉亞軍，侯健紅.吡格列酮對2型糖尿病或糖耐量減低患者內(nèi)臟脂肪代謝活性影響的觀察[J].中國糖尿病雜志，2015，23(2)：127-130.

[12]徐興森，閆振成，劉浩宇.阿托伐他汀對代謝綜合征腹內(nèi)脂肪及其腎損害的影響[J].第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報，2008，30(15)：1478-1480.

[13]楊靜玉，王春明，侯悅，等.苦瓜乙醇提取物對肥胖大鼠糖代謝和內(nèi)臟脂肪的影響[J].中草藥，2012，43(10)：2002-2007.

[14]Zhao SP，Lu ZL，Du BM，et al.Xuezhikang，an extract of cholestin，reduces cardiovascular events in type 2 diabetes patients with coronary heart disease：subgroup analysis of patients with type 2 diabetes from China coronary secondary prevention study (CCSPS)[J].Journal of Cardiovascular Pharmacology，2007，49(2)：81-84.

[15]陸鐘鈺，蔣衛(wèi)民，顧萍.血脂康膠囊對db/db小鼠胰島第一時相分泌及β細(xì)胞含量的影響[J].中醫(yī)臨床研究，2014，6(5)：3-5.

(本文編輯郭懷印)

通訊作者：蔣衛(wèi)民，E-mail：jwm0410@163.com

中圖分類號：R589R285.6

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

doi：10.3969/j.issn.1672-1349.2016.11.011

文章編號：1672-1349(2016)11-1218-04

(收稿日期：2015-12-10)