謝文超，李　平，林智海

?

瑞舒伐他汀對急性冠脈綜合征行PCI術(shù)患者的miR-155/SHIP-1信號通路及心血管事件的影響

謝文超，李平*，林智海

玉林市第一人民醫(yī)院心內(nèi)科，廣西 玉林 537000

[摘要]目的探討瑞舒伐他汀對行PCI術(shù)后急性冠脈綜合征(ACS)患者miR-155/SHIP-1信號通路及心血管事件的影響。方法選取我院行PCI的急性冠脈綜合征患者181例，所有患者隨機分為對照組(91例，給予等量生理鹽水)和瑞舒伐他汀組(90例，PCI術(shù)前12 h、2 h分別給予20 mg瑞舒伐他汀)，記錄臨床基線資料。分別于術(shù)前及PCI術(shù)后24 h取外周血，檢測cTnI、IFN-γ、TNF-α、IL-6水平，以及血清miR-155和外周血單核細胞SHIP-1的mRNA表達，檢測調(diào)節(jié)性T細胞(CD4+Foxp3+T)。術(shù)后30 d對患者進行隨訪，記錄出現(xiàn)的嚴重心血管不良事件。結(jié)果與對照組比較，瑞舒伐他汀組患者cTnI、IFN-γ、TNF-α、IL-6和血清miR-155的表達顯著降低，SHIP-1的mRNA相對表達量及CD4+FoxP3+Treg比例增加(P<0.05)。瑞舒伐他汀組患者術(shù)后30 d的嚴重心血管意外事件少于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論PCI術(shù)前使用負荷劑量瑞舒伐他汀能夠降低ACS患者心血管事件的發(fā)生率，其機制可能與抑制miR-155/SHIP-1信號通路活性相關(guān)。

[關(guān)鍵詞]急性冠脈綜合征；瑞舒伐他?。籔CI；miR-155/SHIP-1

0引言

隨著人們生活水平的逐漸提高、飲食結(jié)構(gòu)的不合理、生活節(jié)奏加快以及人口老齡化等因素的影響，我國冠心病(Coronary heart disease，CHD)的患病率和死亡率逐年升高[1-2]，已經(jīng)成為威脅人們健康的嚴重公共衛(wèi)生問題之一[1]。急性冠狀動脈綜合征(Acute coronary syndromes，ACS)是以冠狀動脈粥樣硬化斑塊破裂或侵襲，繼發(fā)完全或不完全閉塞性血栓形成為病理基礎(chǔ)的綜合征，包括急性ST段抬高型心肌梗死、急性非ST段抬高型心肌梗死和不穩(wěn)定型心絞痛。經(jīng)皮冠狀動脈介入治療(Percutaneous coronary intervention，PCI)已廣泛應(yīng)用于ACS的治療[3-5]。目前，miR-155作為理想的標(biāo)志物，對一些臨床疾病的早期診斷、臨床分型、風(fēng)險評估、預(yù)后判斷等方面具有重要作用[6-7]。本研究觀察瑞舒伐他汀對行PCI術(shù)的急性冠脈綜合征患者的血清miR-155及其靶基因SHIP-1及心血管事件的影響，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1資料與方法

1.1研究對象本研究選取2011年9月至2014年12月在我院心內(nèi)科住院的394例PCI術(shù)后患者。入組標(biāo)準：①非ST段抬高型急性冠脈綜合征；②發(fā)病48 h內(nèi)行冠脈造影。排除標(biāo)準：①ST段抬高型急性心肌梗死；②急診行冠脈造影；③嚴重肝腎功能異常；④左心射血分數(shù)<30%；⑤近期有他汀類藥物使用史。最終入選患者181例，所有入選患者均簽署研究相關(guān)知情同意書，并經(jīng)過本院倫理委員會批準。

1.2研究方法入組患者按照入院時間進行編號并隨機分組，所有患者隨機分為對照組(91例，給予等量生理鹽水)和瑞舒伐他汀組(90例，PCI術(shù)前12 h、2 h分別給予20 mg瑞舒伐他汀)。所有患者經(jīng)冠脈造影確診后行PCI術(shù)，術(shù)后給予阿司匹林100 mg/d，氯吡格雷75 mg/d，瑞舒伐他汀10 mg/d。詳細記錄患者的基線資料，分別于術(shù)前及PCI術(shù)后24 h取外周血，采用雙抗體夾心ELISA法檢測cTnI、IFN-γ、TNF-α和IL-6水平，按試劑盒說明書進行操作(所用試劑、試劑盒均購自美國R&D公司)。同時提取血清檢測miR-155、外周血單核細胞SHIP-1的mRNA表達。術(shù)前和術(shù)后24 h，取外周血檢測調(diào)節(jié)性T細胞(CD4+Foxp3+T)。術(shù)后1個月對患者進行隨訪，記錄出現(xiàn)的嚴重心血管不良事件。

2結(jié)果

2.1兩組患者一般情況比較兩組患者在性別、年齡、BMI、高血壓、糖尿病、心肌梗死史、介入史、血脂水平、血肌酐和藥物治療史方面比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表1、表2。

表1　兩組患者性別比例及基礎(chǔ)疾病等比較(例)

表2　兩組患者生化指標(biāo)等比較(mmol/L)

2.2兩組患者行造影及PCI術(shù)相關(guān)情況比較兩組患者在冠心病病變血管(單支、雙支、三支例數(shù))、PCI術(shù)靶血管(左前降支、左旋支等例數(shù))、置入支架數(shù)目、置入支架直徑和長度、藥物洗脫支架和糖蛋白Ⅱb/Ⅲa抑制劑使用方面比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表3、表4。

2.3兩組患者cTnI和相關(guān)炎癥因子的比較PCI術(shù)前兩組患者的cTnI、IFN-γ、TNF-α和IL-6水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；PCI術(shù)后24 h，瑞舒伐他汀組患者的cTnI、IFN-γ、TNF-α和IL-6水平低于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表5。

2.4兩組患者治療前后miR-155/SHIP-1相對表達量的比較PCI術(shù)前，兩組血清miR-155/SHIP-1相對表達量及外周血Tregs比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。而PCI術(shù)后24 h，對照組miR-155高于瑞舒伐他汀組(P<0.05)，SHIP-1低于瑞舒伐他汀組(P<0.05)，瑞舒伐他汀組Tregs分化比例明顯增加(P<0.05)，見表6。

2.5兩組患者嚴重心血管意外情況比較瑞舒伐他汀組出現(xiàn)嚴重心血管意外的例數(shù)少于對照組，兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(19 vs.30，P=0.036)。瑞舒伐他汀組出現(xiàn)心肌梗死、需要血管重建、缺血性中風(fēng)和支架置入術(shù)后血栓形成的例數(shù)略少于對照組，但兩組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表7。

表3　兩組患者冠心病病變血管比較(例)

表4　兩組PCI術(shù)相關(guān)情況比較(例)

表5　兩組患者cTnI和相關(guān)炎癥因子的比較

表6　兩組miR-155/SHIP-1相對表達量及Tregs比較

表7　兩組患者出現(xiàn)嚴重心血管意外比較(例)

3討論

目前經(jīng)皮冠狀動脈介入治療已經(jīng)成為急性冠狀動脈綜合征的主要治療方法之一[3,8]。盡管PCI術(shù)操作相對安全，但是因操作及缺血再灌注損傷引起的心臟標(biāo)志物增高的發(fā)生率為5%～40%，影響患者的預(yù)后[8-9]。因此，如何提高PCI操作的安全性和減少心肌細胞缺血再灌注損傷是研究的熱點之一[10]。

他汀類藥物作為羥甲基戊二酰輔酶A(HMG-CoA)還原酶抑制劑，能夠抑制膽固醇的合成，改善冠心病患者的預(yù)后。近年研究表明，他汀類藥物具有一定的抗炎效果，Link等[11]研究顯示，瑞舒伐他汀能夠引起炎癥細胞的多種改變，如ACS患者的離體細胞、動物模型以及患者的炎癥因子和黏附分子的下降。此外，他汀類藥物對PCI引起的損傷也大有益處。盡管近年來的臨床隨機對照研究發(fā)現(xiàn)，負荷劑量的他汀類藥物能夠減少PCI操作引起的心肌損傷，但這些研究均使用阿托伐他汀[8]。本研究發(fā)現(xiàn)，PCI術(shù)前使用負荷劑量的瑞舒伐他汀，能夠降低嚴重心血管意外的發(fā)生率。目前，關(guān)于他汀類藥物能夠減輕PCI術(shù)后心肌損傷的具體機制尚不清楚。Davignon等[12]研究顯示，其與降脂關(guān)系不大，主要與他汀類藥物的多效性相關(guān)，即與改善炎癥反應(yīng)、血管內(nèi)皮功能、血小板穩(wěn)定性和血栓功能相關(guān)。

MiR-155不僅能夠調(diào)控免疫反應(yīng)，還能夠參與各種炎癥過程。此外，miR-155在激活的免疫細胞中表達增加，并且通過調(diào)節(jié)免疫細胞分化(如Th1和Tregs)和細胞因子(如TNF-α和IL-6等)的分泌參與調(diào)控免疫反應(yīng)。Banerjee等[13]研究發(fā)現(xiàn)，瑞舒伐他汀能夠快速降低ACS患者T細胞引起的炎癥反應(yīng)。本研究中，負荷劑量的瑞舒伐他汀能夠減少ACS患者血清miR-155和炎癥因子(IFN-γ、TNF-α和IL-6)，這可能是減少嚴重心血管意外的相關(guān)機制。SHIP-1作為miR-155作用的靶點，能夠抑制巨噬細胞引起的炎癥反應(yīng)。由于miR-155與SHIP-1 mRNA 3′ 端UTR結(jié)合，當(dāng)miR-155增高時，會引起SHIP-1表達的降低[14]。本研究顯示，瑞舒伐他汀降低miR-155水平而增加SHIP-1的水平。近年研究報道，SHIP-1表達的增加能夠促進Tregs的分化。此外，Ke等[15]在1項小鼠模型研究中也發(fā)現(xiàn)，瑞舒伐他汀預(yù)處理能夠增加Tregs的聚集，減輕炎癥反應(yīng)和心肌細胞損傷。本研究發(fā)現(xiàn)，PCI術(shù)前應(yīng)用瑞舒伐他汀，能夠顯著增加CD4+FoxP3+Treg的比值，提示這可能是其抗炎作用的重要機制。

綜上所述，PCI術(shù)前使用瑞舒伐他汀，能夠降低ACS患者心血管事件的發(fā)生率，其機制可能與抑制miR-155/SHIP-1信號通路活性相關(guān)。

參考文獻：

[1]Wang Z,Dai H,Xing M,et al.Effect of a single high loading dose of rosuvastatin on percutaneous coronary intervention for acute coronary syndromes[J].J Cardiovasc Pharmacol Ther,2013,18(4):327-333.

[2]高閱春,何繼強,姜騰勇,等.冠心病患者冠狀動脈病變嚴重程度與冠心病危險因素的相關(guān)分析[J].中國循環(huán)雜志,2012,27(3):178-181.

[3]Schwartz GG,Bessac L,Berdan LG,et al.Effect of alirocumab,a monoclonal antibody to PCSK9,on long-term cardiovascular outcomes following acute coronary syndromes:rationale and design of the odyssey outcomes trial[J].Am Heart J,2014,168(5):682-689.

[4]洪澤文.非ST段抬高型心肌梗死患者PCI術(shù)前加用曲美他嗪療效的臨床研究[J].實用藥物與臨床,2015,18(9):1122-1125.

[5]李春玲,胡蛟龍,姚暉.兩種給藥方式在急診PCI術(shù)前的臨床比較研究[J].實用藥物與臨床,2015,18(1):28-30.

[6]Guinn D,Ruppert AS,Maddocks K,et al.miR-155 expression is associated with chemoimmunotherapy outcome and is modulated by Bruton′s tyrosine kinase inhibition with ibrutinib[J].Leukemia,2015,29(5):1210-1213.

[7]Iqbal J,Shen Y,Huang X,et al.Global microRNA expression profiling uncovers molecular markers for classification and prognosis in aggressive B-cell lymphoma[J].Blood,2015,125(7):1137-1145.

[8]Tentzeris I,Rohla M,Jarai R,et al.Influence of high-dose highly efficient statins on short-term mortality in patients undergoing percutaneous coronary intervention with stenting for acute coronary syndromes[J].Am J Cardiol,2014,113(7):1099-1104.

[9]Link A,Selejan S,Hewera L,et al.Rosuvastatin induces apoptosis in CD4(+)CD28 (null) T cells in patients with acute coronary syndromes[J].Clin Res Cardiol,2011,100(2):147-158.

[10]Pitt B,Loscalzo J,Ycas J,et al.Lipid levels after acute coronary syndromes[J].J Am Coll Cardiol,2008,51(15):1440-1445.

[11]Link A,Ayadhi T,Bohm M,et al.Rapid immunomodulation by rosuvastatin in patients with acute coronary syndrome[J].Eur Heart J,2006,27(24):2945-2955.

[12]Davignon J.Beneficial cardiovascular pleiotropic effects of statins[J].Circulation,2004,109(23 Suppl 1):III39- III43.

[13]Banerjee A,Schambach F,DeJong CS,et al.Micro-RNA-155 inhibits IFN-gamma signaling in CD4+ T cells[J].Eur J Immunol,2010,40(1):225-231.

[14]Musilova K,Mraz M.MicroRNAs in B-cell lymphomas:how a complex biology gets more complex[J].Leukemia,2015,29(5):1004-1017.

[15]Ke D,Fang J,Fan L,et al.Regulatory T cells contribute to rosuvastatin-induced cardioprotection against ischemia-reperfusion injury[J].Coron Artery Dis,2013,24(4):334-341.

Effect of rosuvastatin on cardiovascular events and miR-155/SHIP-1 signaling pathway in patients with acute coronary syndrome undergoing percutaneous coronary intervention

XIE Wen-chao,LI Ping*,LIN Zhi-hai

(Department of Cardiology,Yulin First People′s Hospital,Yulin 537000,China)

[Abstract]ObjectiveTo investigate the effect of rosuvastatin on cardiovascular events and miR-155/SHIP-1 signaling pathway in patients with acute coronary syndrome (ACS)undergoing percutaneous coronary intervention.MethodsPatients with ACS undergoing PCI (n=181) were randomized into control group (NS treatment,n=91) and rosuvastatin group (rosuvastatin 20 mg was given at 2 h and 12 h before PCI,n=90),and the baseline data of the patients was recorded.Levels of INF-γ,TNF-α,IL-6,miR-155/SHIP-1 and CD4+FoxP3+ Treg in peripheral blood were detected before PCI and at 24 h after PCI.The severe cardiovascular events were recorded at 30 d after PCI.ResultsCompared with control group,the levels of cardiac troponin-I (cTnI),INF-γ,TNF-α and IL-6 and the expression of miR-155 in rosuvastatin group decreased (P<0.05),but SHIP-1 mRNA expression and CD4+FoxP3+ Treg proportion increased (P<0.05).The rate of severe cardiovascular event in patients of rosuvastatin group was lower than that of control group (P<0.05).ConclusionThe loading-dose rosuvastatin pretreatment can reduce the incidence of cardiovascular events and the levels of inflammatory markers in patients with ACS undergoing PCI,which may be related to the suppression of miR-155/SHIP-1 signaling pathway.

Key words：Acute coronary syndrome;Rosuvastatin;Percutaneous coronary intervention;miR-155/SHIP-1

收稿日期：2015-12-14

基金項目：廣西科學(xué)研究與技術(shù)開發(fā)計劃(桂科攻1598012-4)；玉林市科學(xué)研究與技術(shù)開發(fā)計劃(玉科計20141002)

*通信作者

DOI:10.14053/j.cnki.ppcr.201606004