楊麗霞 戎美燕 張曉濤

兒童化膿性中耳炎分泌物細菌培養(yǎng)及藥敏分析

楊麗霞 戎美燕 張曉濤

目的 通過研究本地區(qū)兒童化膿性中耳炎的主要致病菌與耐藥情況，指導(dǎo)臨床合理用藥。方法 對161例兒童化膿性中耳炎的耳分泌物進行細菌培養(yǎng)鑒定與藥物敏感試驗。結(jié)果 161耳膿液標(biāo)本中142耳培養(yǎng)出病原菌，檢出率為88.20%，其中6份檢出2種病原菌，共分離出致病菌148株。其中細菌類138株（93.24%），金黃色葡萄球菌54株（MRSA 17株），肺炎鏈球菌52株，化膿鏈球菌7株，表皮葡萄球菌6株，其它19株；真菌類10株（6.76%）。MRSA對克林霉素、青霉素、紅霉素耐藥率很高，對夫西地酸、慶大霉素、左氧氟沙星、米諾環(huán)素、諾氟沙星耐藥率低，MSSA對青霉素、紅霉素耐藥率高，對其余抗菌藥物的耐藥率較低，二者均未發(fā)現(xiàn)對呋喃妥因、萬古霉素、替考拉寧、利福平、奎奴普丁/達福普汀耐藥的菌株；肺炎鏈球菌對氯霉素、左氧氟沙星、喹奴普汀/達福普汀、萬古霉素敏感，對克林霉素、四環(huán)素、復(fù)方新諾明、紅霉素耐藥。結(jié)論 本地區(qū)兒童化膿性中耳炎的主要致病菌是金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌，臨床醫(yī)生應(yīng)根據(jù)藥敏結(jié)果合理使用抗生素。

兒童；化膿性中耳炎；細菌培養(yǎng)；藥敏分析

兒童化膿性中耳炎是耳科常見病、多發(fā)病之一，多數(shù)患兒經(jīng)積極治療，及時控制感染，鼓膜穿孔可自動愈合而痊愈。若病變嚴(yán)重或治療不當(dāng)，可轉(zhuǎn)為慢性或有并發(fā)癥、后遺癥，給兒童造成永久性聽力障礙。因此對其膿性分泌物作細菌學(xué)分析有重要臨床意義。本研究對161例兒童化膿性中耳炎患者的分泌物進行常規(guī)細菌培養(yǎng)和藥物敏感試驗（部分患兒加做耳分泌物超高倍形態(tài)學(xué)檢查），以便為臨床合理用藥提供科學(xué)依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源 選取2013年8月～2015年4月就診于山西省大同市第一人民醫(yī)院耳鼻喉科診斷為急性化膿性中耳炎的門診患兒耳分泌物161例，其中，男91例，女70例。年齡0～14歲，1～3歲50例，小于1歲84例，最小日齡為5天。就診前均無特殊治療。

1.2 標(biāo)本采集 在普通照明和額鏡下操作，先用75%酒精棉球清潔外耳道皮膚，再用一次性采樣拭子在患者外耳道深部或鼓室內(nèi)取分泌物，并于半小時內(nèi)送至細菌室進行耳分泌物超高倍形態(tài)學(xué)檢查（患兒耳分泌物較少此項檢查未做）、細菌培養(yǎng)及藥物敏感試驗。

1.3 細菌培養(yǎng)與鑒定 所有標(biāo)本分別接種于血平板、巧克力平板、麥康凱平板、沙保羅顯色培養(yǎng)基，使用法國生物梅里埃公司的VITEK 2分析儀進行全自動細菌鑒定與藥敏試驗；部分進行耳分泌物超高倍形態(tài)學(xué)檢查，包括革蘭氏染色、濕片鏡檢、KOH試驗，使用ACT-2000超高倍顯微系統(tǒng)判斷。

2 結(jié)果

2.1 病原菌種類與分布 161耳膿液標(biāo)本中142耳培養(yǎng)出病原菌，檢出率為88.20%，其中6份檢出2種病原菌，共分離出致病菌148株。見表1。其中細菌類138株（93.24%）：金黃色葡萄球菌54株，產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶49株，對苯唑西林耐藥的多重耐藥的金黃色葡萄球菌（methicillin-resistant staphylococcus aureus，MRSA）17株，對苯唑西林敏感的金黃色葡萄球菌(methicillin sensitive staphylococcus aureus，MSSA)37株；肺炎鏈球菌52株；化膿鏈球菌7株；表皮葡萄球菌6株；其它19株。真菌類10株（6.76%）。133耳分泌物做超高倍形態(tài)學(xué)檢查，115耳發(fā)現(xiàn)細菌，5耳發(fā)現(xiàn)真菌，而病原菌培養(yǎng)結(jié)果顯示119耳分泌物培養(yǎng)出病原菌。

表1 148例病原菌分布

2.2 病原菌耐藥情況 主要菌株對常用抗生素的耐藥情況見表2～表4。

表2 主要病原菌藥敏試驗結(jié)果分析（%）

表3 主要病原菌藥敏試驗結(jié)果分析（%）

3 討論

兒童是急性化膿性中耳炎的好發(fā)人群。隨著抗生素的廣泛使用，抗菌譜發(fā)生變化，又由于兒童特殊的生理解剖結(jié)構(gòu)其致病菌與成人有所不同，因此需要及時了解病原菌的分布及耐藥性，合理的選擇有效的抗生素進行治療。由于化膿性中耳炎的常見病原菌為需氧菌[1-2]，故對標(biāo)本只進行了需養(yǎng)菌培養(yǎng)，11.80%的陰性標(biāo)本可能是與厭氧菌感染、取材有關(guān)。

本資料顯示兒童化膿性中耳炎發(fā)病率最高年齡階段為小于1周歲，84例占52.17%；其次為1～3歲50例占本組試驗中31.01%；最后為4～12歲27例占16.77%。主要為3歲以下，這一結(jié)果和文獻報道相近[3-6]。究其原因分析如下：（1）由于小兒咽鼓管短、平、寬，潛藏于鼻咽部的致病菌和分泌物易經(jīng)咽鼓管侵入中耳。（2）小兒抵抗力較差，極易感染各種傳染病，如百日咳、猩紅熱等，致病菌易經(jīng)咽鼓管侵入中耳引發(fā)中耳炎。（3）小兒的中耳免疫功能尚未發(fā)育完全，預(yù)防能力較差。（4）哺乳、飲水方法不當(dāng)引發(fā)嗆咳，乳汁或飲水經(jīng)咽鼓管流入中耳，引發(fā)感染。

本研究結(jié)果表明，引起本地兒童化膿性中耳炎的主要致病菌是金黃色葡萄球菌占到了36.49%，其次是肺炎鏈球菌35.14%，不同于經(jīng)典的小兒急性化膿性中耳炎，90%為溶血性鏈球菌和肺炎雙球菌感染[7]，個別患兒為真菌感染占6.76%，這與陳水安[8]、陳春燕報道相近[9]。MRSA對克林霉素、紅霉素、青霉素的耐藥率均≥82.35%，說明MRSA多重耐藥嚴(yán)重，對其他受試藥的耐藥率為17%～60%，MSSA除對青霉素、紅霉素耐藥率高達86.49%、70.27%，對其余抗菌藥物的耐藥率較低，為0%～28%之間。這說明大多數(shù)抗菌藥物對MSSA具有較好的抗菌活性，而MRSA對大多數(shù)抗菌藥物抗菌活性較差。金黃色葡萄球菌對青霉素的耐藥率最高，只有5株敏感且不產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶，其余都產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶，可以推測其對青霉素的耐藥主要是由于產(chǎn)生了β-內(nèi)酰胺酶所致。MRSA、MSSA對萬古霉素、替考拉寧、利福平、喹奴普汀/達福普汀的敏感率均為100%；肺炎鏈球菌對氯霉素、左氧氟沙星、喹奴普汀/達福普汀、萬古霉素敏感為80.77%以上，對克林霉素、四環(huán)素、復(fù)方新諾明、紅霉素耐藥為82.69%以上，其中紅霉素為100%耐藥；表皮葡萄球菌占病原菌總數(shù)約為4.05%，表皮葡萄球菌屬于凝固酶陽性細菌，為條件改變菌；化膿鏈球菌是另一類常見的細菌，廣泛存在于自然界和人及動物糞便和健康人鼻咽部。表皮葡萄球菌、化膿鏈球菌二者致病考慮幼兒免疫力低導(dǎo)致其治病。真菌藥敏試驗結(jié)果顯示，對于大多數(shù)抗真菌藥物敏感，如5-氟胞嘧啶、兩性霉素B、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑。133耳分泌物做超高倍形態(tài)學(xué)檢查，115耳發(fā)現(xiàn)細菌，5耳發(fā)現(xiàn)真菌，共120耳（占90.23%），而病原菌培養(yǎng)結(jié)果顯示119耳（占89.47%）分泌物培養(yǎng)出病原菌，此結(jié)果表明耳分泌物做超高倍形態(tài)學(xué)檢查對于兒童化膿性中耳炎的初步診斷具有重要意義。

綜上所述，本地區(qū)兒童化膿性中耳炎的主要病原菌為金黃色葡萄球菌與肺炎鏈球菌，其次為化膿鏈球菌與表皮葡萄球菌，個別患兒為真菌感染。了解病原菌分布與藥物敏感性，對降低細菌耐藥性、合理應(yīng)用抗生素、提高化膿性中耳炎療效有重要意義，在檢驗結(jié)果出來之前，可據(jù)耳分泌物超高倍鏡檢大致判斷是細菌還是真菌，若為細菌首選頭孢類藥物，而喹諾酮類、氨基糖苷類、四環(huán)素類、氯霉素、萬古霉素、替考拉寧雖然敏感性較高，但考慮其耳毒性、腎毒性，小兒不宜使用；若有菌絲或孢子為真菌感染，可選擇抗真菌藥，防止使用抗生素加重病情，從而避免誤診。

表4 真菌藥敏試驗結(jié)果分析（%）

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Objective To guide proper clinical medication through analysing the main pathogen and the drug resistant situation of suppurative otitis media of the local children. Methods Making the bacterial culture and antibiotic susceptibility tests with the ear secretion collected randomly of 161 children with suppurative otitis media. Results Among the 161 cases, pathogen were found in 142 cases, as the detectable rate was 88.20%, with that 2 kinds of pathogen were found in 6 cases, and 148 pathogenic germs were separated totally. Among them, 138 were bacterial (93.24%), of 54 staphylococcus aureus (17 multi-drug resistant to oxacillin), 52 streptococcus pneumoniae, 7 streptococcus pyogenes, 6 staphylococcus epidermidis, and 19 others, and 10 were fungi(6.67%).MRSA has a high resistance rate to clidamycin, penicillin and erythrocin, while a low rate to fusidic acid, gentamicin, levof l oxacin, minocycline and norf l oxacin. MSSA has a high resistance rate to penicillin and erythrocin, while a low rate to the other antimicrobial. And there is no found of resistance to macrodantin, vancomycin, teicoplanin, rifampicin, quinupristin/dalfopristin in both of them two. Streptococcus pneumoniae is susceptible to chloramphenicol, levof l oxacin, quinupristin/dalfopristin and vancomycin, while is resistant to clindamycin, tetracycline, sulfamethoxazole and erythromycin. Conclusion The main pathogen of the local children suppurative otitis media are staphylococcus aureus and streptococcus pneumoniae. The clinicians should use antibiotics reasonably according to the antimicrobial susceptibility results.

Child; Suppurative otitis media; Bacterial culture; Drug susceptibility analysis

10.3969/j.issn.1009-4393.2016.1.004

山西 037009 山西省大同市第一人民醫(yī)院耳鼻喉科 （楊麗霞 戎美燕 張曉濤）

楊麗霞 E-mail:945099490@qq.com