羅立 江光榮 周煒

三種不同技術(shù)原理的第3代HIV診斷試劑的臨床檢測(cè)性能對(duì)比

羅立 江光榮 周煒

目的 探析三種不同技術(shù)原理的第3代HIV診斷試劑的臨床檢測(cè)性能。方法 選取接收的51份第3代HIV感染病例為研究資料，將其分為3組：化學(xué)發(fā)光試驗(yàn)組（化學(xué)發(fā)光法）、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)組（酶聯(lián)免疫吸附法）及免疫膠體金組（免疫膠體金法），每組17例。對(duì)比分析3組病例采用第3代HIV診斷試劑的臨床檢測(cè)性能。結(jié)果 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)組的敏感性為82.35%，化學(xué)發(fā)光試驗(yàn)組為94.12%，均優(yōu)于免疫膠體金組的41.18%（P＜0.05）；3組檢測(cè)方法的特異性差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 在第3代HIV診斷試劑的臨床檢測(cè)性能中，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和化學(xué)發(fā)光試驗(yàn)的敏感性和特異性較高，值得推廣和應(yīng)用。

化學(xué)發(fā)光法；酶聯(lián)免疫吸附法；免疫膠體金法；HIV；診斷試劑

艾滋病是一種危害性極大的傳染病，HIV病毒是引發(fā)艾滋感染的主要因素，導(dǎo)致機(jī)體免疫功能下降，死亡率極高[1]。第3代HIV診斷試劑是繼第2代后產(chǎn)生的可縮短HIV病毒感染檢測(cè)窗口期的檢測(cè)試劑[2]，可提高輸血的安全性，且檢測(cè)質(zhì)量較好。本文選取本院接收的51份第3代HIV感染病例資料為研究資料，對(duì)三種不同技術(shù)原理的第3代HIV診斷試劑的臨床檢測(cè)性能對(duì)比效果進(jìn)行評(píng)價(jià)，具體如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年12月～2014年12月宜春市人民醫(yī)院接收的51份第3代HIV感染病例為研究資料，將其分為3組，每組17例?；瘜W(xué)發(fā)光試驗(yàn)組中，男11例，女6例；年齡22～45歲，平均年齡（33.5±1.5）歲。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)組中，男10例，女7例；年齡22～47歲，平均年齡（34.5±1.3）歲。免疫膠體金組中，男12例，女5例；年齡20～45歲，平均年齡（32.5±1.2）歲。3組患者在性別、年齡等方面差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

1.2 方法 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)組給予酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)（上海酶聯(lián)生物生產(chǎn)），按照說(shuō)明書要求進(jìn)行吸附測(cè)定。免疫膠體金組給予免疫膠體金法（DIGFA）檢測(cè)，使用上海金標(biāo)生物科技有限公司生產(chǎn)的免疫膠體金檢測(cè)試劑進(jìn)行測(cè)定?；瘜W(xué)發(fā)光試驗(yàn)組給予化學(xué)發(fā)光法（CLIA）檢測(cè)，使用全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀（北京昊諾斯科技有限公司；型號(hào)：5210450）對(duì)樣本進(jìn)行檢測(cè)，若樣本的檢測(cè)結(jié)果與線性樣本不符，則采用梯度稀釋的方式處理。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 本研究所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，計(jì)數(shù)資料用（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三種檢測(cè)方法的敏感性比較 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)組的敏感性為64.71%，化學(xué)發(fā)光試驗(yàn)組的敏感性為94.12%，免疫膠體金組的敏感性為29.41%，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，3組組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 3組檢測(cè)方法的檢測(cè)敏感度比較（n）

2.2 三種檢測(cè)方法的特異性比較 通過(guò)對(duì)51例HIV陽(yáng)性病毒進(jìn)行檢測(cè)，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢測(cè)假陽(yáng)性2例，特異性為96.08%；化學(xué)發(fā)光試驗(yàn)法無(wú)假陽(yáng)性例數(shù)，特異性為100%；免疫膠體金法檢測(cè)假陽(yáng)性例數(shù)為3例，特異性為94.12%。3組數(shù)據(jù)比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討論

有研究顯示[3]，在患者感染HIV病毒的半個(gè)月內(nèi)，其血液循環(huán)中則會(huì)出現(xiàn)抗HIV抗體，其中絕大部分患者的抗HIV抗體均為陽(yáng)性，因此，抗體檢測(cè)成為HIV感染在診斷和篩查中的重要部分。就檢測(cè)病毒性質(zhì)而言，抗體檢測(cè)主要分為兩部分，其一是篩查試驗(yàn)，其二是確認(rèn)試驗(yàn)[4]；就檢測(cè)技術(shù)而言，抗體檢測(cè)主要包括酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法、化學(xué)發(fā)光法以及免疫膠體金等[5]。

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)仍是現(xiàn)階段臨床檢測(cè)中應(yīng)用范圍較廣的檢測(cè)技術(shù)，尤其是在HIV的臨床檢測(cè)中占據(jù)極其重要的地位。酶聯(lián)免疫吸附法將酶分子與抗體分子充分結(jié)合，不僅不會(huì)改變抗體的免疫學(xué)特性，同時(shí)也不會(huì)影響酶的活性和生物學(xué)特征。在HIV病毒的檢測(cè)過(guò)程中，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法的假陽(yáng)性相對(duì)較小，此種檢測(cè)方法的特異性較高。通過(guò)對(duì)近年來(lái)的臨床報(bào)道和醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)進(jìn)行研究[6]，發(fā)現(xiàn)化學(xué)發(fā)光試劑的陽(yáng)性檢出率較高，化學(xué)發(fā)光試劑是利用化學(xué)發(fā)光劑對(duì)抗原或抗體進(jìn)行標(biāo)記的免疫分析法，可在檢測(cè)過(guò)程中形成有效的激發(fā)態(tài)中間體，當(dāng)此種中間體穩(wěn)定時(shí)，將會(huì)同時(shí)產(chǎn)出定量的產(chǎn)額，對(duì)檢測(cè)結(jié)果具有一定的影響性作用。同時(shí)，假陰性和假陽(yáng)性的現(xiàn)象較少。因此，在HIV病毒檢測(cè)中，化學(xué)發(fā)光試劑法檢測(cè)的特異性較高，具有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值。

檢測(cè)HIV抗體試驗(yàn)是國(guó)際上發(fā)展最早、且應(yīng)用最廣、發(fā)展最快的檢測(cè)技術(shù)，第3代HIV診斷試劑的出現(xiàn)可對(duì)各種類型的HIV抗體進(jìn)行有效性檢測(cè)。研究結(jié)果顯示[7]，第3代HIV診斷試劑所采用的檢測(cè)方法為雙抗原夾心法，在檢查后捕捉到IgM及IgG，長(zhǎng)期存在于機(jī)體內(nèi)的IgG抗體可在兩周左右內(nèi)產(chǎn)生。IgG在抗體檢測(cè)中具有保險(xiǎn)性的作用，與此同時(shí)，IgE、IgD、IgA的敏感性相對(duì)較高，因此可保障酶聯(lián)3代的高檢測(cè)率。第3代檢測(cè)技術(shù)的窗口期在3周左右，可在安全的時(shí)間內(nèi)對(duì)抗體性質(zhì)進(jìn)行確定和最終檢測(cè)，保障在窗口期內(nèi)確診。同時(shí)，第3代檢測(cè)及時(shí)在檢測(cè)過(guò)程中無(wú)需對(duì)樣本進(jìn)行稀釋，實(shí)現(xiàn)了真正意義上的HIV抗體篩查。此外，應(yīng)用第3代檢測(cè)試劑的檢測(cè)特異性較高，因此，在檢 測(cè)過(guò)程中可避免出現(xiàn)假陽(yáng)性多的現(xiàn)象，導(dǎo)致大量的血源被遺棄，減少HIV感染確診的人力、財(cái)力及物力的投入，降低HIV感染的危險(xiǎn)度。除此之外，第3代診斷試劑所包被的抗原基本上是由基因工程組合成的多肽鏈，在樣本選擇上具有極大的包容性，可融合所有抗原成分，擴(kuò)大了有效檢測(cè)面[8]。

本次研究結(jié)果顯示，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)組的敏感性為82.35%，化學(xué)發(fā)光試驗(yàn)組為94.12%，均優(yōu)于免疫膠體金組的41.18%（P＜0.05）；3組檢測(cè)方法的特異性差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法和化學(xué)發(fā)光試驗(yàn)法的檢測(cè)敏感度、特異性更高，免疫膠體金法的陽(yáng)性檢出率相對(duì)較低，因此，前兩種檢測(cè)方法更適用于第3代HIV試劑的臨床檢測(cè)。

綜上所述，在第3代HIV診斷試劑的臨床檢測(cè)性能中，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和化學(xué)發(fā)光試驗(yàn)的敏感性和特異性較高，值得在臨床上進(jìn)一步推廣和應(yīng)用。

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10.3969/j.issn.1009-4393.2016.34.049

江西 336000 宜春市人民醫(yī)院血液科（羅立 江光榮 周煒）