李惠平，蔡偉雄，徐錦芳，茹文淵

(惠州市博羅縣人民醫(yī)院檢驗科，廣東惠州 516100)

·論著·

3種血清指標聯合檢測對肝硬化合并細菌性腹膜炎的診斷價值

李惠平，蔡偉雄△，徐錦芳，茹文淵

(惠州市博羅縣人民醫(yī)院檢驗科，廣東惠州 516100)

摘要:目的探討血清中性粒細胞防御素(HNP)、血清降鈣素原(PCT)和單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)聯合檢測在肝硬化合并細菌性腹膜炎患者中的臨床價值。方法將受試者分為肝硬化合并細菌性腹膜炎(SBP組)、無細菌性腹水組(非SBP組)和對照組，采用電化學發(fā)光免疫分析法檢測血清HNP水平，免疫熒光定量法檢測血清PCT和酶聯免疫吸附法檢測血清MCP-1水平，分析聯合檢測與單項檢測的敏感度和特異度，同時分析SBP組患者經抗菌藥物有效治療后其血清HNP、PCT及MCP-1水平變化。結果SBP組血清HNP、PCT及MCP-1水平均顯著上升，與非SBP組和對照組對比，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；經治療后，三者水平均顯著下降；HNP、PCT及MCP-1聯合檢測的敏感度和特異度高于單項檢測，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結論聯合檢測HNP、PCT及MCP-1對于肝硬化合并細菌性腹膜炎患者的早期診斷和療效觀察具有重要的臨床意義。

關鍵詞:細菌性腹膜炎；血清中性粒細胞防御素；降鈣素原；細胞趨化蛋白1；聯合檢測

自發(fā)性細菌性腹膜炎(SBP)是一種肝硬化晚期患者常見的炎癥并發(fā)癥，由于其預后較差，患者一旦發(fā)生SBP可迅速使原發(fā)的肝硬化患者肝臟惡化，發(fā)展為感染性休克或肝功能衰竭。SBP的臨床發(fā)生率為11.0%～26.0%，及時的診斷和治療對于提高肝硬化腹水患者生存率至關重要[1]。由于患者機體反應能力差，大部分肝硬化合并SBP患者早期癥狀并不明顯，不會出現腹痛、腹肌緊張或全身中毒等現象，其常見診斷指標如白細胞計數對于SBP診斷的敏感度不高，而細菌培養(yǎng)作為目前用于SBP診斷最常用的方法，由于其陽性率低且所需時間長，仍無法滿足臨床檢驗的需要[2]。國內外研究顯示，中性粒細胞防御素(HNP)、血清降鈣素原(PCT)和單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)可用于診斷炎癥程度[3-4]，而在鑒別SBP上的診斷尚未有報道。本研究通過聯合檢測86例SBP患者中HNP、PCT及MCP-1的表達水平，探討HNP、PCT及MCP-1聯合檢測在肝硬化合并SBP患者的早期診斷及療效監(jiān)測中的臨床應用價值。

1資料與方法

1.1一般資料選取2013年12月至2015年6月本院確診為肝硬化腹水患者86例，男48例，女38例，平均年齡為(55.6±4.2)歲。其中肝硬化合并細菌性腹膜炎(SBP組)的患者42例，無細菌性腹水組(非SBP組)44例，診斷標準參照2000年全國第十次病毒性肝炎及肝病學術會議修訂的診斷標準，并均通過臨床表現、腹水培養(yǎng)和生化檢查等進行診斷。另選取50名同期來院檢查的健康志愿者作為對照組，其中男30例，女20例，平均年齡為(46.2±9.8)歲。3組患者間年齡、性別等基本臨床參數差異無學意義(P>0.05)，并排除其他部位的感染，檢測前均未使用任何其他抗菌藥物和糖皮質激素。

1.2檢測方法所有患者于入院后第1天采集清晨空腹靜脈血3 mL，經3 000 r/min離心5 min后，取上清至滅菌的EP管中，置于-20 ℃冰箱保存待檢。SBP組患者根據病情選擇合適抗菌藥物進行治療，療程為2～3周。血清HNP檢測采用電化學發(fā)光免疫分析法，PCT檢測采用免疫熒光定量法，MCP-1檢測采用酶聯免疫吸附法，其中PCT>0.5 ng/mL為陽性，HNP>10.0 ng/mL為陽性，MCP-1操作過程均由專業(yè)人員嚴格按照試劑盒說明書進行。

2結果

2.13組受試者血清HNP、PCT及MCP-1水平比較SBP組血清HNP、PCT及MCP-1水平顯著升高，與非SBP組和對照組對比，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；非SBP組MCP-1水平顯著高于對照組(P<0.05)，而HNP和PCT水平差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

表1　3組患者血清HNP、PCT及MCP-1

*：P<0.01，與對照組比較；#：P<0.05，與非SBP組比較。

2.2血清HNP、PCT及MCP-1聯合檢測的敏感度和特異度分析對兩組患者血清HNP、PCT及MCP-1單項檢測和聯合檢測的敏感度和特異度進行分析，見表2。

表2　　血清HNP、PCT及MCP-1單項及聯合檢測的

2.3治療前后3組血清HNP、PCT及MCP-1水平變化SBP患者經抗菌藥物有效治療后，其血請HNP、PCT及MCP-1水平顯著下降，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，說明SBP患者血清HNP、PCT及MCP-1水平與治療療效相關。見表3。

表3　　SBP患者治療前后血清HNP、PCT及MCP-1

3討論

SBP是指無任何臨近組織炎癥情況下發(fā)生的腹膜或者腹水的細菌性感染，與手術引起的腹膜炎不同，SBP是一種有自發(fā)性的炎癥并發(fā)癥，常見于肝硬化患者[5]。肝硬化患者SBP的發(fā)生率較高，如不及時診斷和治療，可發(fā)生休克或肝功能衰竭并導致死亡，因此，SBP的早期診斷十分重要。近年來根據腹水診斷性穿刺和細菌培養(yǎng)結果，以及第3代頭孢菌類抗菌藥物的使用，可將SBP患者病死率降低至30%以下[6]。腹痛、發(fā)熱、嘔吐和腎功能不全等是SBP患者最常見的癥狀，但由于SBP的癥狀和體征常表現不明顯，其早期確診率仍不高。

PCT是降鈣素的一個前肽糖蛋白，產生于甲狀腺C細胞。在非感染性和病毒性感染炎癥中，人血清PCT水平僅輕微升高，而在全身細菌性感染或真菌感染中，血清PCT水平會顯著升高，因此，臨床上常將PCT作為嚴重感染的重要指標之一[7-8]。對肝硬化SBP患者及肝硬化無菌腹水患者的前瞻性研究發(fā)現，當患者血清PCT臨界值為0.75 ng/mL時，SBP的敏感度和特異度可達90.0%和93.0%，而腹水SBP檢測由于檢出率不高，對于SBP的診斷價值不大[9]。黃玲等[10]發(fā)現，血清PCT水平在SBP患者體內顯著升高，且升高的程度與患者受感染嚴重程度具有正相關性，可能的原因是患者體內釋放的炎性細胞可刺激PCT水平的升高。另研究發(fā)現，血清PCT在腹膜透析相關性腹膜炎患者的診斷中是一個良好的指標，在患者接受抗感染治療后，其血清PCT水平顯著降低，且聯合檢測PCT和CRP可進一步提高腹膜炎患者診斷的敏感度和特異度[11]。

MCP-1是活化的淋巴細胞、感染的單核細胞和巨噬細胞最有效的炎癥趨化因子。早期的研究認為，肝硬化患者腹膜中的巨噬細胞由于可產生血管活性肽和一氧化碳，從而對SBP的發(fā)生和發(fā)展具有一定的影響作用[12]。近年來研究表明，肝硬化患者腹水嗜中性粒細胞浸潤與MCP-1的水平具有密切相關性。MCP-1在肝臟損傷中起募集和維持炎性反應的功能，臨床研究表明，SBP患者腹水中MCP-1水平顯著高于肝硬化無菌腹水患者和健康志愿者，而肝硬化無菌腹水患者腹水中MCP-1水平同時也顯著高于健康志愿者[13]，表明MCP-1這種強力的趨化因子在參與SBP生理病理的發(fā)展過程。

HNP是一種廣泛分布生物體內的陽離子抗菌多肽，其抗菌效果具有活性強、免疫原性低和光譜性的特點。在炎性反應中，中性粒細胞嗜天青顆?？上蜓褐嗅尫臜NP，導致HNP水平的上升，當血液中HNP水平上升到一定程度時，可有效且快速地清除多種病原微生物[14-15]。HNP的水平與多種疾病如細菌感染、惡性腫瘤等疾病的發(fā)生發(fā)展和預后具有相關性，國內外研究表明，細菌性感染或膿毒癥患者血漿中HNP高表達[16]。本研究中，SBP組患者血清HNP水平顯著高于非SBP組患者和對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，說明SBP患者體內炎性反應導致HNP水平的升高，再將非SBP患者與對照組比較，其HNP水平差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，說明HNP檢測對于SBP的診斷具有一定價值。

本研究通過對SBP患者血清HNP、PCT及MCP-1水平檢測，并分析聯合檢測對于SBP診斷的臨床價值，結果顯示，SBP組HNP、PCT及MCP-1水平均顯著高于非SBP組和對照組(P<0.05)；非SBP組MCP-1顯著上升，顯著高于對照組(P<0.05)，而HNP及PCT水平與對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。進一步對聯合檢測的敏感度和特異度進行分析發(fā)現，聯合檢測HNP、PCT及MCP-1對肝硬化合并細菌性腹膜炎患者診斷的敏感度和特異度均高于單項檢測。同時，對SBP患者進行有效的抗菌藥物治療后，其血清HNP、PCT及MCP-1水平均顯著降低，與治療前相比，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。因此，聯合檢測HNP、PCT及MCP-1對于肝硬化合并細菌性腹膜炎患者的早期診斷和療效觀察具有重要的臨床意義。

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The clinical significance of combined detection of three kinds of serum indexes for liver cirrhosis patients with bacterial peritonitis

LiHuiping,CaiWeixiongΔ,XuJinfang,RuWenyuan

(DepartmentofClinicalLaboratory,BoluoCountyPeople′sHospital,Huizhou,Guangdong516100,China)

Abstract:ObjectiveTo investigate clinical significance of the combined detection of levels of HNP,PCT and MCP-1 in ascites of liver cirrhosis patients with spontaneous bacterial peritonitis.MethodsPatients were divided into 3 groups,SBP group,non-SBP group and healthy group.The level of HNP was detected by electrochemiluminescent immunoassay,and the levels of PCT and MCP-1 were detected by enzyme-linked immuno sorbent assay (ELISA).The sensitivity and specificity of combined detection were analyzed.Then the changes of HNP,PCT and MCP-1 were also analyzed after treatment in SBP group.ResultsThere were significant difference in the serum levels of HNP,PCT and MCP-1 between SBP group and non-SBP group(P<0.05).And after treatment,the serum levels of HNP,PCT and MCP-1 were all declined.The sensitivity and specificity of combined detection were significantly higher than single detection(P<0.05).ConclusionCombined detection of HNP,PCT and MCP-1 is helpful for liver cirrhosis patients with spontaneous bacterial peritonitis in early diagnosis and monitoring therapy.

Key words:bacterial peritonitis;HNP;PCT;MCP-1;combined detection

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.10.030

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)10-1375-03

(收稿日期：2015-12-14)

作者簡介：張愛民，女，副主任檢驗師，主要從事冠心病患者血脂指標分析方向的研究。