王　莉　蔡　旺

(遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科，遼寧　錦州　121000)

子宮內(nèi)膜癌組織叉頭框轉(zhuǎn)錄因子O亞型3a與基質(zhì)金屬蛋白酶-14表達(dá)水平及相關(guān)性

王莉蔡旺

(遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科，遼寧錦州121000)

〔摘要〕目的檢測(cè)子宮內(nèi)膜癌中叉頭框轉(zhuǎn)錄因子O亞型(FOXO)3a和基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-14的表達(dá)。方法63例行子宮內(nèi)膜癌根治手術(shù)患者作為觀察組，并留取術(shù)后組織，40例子宮內(nèi)膜復(fù)雜性增生患者術(shù)后標(biāo)本作為對(duì)照組，40例增生期子宮內(nèi)膜診刮標(biāo)本作為正常對(duì)照組。采用免疫組化SP法檢測(cè)3組中FOXO3a和MMP-14的表達(dá)。結(jié)果FOXO3a和MMP-14在三組中的表達(dá)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。觀察組中FOXO3a和MMP-14的陽(yáng)性率均與肌層浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)累犯密切相關(guān)，F(xiàn)OXO3a的陽(yáng)性率與腫瘤的最大徑密切相關(guān)。觀察組中FOXO3a和MMP-14的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)性。結(jié)論子宮內(nèi)膜癌中FOXO3a低表達(dá)、MMP-14高表達(dá)對(duì)腫瘤的形成和進(jìn)展可能有促進(jìn)作用，二者具有負(fù)向協(xié)同作用。

〔關(guān)鍵詞〕子宮內(nèi)膜癌；叉頭框轉(zhuǎn)錄因子O亞型(FOXO)3a；基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-14；免疫組化

子宮內(nèi)膜癌病變形成和進(jìn)展中常伴有相關(guān)基因調(diào)節(jié)的失衡。叉頭框轉(zhuǎn)錄因子O亞型(FOXO)3a是叉頭框轉(zhuǎn)錄因子家族的重要成員，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育、細(xì)胞分化、代謝凋亡、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄方面均有一定影響，被認(rèn)為是腫瘤抑制基因〔1，2〕?；|(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-14是MMPs家族的重要成員，是膜型成員中的典型蛋白，可以同時(shí)降解基底膜和細(xì)胞外基質(zhì)成分，對(duì)促進(jìn)轉(zhuǎn)移有一定作用〔3，4〕。本文對(duì)子宮內(nèi)膜癌術(shù)后組織中FOXO3a和MMP-14的表達(dá)特征進(jìn)行檢測(cè)，探討二者的關(guān)系及臨床意義。

1資料與方法

1.1一般資料我院于2013年1月至2015年6月行子宮內(nèi)膜癌根治手術(shù)的患者63例作為觀察組，納入均經(jīng)病理學(xué)確診，并符合WHO中的診斷標(biāo)準(zhǔn)，年齡42～79歲，平均(60.1±8.5)歲。術(shù)前均未進(jìn)行放、化療。40例子宮內(nèi)膜復(fù)雜性增生患者術(shù)后標(biāo)本作為對(duì)照組，年齡38～71歲，平均(57.6±4.6)歲。40例增生期子宮內(nèi)膜診刮標(biāo)本作為正常對(duì)照組，年齡34～56歲，平均(46.5±6.4)歲。

1.2FOXO3a和MMP-14的檢測(cè)應(yīng)用免疫組化SP法檢測(cè)組織中FOXO3a和MMP-14的表達(dá)，操作嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，做好質(zhì)控工作。

1.3FOXO3a和MMP-14的判定FOXO3a染色位于細(xì)胞核，MMP-14染色位于細(xì)胞質(zhì)，均以染成棕黃色為陽(yáng)性細(xì)胞。選擇腺上皮細(xì)胞集中分布且染色較為明顯的區(qū)域進(jìn)行觀察，共選擇3個(gè)400倍視野，計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞百分率，取平均值，均以<10%定為陰性，以≥10%定為陽(yáng)性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SAS6.12統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)、線性相關(guān)分析。

2結(jié)果

2.1三組中FOXO3a和MMP-14表達(dá)陽(yáng)性率的比較正常對(duì)照組、對(duì)照組和觀察組中FOXO3a的表達(dá)有下降趨勢(shì)，而MMP-14的表達(dá)有升高趨勢(shì)。見(jiàn)表1。

2.2觀察組中FOXO3a和MMP-14陽(yáng)性率在不同臨床特征中的比較觀察組中FOXO3a和MMP-14的陽(yáng)性率均與肌層浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)累犯密切相關(guān)，F(xiàn)OXO3a的陽(yáng)性率與腫瘤的最大徑密切相關(guān)。二者的陽(yáng)性率均與分化程度無(wú)關(guān)。見(jiàn)表2。

表1　三組中FOXO3a和MMP-14表達(dá)陽(yáng)性率的

表2　觀察組中FOXO3a和MMP-14陽(yáng)性率在

2.3觀察組中FOXO3a和MMP-14的相關(guān)性觀察組中FOXO3a和MMP-14具有負(fù)相關(guān)性(r=-0.45，P=0.028 6)。

3討論

子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生過(guò)程復(fù)雜，但是其與子宮內(nèi)膜復(fù)雜性增生伴非典型增生密切相關(guān)。伴隨著細(xì)胞的癌變，機(jī)體中存在著基因和蛋白表達(dá)的失平衡。叉尖框基因廣泛存在于從酵母到哺乳類的真核生物中，其中家族的重要成員FOXO3a定位于6號(hào)染色體，編碼673個(gè)氨基酸〔5〕，在抑制腫瘤形成、細(xì)胞增生和代謝、免疫調(diào)節(jié)、抑制血管形成及人體老化等方面均發(fā)揮著重要作用〔6，7〕。FOXO3a是胰島素/PI3K-Akt信號(hào)途徑的直接靶分子，且與多種轉(zhuǎn)錄密切相關(guān)〔8，9〕。郭存存等〔10〕通過(guò)檢測(cè)結(jié)直腸癌中FOXO3a的表達(dá)，認(rèn)為FOXO3a表達(dá)降低與β-catenin異常表達(dá)相關(guān)，認(rèn)為FOXO3a抑制結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展的作用機(jī)制與WNT信號(hào)通路有關(guān)。MMPs是一組結(jié)構(gòu)上具有很大的同源性，并能有效地降解細(xì)胞外基質(zhì)的蛋白質(zhì)，因?yàn)榻Y(jié)構(gòu)中含有金屬離子(主要是鋅和鈣)而得名〔11，12〕。MMP-14是家族中的重要成員，其發(fā)揮作用時(shí)能夠在細(xì)胞的表面對(duì)家族中MMP-2等成員進(jìn)行有效的活化，同時(shí)能反作用于MMP-14，使MMP-14的表達(dá)明顯增高，并形成環(huán)式循環(huán)，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞離開(kāi)原發(fā)部位，形成轉(zhuǎn)移灶〔13，14〕。也有研究顯示MMP-14能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生更多的蛋白溶解酶，并誘導(dǎo)家族中的其他成員活化，進(jìn)而發(fā)揮級(jí)聯(lián)反應(yīng)，起到降解細(xì)胞外基質(zhì)的作用〔15〕。

本實(shí)驗(yàn)提示FOXO3a和MMP-14異常表達(dá)促進(jìn)腫瘤的浸潤(rùn)性生長(zhǎng)，使腫瘤的生物學(xué)行為呈進(jìn)展?fàn)顟B(tài)，腫瘤惡性程度升高。提示FOXO3a低表達(dá)、MMP-14高表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，使腫瘤細(xì)胞呈現(xiàn)高遷移狀態(tài)。FOXO3a低表達(dá)使腫瘤的生長(zhǎng)旺盛，腫瘤細(xì)胞的增殖能力強(qiáng)，細(xì)胞異型大，腫瘤體積增大〔16，17〕。本實(shí)驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)FOXO3a和MMP-14的陽(yáng)性率與分化程度的關(guān)系，提示二者對(duì)腫瘤由幼稚到成熟過(guò)程的調(diào)節(jié)無(wú)明顯影響。FOXO3a和MMP-14二者可能在一定程度上具有負(fù)向協(xié)同作用，即FOXO3a在發(fā)揮抑癌作用的同時(shí)，也對(duì)MMP-14有一定的調(diào)節(jié)。當(dāng)FOXO3a表達(dá)下降后，MMP-14的表達(dá)升高，此時(shí)對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)的降解作用增強(qiáng)，腫瘤細(xì)胞遷移的屏障受到破壞，腫瘤細(xì)胞容易離開(kāi)原發(fā)灶，形成播散〔18，19〕。而當(dāng)MMP14高表達(dá)后，其生物學(xué)功能發(fā)揮的更加明顯，如對(duì)血管生成的促進(jìn)作用、對(duì)凋亡的抑制作用等，此時(shí)腫瘤呈現(xiàn)明顯進(jìn)展?fàn)顟B(tài)〔20〕。

4參考文獻(xiàn)

1Lu M，Ma J，Xue W，etal.The expression and prognosis of FOXO3a and Skp2 in human hepatocellular carcinoma〔J〕.Pathol Oncol Res，2009；15(4)：679-87.

2Shou Z，Lin L，Liang J，etal.Expression and prognosis of FOXO3a and HIF-1α in nasopharyngeal carcinoma〔J〕.J Cancer Res Clin Oncol，2012；138(4)：585-93.

3Yan T，Lin Z，Jiang J，etal.MMP14 regulates cell migration and invasion through epithelial-mesenchymal transition in nasopharyngeal carcinoma〔J〕.Am J Transl Res，2015；7(5)：950-8.

4Timoshenko OS，Gureeva TA，Kugaevskaia EV，etal.Membrane type 1 matrix metalloproteinase (MT1-MMP)and the regulators of its activity as invasive factors in squamous cell cervical carcinomas〔J〕.Biomed Khim，2014；60(6)：683-8.

5裴艷宏，劉坤祥.FOXO3a轉(zhuǎn)錄因子的研究進(jìn)展〔J〕.泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2013；34(4)：318-20.

6Coskun D，Obakan P，Arisan ED，etal.Epibrassinolide alters PI3K/MAPK signaling axis via activating Foxo3a-induced mitochondria-mediated apoptosis in colon cancer cells〔J〕.Exp Cell Res，2015；338(1)：10-21.

7Ceballos MP，Parody JP，Quiroga AD，etal.FoxO3a nuclear localization and its association with β-catenin and Smads in IFN-α-treated hepatocellular carcinoma cell lines〔J〕.J Interferon Cytokine Res，2014；34(11)：858-69.

8Wu J，Tang Q，Zhao S，etal.Extracellular signal-regulated kinase signaling-mediated induction and interaction of FOXO3a and p53 contribute to the inhibition of nasopharyngeal carcinoma cell growth by curcumin〔J〕.Int J Oncol，2014；45(1)：95-103.

9Ni D，Ma X，Li HZ，etal.Downregulation of FOXO3a promotes tumor metastasis and is associated with metastasis-free survival of patients with clear cell renal cell carcinoma〔J〕.Clin Cancer Res，2014；20(7)：1779-90.

10郭存存，孫晉敏，韓文燦，等.結(jié)直腸癌中FOXO3a表達(dá)及其與β-catenin、E-cadherin關(guān)系〔J〕.臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志，2013；29(7)：737-9.

11Jia LF，Wei SB，Mitchelson K，etal.miR-34a inhibits migration and invasion of tongue squamous cell carcinoma via targeting MMP9 and MMP14〔J〕.PLoS One，2014；9(9)：e108435.

12Wang YZ，Wu KP，Wu AB，etal.MMP-14 overexpression correlates with poor prognosis in non-small cell lung cancer〔J〕.Tumour Biol，2014；35(10)：9815-21.

13Wang H，Zhang X，Huang L，etal.Matrix metalloproteinase-14 expression and its prognostic value in cervical carcinoma〔J〕.Cell Biochem Biophys，2014；70(2)：729-34.

14Hong IK，Byun HJ，Lee J，etal.The tetraspanin CD81 protein increases melanoma cell motility by up-regulating metalloproteinase MT1-MMP expression through the pro-oncogenic Akt-dependent Sp1 activation signaling pathways〔J〕.J Biol Chem，2014；289(22)：15691-704.

15Bodnar M，Szylberg L，Kazmierczak W，etal.Differentiated expression of membrane type metalloproteinases (MMP-14，MMP-15)and pro-MMP2 in laryngeal squamous cell carcinoma.A novel mechanism〔J〕.J Oral Pathol Med，2013；42(3)：267-74.

16徐小仙，沈艷敏，錢建華，等.FOXO3a在漿液性卵巢腫瘤中的表達(dá)及臨床意義〔J〕.腫瘤學(xué)雜志，2010；16(9)：735-7.

17趙蕓，應(yīng)用翔，何萍青.FOXO3a在乳腺癌中的研究進(jìn)展〔J〕.中國(guó)癌癥雜志，2009；19(5)：387-9.

18孫晉敏，郭存存，柳紅，等.結(jié)直腸癌組織中FOXO3a與MMP-9的表達(dá)及意義〔J〕.重慶醫(yī)學(xué)，2014；43(1)：35-7.

19Faber A，Sauter A，Hoedt S，etal.Alteration of MMP-2 and-14 expression by imatinib in HPV-positive and-negative squamous cell carcinoma〔J〕.Oncol Rep，2012；28(1)：172-8.

20Janowska-Wieczorek A，Wysoczynski M，Kijowski J，etal.Microvesicles derived from activated platelets induce metastasis and angiogenesis in lung cancer〔J〕.Int J Cancer，2005；113(5)：752-60.

〔2014-11-29修回〕

(編輯苑云杰)

基金項(xiàng)目：遼寧省科技廳自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.2013022034)

通訊作者：蔡旺(1974-)，女，碩士，主治醫(yī)師，主要從事婦科腫瘤及內(nèi)分泌研究。

〔中圖分類號(hào)〕R363.2

〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A

〔文章編號(hào)〕1005-9202(2016)11-2690-02；

doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2016.11.055

第一作者：王莉(1971-)，女，碩士，副教授，主要從事臨床婦產(chǎn)科研究。