王小明，張喜平

(內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院普外科，內(nèi)蒙古 呼和浩特　010050)

Ki-67在乳腺癌病灶中的表達(dá)及其與18F-FDG PET-CT標(biāo)準(zhǔn)化攝取值和腫瘤本底比值的相關(guān)性分析

王小明，張喜平

(內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院普外科，內(nèi)蒙古 呼和浩特010050)

摘要：目的分析Ki-67在乳腺癌病灶中的表達(dá)及其與18F-FDG PET-CT標(biāo)準(zhǔn)化攝取值和腫瘤本底比值的相關(guān)性。方法 選取乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者50例，檢測Ki-67在乳腺癌病灶中的表達(dá)及行PET-CT檢查并計算乳腺癌病灶最大標(biāo)準(zhǔn)化攝取值和最大腫瘤本底比值。結(jié)果50例患者中，36例(72%)Ki-67高表達(dá)，14例(28%)Ki-67低表達(dá)。與低表達(dá)組相比，高表達(dá)組患者最大標(biāo)準(zhǔn)化攝取值、最大腫瘤本底比值較高(P<0.001)。Pearson相關(guān)分析顯示，Ki-67表達(dá)與18F-FDG PET-CT乳腺癌病灶最大標(biāo)準(zhǔn)化攝取值和最大腫瘤本底比值呈正相關(guān)(r=0.425，0.546；P=0.003，0.000)。最大標(biāo)準(zhǔn)化攝取值和最大腫瘤本底比值診斷Ki-67高表達(dá)的ROC曲線下面積分別為0.853、0.904。最大標(biāo)準(zhǔn)化攝取值最佳診斷界值為9.1，此時敏感性為62.3%，特異性為100%；最大腫瘤本底比值最佳診斷界值為13.5，此時敏感性為70.1%，特異性為100%。結(jié)論最大腫瘤本底比值診斷乳腺癌病灶Ki-67高表達(dá)的價值比最大標(biāo)準(zhǔn)化攝取值高，能更好地反映治療效果和判定預(yù)后。

關(guān)鍵詞：乳腺腫瘤;Ki-67抗原;氟脫氧葡萄糖F18;正電子發(fā)射斷層顯像術(shù)

作為臨床上女性常見的惡性腫瘤之一，乳腺癌的發(fā)生、進展及預(yù)后與腫瘤細(xì)胞惡性增殖有一定的關(guān)系[1]。Ki-67抗原屬于與細(xì)胞周期有關(guān)的一種蛋白質(zhì)，常用于評價惡性腫瘤的增值率。Min等[2]研究表明，Ki-67在乳腺癌病灶中的表達(dá)水平與乳腺癌患者的增殖分化、局部浸潤、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及生存期密切相關(guān)。目前在乳腺癌診療中應(yīng)用較成熟的影像學(xué)檢查是18F-FDG PET-CT，其中標(biāo)準(zhǔn)化攝取值常用來評價乳腺癌患者的治療效果及預(yù)后[3]。本研究分析Ki-67在乳腺癌病灶中的表達(dá)及其與18F-FDG PET-CT標(biāo)準(zhǔn)化攝取值和腫瘤本底比值的相關(guān)性。

1資料與方法

1.1一般資料選取2011年12月至2015年12月于內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院普外科診治的乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者50例，均經(jīng)病理學(xué)檢查確診?；颊呔鶠榕?，年齡33～74歲，平均年齡(56.6±11.1)歲，均為單側(cè)病灶。21例患者直徑行乳腺癌改良根治術(shù)，其余29例患者根據(jù)乳腺超聲引導(dǎo)下穿刺活檢決定手術(shù)方式。所有患者在治療前均行18F-FDG PET-CT檢查，其中34例患者PET-CT檢查發(fā)現(xiàn)腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，余16例未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；8例患者發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。乳腺癌分期參考《AJCC癌癥分期手冊》(2010年版)[4]，其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期分別有4例、13例、23例、10例。

1.2檢測乳腺癌病灶中Ki-67所有乳腺癌病灶切除后均檢測Ki-67，步驟包括10%甲醛固定、無水乙醇脫水、用石蠟包埋標(biāo)本及連續(xù)切3 μm厚度切片及行免疫組化染色(Elivison二步法)。乳腺癌病灶Ki-67檢測前還需要使用pH為6的檸檬酸進行高溫高壓修復(fù)。由福建邁新公司生產(chǎn)提供Olympus Dp70圖像采集分析儀、檢測系統(tǒng)、一抗、DAB。采用分析儀對顯微鏡下圖片進行采集和分析。隨機選擇10個高倍鏡視野，將每個高倍鏡視野內(nèi)的陽性細(xì)胞數(shù)量記錄下來，求得平均每個視野的陽性細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞核內(nèi)顯示棕黃色顆粒判斷為陽性細(xì)胞，說明Ki-67蛋白的陽性表達(dá)。Ki-67抗原高表達(dá)是指陽性細(xì)胞超過14%，低表達(dá)是指陽性細(xì)胞小于14%。

1.318F-FDG PET-CT檢查方法我院PCT-CT型號為美國GE公司生產(chǎn)的Discovery LS型，回旋加速器系統(tǒng)為Minitrace型。由我院PCT-CT檢查中心制作18F-FDG追蹤劑，保證放射純度超過95%。所有行PET-CT檢查的乳腺癌患者均禁食4 h以上，檢查前監(jiān)測指尖血糖，保證空腹血糖波動在正常范圍內(nèi)。每位患者體內(nèi)注入3～4.5 MBq·kg-1示蹤劑，床上平躺1 h后開始檢測。調(diào)整PET-CT檢查參數(shù)：120 kV、120 mAs、5 mm層厚及4.25 mm無間隔重建。從顱骨頂部一直掃描至雙側(cè)股骨上段。進行相同掃描范圍的PET檢查，以4 min/床位，6個床位進行，選擇采集模式為2D。采用CT進行重建圖像，經(jīng)非均勻投射衰減校正后，再經(jīng)有序子集迭代法將衰減校正后的圖像進行重建。

1.4分析PEC-CT圖像由2名具有豐富核醫(yī)學(xué)知識經(jīng)驗的主任醫(yī)師對PET和PET-CT圖像進行認(rèn)真閱讀分析。PET-CT顯示的乳腺癌病灶異常濃聚區(qū)域和氣管分叉橫斷面水平的背闊肌的最大標(biāo)準(zhǔn)化攝取值選擇感興趣工具(ROI)進行測定。將最大腫瘤本底比值定義為乳腺癌病灶異常濃聚區(qū)域和氣管分叉橫斷面水平的背闊肌的最大標(biāo)準(zhǔn)化攝取值比值。

2結(jié)果

2.1兩組患者年齡、最大標(biāo)準(zhǔn)化攝取值與最大腫瘤本底比值比較50例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌患者中，36例(72%)患者Ki-67高表達(dá)，納入高表達(dá)組，14例(28%)患者Ki-67低表達(dá)，納入低表達(dá)組。與低表達(dá)組相比，高表達(dá)組患者最大標(biāo)準(zhǔn)化攝取值、最大腫瘤本底比值較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001)。年齡在兩組患者間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。典型病例見圖1。

表1　兩組患者年齡、最大標(biāo)準(zhǔn)化攝取值與最大腫瘤本底比值比較±s

2.2Ki-67表達(dá)與最大標(biāo)準(zhǔn)化攝取值和最大腫瘤本底比值的相關(guān)性分析Pearson相關(guān)分析顯示，Ki-67表達(dá)與18F-FDG PET-CT乳腺癌病灶最大標(biāo)準(zhǔn)化攝取值和最大腫瘤本底比值呈正相關(guān)(r=0.425，0.546；P=0.003，0.000)。見表2。

表2　Ki-67表達(dá)與最大標(biāo)準(zhǔn)化攝取值和最大腫瘤本底比值的相關(guān)性分析

圖148歲女性18F-FDG PET-CT圖像

圖2　兩種指標(biāo)診斷Ki-67高表達(dá)的ROC曲線分析

2.3兩種指標(biāo)診斷Ki-67高表達(dá)的ROC曲線分析以敏感度為縱坐標(biāo)，1-特異性為橫坐標(biāo)繪制ROC的曲線如圖2所示，乳腺癌病灶最大標(biāo)準(zhǔn)化攝取值和最大腫瘤本底比值診斷Ki-67高表達(dá)的最佳診斷界值為9.1、13.5，最大標(biāo)準(zhǔn)化攝取值和最大腫瘤本底比值診斷Ki-67高表達(dá)的ROC曲線下面積分別為0.853、0.904。

2.4兩種指標(biāo)診斷Ki-67高表達(dá)的診斷價值分析乳腺癌病灶最大標(biāo)準(zhǔn)化攝取值最佳診斷界值為9.1，此時敏感性為62.3%，特異性為100%；最大腫瘤本底比值最佳診斷界值為13.5，此時敏感性為70.1%，特異性為100%。

3討論

Ki-67抗原是一種與細(xì)胞增殖密切相關(guān)的非組蛋白核抗原，其半衰期較短，除了不在細(xì)胞周期G0期表達(dá)外，細(xì)胞周期其他時期如G1、S、G2、M期都有Ki-67抗原表達(dá)，因此目前臨床上常用其反映惡性腫瘤的增殖速率[5]，特別是在乳腺癌研究中。Angeline等[6]研究發(fā)現(xiàn)，Ki-67抗原還可作為靶點進行腫瘤的分子靶向治療。本研究結(jié)果顯示，36例(72%)患者Ki-67高表達(dá)，14例(28%)患者Ki-67低表達(dá)，與張偉光等[7]報道的Ki-67高表達(dá)率約67%～79%相符。

Ki-67抗原高表達(dá)與乳腺癌病理類型、臨床分期、雌孕激素受體是否陽性、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、預(yù)后有一定的相關(guān)性[8]，除乳腺癌外，Ki-67還與其他惡性腫瘤的增殖、預(yù)后有關(guān)[9]。本研究通過計算乳腺癌患者行PET-CT檢查時的病灶最大標(biāo)準(zhǔn)化攝取值和最大腫瘤本底比值，分析二者與乳腺癌病灶Ki-67表達(dá)的相關(guān)性，結(jié)果顯示，與低表達(dá)組相比，高表達(dá)組患者最大標(biāo)準(zhǔn)化攝取值、最大腫瘤本底比值較高(P<0.001)。Pearson相關(guān)分析顯示，Ki-67表達(dá)與18F-FDG PET-CT乳腺癌病灶最大標(biāo)準(zhǔn)化攝取值和最大腫瘤本底比值呈正相關(guān)(r=0.425，0.546；P=0.003，0.000)。說明乳腺癌病灶最大標(biāo)準(zhǔn)化攝取值和最大腫瘤本底比值越高，Ki-67表達(dá)也相應(yīng)升高，與Mkaouar等[10]研究結(jié)果一致。通過對乳腺癌患者行18F-FDG PET-CT檢查，測定和計算最大標(biāo)準(zhǔn)化攝取值和最大腫瘤本底比值來間接反映Ki-67的表達(dá)情況，從而初步判定患者的治療效果、復(fù)發(fā)概率及預(yù)后情況，對指導(dǎo)乳腺癌的治療有一定的幫助，特別對已經(jīng)發(fā)生轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)及不容易取得病理活檢的乳腺癌患者[11]。

本研究結(jié)果顯示，最大標(biāo)準(zhǔn)化攝取值和最大腫瘤本底比值診斷Ki-67高表達(dá)的ROC曲線下面積分別為0.853、0.904。最大標(biāo)準(zhǔn)化攝取值最佳診斷界值為9.1，此時敏感性為62.3%，特異性為100%；最大腫瘤本底比值最佳診斷界值為13.5，此時敏感性為70.1%，特異性為100%。說明以9.1、13.5分別作為最大標(biāo)準(zhǔn)化攝取值和最大腫瘤本底比值的最佳診斷界值去預(yù)測乳腺癌Ki-67高表達(dá)的價值較高，特別是最大腫瘤本底比值價值更高，但最大標(biāo)準(zhǔn)化攝取值和最大腫瘤本底比值的比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。其可能原因為本研究例數(shù)較少，若需進一步明確Ki-67表達(dá)與18F-FDG PET-CT乳腺癌病灶最大標(biāo)準(zhǔn)化攝取值和最大腫瘤本底比值的相關(guān)性，需增加研究樣本量，以確保在其他條件不能可靠評價患者是否存在Ki-67高表達(dá)時可選擇最大腫瘤本底比值來替代[12-13]。最大腫瘤本底比值的診斷價值優(yōu)于最大標(biāo)準(zhǔn)化攝取值原因可能為前者消除了本底混雜因素的干擾[14]。

本研究結(jié)果顯示，年齡在Ki-67高表達(dá)組和低表達(dá)組患者間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，年齡與Ki-67表達(dá)沒有相關(guān)性，與朱麗萍等[15]研究結(jié)果相符。其可能原因為乳腺癌病灶的增殖分化與患者的年齡是兩個不同和關(guān)系不大的系統(tǒng)，Ki-67反映的是乳腺癌的自身的增殖能力[16]。

綜上所述，最大腫瘤本底比值診斷乳腺癌病灶Ki-67高表達(dá)的價值比最大標(biāo)準(zhǔn)化攝取值高，能更好地反映乳腺癌的治療效果和判定預(yù)后。

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Expression of Ki-67 in mammary cancer and its correlation with standardized uptake value and tumor to background ratio of18F-FDG PET-CT

WANG Xiao-ming，ZHANG Xi-ping

(DepartmentofGeneralSurgery,TheAffiliatedHospitalofInnerMongoliaMedicalUniversity,Hohhot,InnerMongolia010050，China)

Abstract:ObjectiveTo analyze the expression of Ki-67 in mammary cancer and its correlation with standardized uptake value and tumor to background ratio of18F-FDG PET-CT.Methods Fifty patients with invasive breast ductal carcinoma were selected for the detection of expression of Ki-67 and underwent PET-CT and maximum standardized uptake value and maximum tumor-to-background ratio were calculated.Results Among the 50 patients,Ki-67 was highly expressed in 36 (72.0%) and lowly expressed in 14 (28.0%).Compared with low expression group,patients in high expression group had higher maximum standardized uptake value and maximum tumor-to-background ratio (P<0.001).Pearson correlation analysis showed that Ki-67 expression was positively correlated with the maximum standardized uptake value and the maximum tumor-to-background ratio of breast cancer lesions (r=0.425,0.546;P=0.003,0.000).The area under ROC curve of maximum standardized uptake value and the maximum tumor-to-background ratio in diagnosis of high expression of Ki-67 were 0.853,0.904.The best diagnostic value of maximum standardized uptake value was 9.1;the sensitivity,specificity were 62.3%,100%;the best diagnostic value of maximum tumor-to-background ratio was 13.5;the sensitivity,specificity were 70.1%,100%.ConclusionsThe value of the maximum ratio of tumor-to-background ratio in the diagnosis of breast cancer with high expression of Ki-67 was higher than that of the maximum standardized uptake value and it can better reflect the therapeutic effect and determine the prognosis.

Key words:Breast Neoplasms;Ki-67 Antigen;Fluorodeoxyglucose F18;Positron-Emission Tomography

基金項目：內(nèi)蒙古自治區(qū)自然科學(xué)基金項目(No 2013MS1198)

通信作者：張喜平，女，主任醫(yī)師，碩士生導(dǎo)師，研究方向：乳腺癌的診治，E-mail:YTLD@sina.com

doi:10.3969/j.issn.1009-6469.2016.05.017

(收稿日期：2016-01-21，修回日期：2016-02-29)