張時民,宋雪冬

(1.中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100730;2.霸州市醫(yī)院檢驗(yàn)科,河北霸州 065700)

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·論著·

健康人群網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)及與成熟紅細(xì)胞參數(shù)的比較研究

張時民1,宋雪冬2

(1.中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100730;2.霸州市醫(yī)院檢驗(yàn)科,河北霸州 065700)

摘要:目的探討網(wǎng)織紅細(xì)胞的某些參數(shù)與成熟紅細(xì)胞相應(yīng)參數(shù)間的關(guān)系。方法應(yīng)用西門子Advia 2120血細(xì)胞分析儀對112例男性和110例女性健康體檢者進(jìn)行多項(xiàng)網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)測定，確認(rèn)參考范圍，并與成熟紅細(xì)胞5項(xiàng)相應(yīng)的參數(shù)進(jìn)行比對分析。結(jié)果納入研究者中，女性的網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比(Retic%)、網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對值(Retic#)、網(wǎng)織紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量(CHr)、網(wǎng)織紅細(xì)胞平均體積(MCVr)的參考范圍分別為0.45%～1.76%、(22～86)×109/L、30.1～36.4 pg、99.5～113.7 fL；男性的這4項(xiàng)參數(shù)的參考范圍分別為0.54%～1.93%、(29～104)×109/L、32.6～36.6 pg、97.6～112.7 fL。網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)男性高于女性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。MCVr明顯大于成熟紅細(xì)胞平均體積，且女性略高于男性；CHr明顯高于成熟紅細(xì)胞的平均血紅蛋白量，而體積較大的網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)的平均血紅蛋白濃度則低于成熟紅細(xì)胞的平均血紅蛋白濃度；網(wǎng)織紅細(xì)胞體積分布寬度低于成熟紅細(xì)胞體積分布寬度；成熟紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白含量的均一性則比網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白含量均一性好。結(jié)論建立了網(wǎng)織紅細(xì)胞一些應(yīng)用較少的參數(shù)的參考范圍并與紅細(xì)胞的相應(yīng)參數(shù)進(jìn)行了分析。

關(guān)鍵詞:網(wǎng)織紅細(xì)胞；血紅蛋白；紅細(xì)胞平均體積；紅細(xì)胞體積分布寬度

網(wǎng)織紅細(xì)胞是未成熟的紅細(xì)胞，雖然已經(jīng)有文獻(xiàn)報(bào)道了不同類型血細(xì)胞分析儀測定網(wǎng)織紅細(xì)胞的參考范圍，但是仍有許多參數(shù)不被了解，如網(wǎng)織紅細(xì)胞平均體積(MCVr)，網(wǎng)織紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量(CHr)，網(wǎng)織紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度(CHCMr)，網(wǎng)織紅細(xì)胞體積分布寬度(RDWr)和網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白含量分布寬度(HDWr)等，特別是這些網(wǎng)織紅細(xì)胞的參數(shù)與成熟紅細(xì)胞之間的關(guān)系未見有報(bào)道。

網(wǎng)織紅細(xì)胞是有核的晚幼紅細(xì)胞脫核后到完全成熟之間的過渡型細(xì)胞。其胞質(zhì)內(nèi)仍然殘存有核糖體、核糖核酸等嗜堿性物質(zhì)，可用煌焦油藍(lán)或新亞甲藍(lán)染液進(jìn)行活體染色后，顯現(xiàn)其網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)后，在顯微鏡下觀察和計(jì)數(shù)。而傳統(tǒng)的Wright染色法可觀察呈現(xiàn)為嗜多色性紅細(xì)胞。網(wǎng)織紅細(xì)胞可根據(jù)紅細(xì)胞內(nèi)網(wǎng)狀物質(zhì)的形態(tài)進(jìn)行初步分類，一般可分為4型。網(wǎng)織紅細(xì)胞自動化檢測技術(shù)是在近20余年中發(fā)展而來，特別是伴隨自動化血細(xì)胞分析儀的發(fā)展而來，其檢測技術(shù)和原理、試劑雖不相同，但其在檢測速度、精密度、多參數(shù)化等方面是一致的[1]。

其實(shí)在具有網(wǎng)織紅細(xì)胞分析功能的專用儀器和帶有網(wǎng)織紅細(xì)胞分析功能的血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀器進(jìn)入國內(nèi)的初期，就已經(jīng)有臨床應(yīng)用和評價(jià)以及參考范圍的報(bào)道[2-3]，但因檢測成本較高，檢測例數(shù)相對較少，參數(shù)僅涉及網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比(Retic%)、網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對值(Retic#)、未成熟網(wǎng)織紅細(xì)胞(IRF)、網(wǎng)織紅細(xì)胞體積和低、中、高熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞(即所謂的網(wǎng)織紅細(xì)胞分群)等參數(shù)。西門子Advia120/2120全自動血細(xì)胞分析儀是一款能提供白細(xì)胞6分類及網(wǎng)織紅細(xì)胞分析的高端儀器，其在網(wǎng)織紅細(xì)胞分析方面的能力表現(xiàn)卓越。它采用氧氮雜芑750(oxazine 750)染料對網(wǎng)織紅細(xì)胞染色，采用低角度散射光檢測網(wǎng)織紅細(xì)胞體積，高角度散射光信號測定網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白(Hb)濃度，吸收光測定法判斷網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)RNA水平，可以顯示網(wǎng)織紅細(xì)胞測定參數(shù)和計(jì)算參數(shù)、散點(diǎn)圖和直方圖數(shù)十項(xiàng)，其中的Retic和Retic#、CHr、網(wǎng)織紅細(xì)胞分群即低中高吸光度的網(wǎng)織紅細(xì)胞比率也較為廣泛應(yīng)用。但仍有許多具有研究價(jià)值的參數(shù)，例如MCVr、CHCMr、RDWr、HDWr等參數(shù)研究較少。本文對以上10項(xiàng)網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)進(jìn)行測定，推薦建立網(wǎng)織紅細(xì)胞10項(xiàng)目參數(shù)的參考范圍，并結(jié)合相關(guān)的紅細(xì)胞參數(shù)進(jìn)行比較研究，這對今后深入開展網(wǎng)織紅細(xì)胞相關(guān)的研究、臨床醫(yī)療實(shí)踐和應(yīng)用會有很大幫助。

1資料與方法

1.1一般資料隨機(jī)選擇243例來自北京協(xié)和醫(yī)院體檢中心的健康體檢者，對這些體檢者進(jìn)行初篩，排除患有貧血及血液系統(tǒng)疾病、腎臟病、消化道疾病等患者，其血常規(guī)檢查結(jié)果在全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程推薦的參考范圍內(nèi)，最終篩選出222例納入研究。其中男112例，女110例；年齡分布：男性為20～65歲，女性為22～65歲。納入研究者血常規(guī)檢查中紅細(xì)胞相關(guān)參數(shù)[包括紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC)、Hb、平均紅細(xì)胞體積(MCV)、紅細(xì)胞分布寬度(RDW)、血紅蛋白分布寬度(HDW)]的分布范圍見表1，白細(xì)胞和血小板數(shù)量正常。

表1　　入組人群血常規(guī)結(jié)果分布范圍

1.2方法應(yīng)用全自動血細(xì)胞分析儀ADVIA2120測定所有標(biāo)本，該儀器已經(jīng)校準(zhǔn)，每日測定前完成高、中、低和網(wǎng)織紅細(xì)胞共5個質(zhì)控標(biāo)本的測定，結(jié)果在控。選定標(biāo)本均采用自動進(jìn)樣方式測定，最大限度克服實(shí)驗(yàn)誤差，所有測定均在采血后4 h之內(nèi)完成。本研究對網(wǎng)織紅細(xì)胞的10項(xiàng)參數(shù)進(jìn)行測定和統(tǒng)計(jì)分析。為便于在文章中應(yīng)用，筆者列出了這些分析參數(shù)的縮寫、中文名稱和測定單位見表2(見《國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志》網(wǎng)站主頁“論文附件”)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理測定結(jié)果采用Excel2010軟件記錄并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料的比較采用t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。選擇雙側(cè)95%百分位數(shù)法確認(rèn)健康人網(wǎng)織紅細(xì)胞常規(guī)參數(shù)并將參數(shù)的P2.5～P97.5作為參考范圍。

2結(jié)果

2.1不同年齡人群3項(xiàng)參數(shù)的分析首先了解不同年齡組人群間Retic%、Retic#、Chr 3個參數(shù)是否存在差異，按照年齡分布將被檢者劃分為4個年齡段：20～<31歲、31～<41歲、41～51歲、>51歲。各年齡段人群間3個參數(shù)水平兩兩比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表3。

2.2按性別分析10項(xiàng)網(wǎng)織紅細(xì)胞相關(guān)參數(shù)對110例女性和112例男性的測定結(jié)果分別進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。男女人群間，除高吸光度網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比(Retic H%)，其他數(shù)據(jù)[包括中吸光度網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比(Retic M%)、低吸光度網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比(Retic L%)]在男、女性間比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

表3　　不同年齡人群Retic%、Retic#、Chr參數(shù)的

2.3不同性別人群的血液紅細(xì)胞各項(xiàng)參數(shù)分布范圍男性和女性紅細(xì)胞各項(xiàng)參數(shù)分布范圍，見表5。

2.4網(wǎng)織紅細(xì)胞和成熟紅細(xì)胞相關(guān)參數(shù)的對比分析網(wǎng)織紅細(xì)胞是未完全成熟的紅細(xì)胞群體，其中有許多參數(shù)與成熟紅細(xì)胞的相應(yīng)參數(shù)有密切關(guān)聯(lián)。而Advia 2120儀器具有同時測定和分析這兩群細(xì)胞的能力，因此可以將其用于這兩群細(xì)胞間相應(yīng)參數(shù)的對比分析。222例測定數(shù)據(jù)的對比分析結(jié)果見表6。

表4　　男性與女性10項(xiàng)網(wǎng)織紅細(xì)胞相關(guān)參數(shù)參考范圍的確定

表5　　男性和女性血液紅細(xì)胞各項(xiàng)參數(shù)的分布范圍

CH：單個細(xì)胞血紅蛋白含量均值;CHCM：紅細(xì)胞血紅蛋白濃度平均值。

表6　　成熟紅細(xì)胞與網(wǎng)織紅細(xì)胞相應(yīng)參數(shù)的比較±s)

3討論

3.1網(wǎng)織紅細(xì)胞Retic和Retic#是最重要的參數(shù)，作者參考了國內(nèi)近年來的相關(guān)報(bào)道，選擇比較有代表性的儀器和報(bào)道，其成年男女網(wǎng)織紅細(xì)胞參考范圍如下，見表7(見《國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志》網(wǎng)站主頁“論文附件”)?？梢钥闯?，不同儀器間在網(wǎng)織紅細(xì)胞測定參考范圍上除CD-3700型血液分析儀測得的網(wǎng)織紅細(xì)胞各參數(shù)顯著高于其他儀器外，其他儀器的結(jié)果較為接近，一般來說男性檢測結(jié)果略高于女性。但是，在男女性別間的百分?jǐn)?shù)結(jié)果上出現(xiàn)了兩種不同的情況，這可能與所采用的檢測系統(tǒng)以及選定的人群有所不同有關(guān)。在絕對數(shù)上的不同應(yīng)該源于男女性在紅細(xì)胞數(shù)量上的明顯差異。

3.2MCV和MCVr網(wǎng)織紅細(xì)胞是幼稚的紅細(xì)胞，其直徑大多為8.0～9.5 μm，而正常紅細(xì)胞直徑多為6.7～7.7 μm[4]，從直徑上看網(wǎng)織紅細(xì)胞明顯大于成熟紅細(xì)胞。正常平均紅細(xì)胞體積一般在89.5 fL(本研究為88.8 fL)，分布范圍為80～100 fL，網(wǎng)織紅細(xì)胞體積從本研究結(jié)果看，平均值為105.4 fL，分布范圍為97.0～113.8 fL，也明顯大于成熟紅細(xì)胞，兩組數(shù)據(jù)間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。有關(guān)網(wǎng)織紅細(xì)胞體積的研究和報(bào)道并不多，叢玉隆等[5]在1996年應(yīng)用TechniconH3血液分析儀進(jìn)行了相關(guān)研究，健康人群的MCVr為(111.8±5.3)fL。而Coulter公司儀器也具有類似的檢測指標(biāo)，一些作者也建立了成年人的正常參考范圍，見表8(見《國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志》網(wǎng)站主頁“論文附件”)。本研究結(jié)果與這些報(bào)道相近，但可能因檢測系統(tǒng)的因素，略低于這些文獻(xiàn)的報(bào)道，但也同樣可以證明網(wǎng)織紅細(xì)胞是直徑和體積均大于成熟紅細(xì)胞的細(xì)胞群體。

3.3CH和CHrCH是通過高角度散射光直接測定的單個紅細(xì)胞內(nèi)CHr，與通過Hb和RBC測定后計(jì)算獲得的MCH有相似的含義，但不受Hb和RBC測定誤差和計(jì)算因素的影響。從檢測結(jié)果上看CHr要明顯高于成熟CH。網(wǎng)織紅細(xì)胞是有核紅細(xì)胞脫掉細(xì)胞核并進(jìn)入外周血液內(nèi)的新生紅細(xì)胞，具有較大的體積和含有豐富的Hb，CHr平均為34.3 pg，明顯高于成熟紅細(xì)胞的CH(29.5 pg)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

在目前的血細(xì)胞分析系統(tǒng)中，Sysmex公司的XE-2100型血液分析儀在進(jìn)行網(wǎng)織紅細(xì)胞分析時也有CHr這一參數(shù)，其名稱為“Ret-He”。該參數(shù)是目前較為廣泛地用于缺鐵性貧血診斷和治療檢測的新的指標(biāo)。

3.4CHCM和CHCMrCHCM是儀器高角度散射光直接測定的Hb濃度均值，他與通過Hb和HCT測定后計(jì)算獲得的MCHC有相似的含義，但不受Hb和HCT測定誤差和計(jì)算因素的影響。從測定結(jié)果看CHCMr略低于CHCM，其均值分別為326.3 g/L和335.2 g/L，分布范圍分別是300.9～351.7 g/L和317.2～353.2 g/L。兩組數(shù)據(jù)間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。CHCM表達(dá)為Hb在成熟紅細(xì)胞中的濃度，而CHCMr表達(dá)為Hb在網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)的濃度，雖然在單個網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)有較高的Hb含量，但因?yàn)榫W(wǎng)織紅細(xì)胞的體積大于成熟紅細(xì)胞，因此在體積相對較大的網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)的Hb濃度仍然低于成熟紅細(xì)胞。因此CHr高于CH的主要是由于其體積大和所含血紅蛋白較多。

3.5RDW和RDWr這兩項(xiàng)參數(shù)分別反映了成熟紅細(xì)胞和網(wǎng)織紅細(xì)胞體積分布的均一性，其平均值分別為13.7%和9.3%，分布范圍分別為12.5%～14.9%和7.5%～11.1%。判斷一組細(xì)胞大小或所含物質(zhì)均一性的參數(shù)即為這組數(shù)據(jù)的變異系數(shù)(CV%)，其數(shù)值小表明其變異較小，一致性較高，如果變異較大則代表該組數(shù)據(jù)的一致性較差。由此數(shù)據(jù)可以了解到雖然網(wǎng)織紅細(xì)胞體積明顯大于成熟紅細(xì)胞，但其體積大小的均一性好于成熟紅細(xì)胞。

3.6HDW和HDWr這兩項(xiàng)參數(shù)是Advia2120儀器特有的參數(shù)，分別反映成熟紅細(xì)胞和網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)所含Hb的均一性。其測定結(jié)果平均值分別為24.5%和27.8%，分布范圍分別為19.9%～29.1%和22.2%～33.4%，兩組數(shù)據(jù)間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。本研究顯示，成熟紅細(xì)胞內(nèi)所含Hb的均一性比較好。而網(wǎng)織紅細(xì)胞可能因成熟程度不同，在外周血涂片上可以見到Ⅳ型或Ⅲ型的網(wǎng)織紅細(xì)胞，儀器測定則可以見到含高、中、低不同水平Hb的網(wǎng)織紅細(xì)胞，說明外周血中網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟度是不同的，所含Hb量也會存在差異，因此導(dǎo)致其所含Hb分布的均一性比成熟紅細(xì)胞變異更大。

根據(jù)儀器性能的不同，網(wǎng)織紅細(xì)胞的測定和計(jì)算參數(shù)有多種，目前本研究所采用的Advia2120血細(xì)胞分析儀是最多的。本研究所涉及的網(wǎng)織紅細(xì)胞體積、RDWr、CHr、CHCMr、HDWr等許多參數(shù)到目前為止很少有文獻(xiàn)報(bào)道，而這些參數(shù)也是Advia2120儀器所特有的參數(shù)。這些參數(shù)在對各種貧血患者的篩查、診斷、鑒別診斷，特別是在治療監(jiān)控和預(yù)后觀察等方面有臨床應(yīng)用價(jià)值，期望能夠進(jìn)行更多的臨床應(yīng)用研究，發(fā)現(xiàn)和發(fā)揮這些獨(dú)特參數(shù)的臨床應(yīng)用價(jià)值。

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Reticulocyte parameters of normal human and its relationship with mature erythrocyte parameters

ZhangShimin1,SongXuedong2

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,PekingUnionMedicalCollegehospital,ChineseAcademyofMedicalSciences&PekingUnionMedicalCollege，Beijing100730,China;2.theHospitalofBazhouCity,Bazhou,Hebei065700)

Abstract:ObjectiveTo investigate the relationship between the parameters of the red blood cells and the corresponding parameters of mature red blood cells.MethodsBlood samples of 112 healthy males and 110 healthy females were tested for these reticulocyte parameters by using Siemens Advia2120 hematology analyzer.Reference intervals were established.Comparisons between these reticulocyte parameters and the corresponding parameters of mature erythrocytes were drawn.ResultsReference intervals for the healthy group recruited in this study were determined as follows.Females,percentage of reticulocyte (Retic%):0.45%～1.76%,absolute reticulocyte number(Retic#):(22～86)×109/L,mean corpuscular hemoglobin content of reticulocyte(CHr):30.1～36.4 pg,mean corpuscular volume of reticulocyte(MCVr):99.5～113.7 fL.Male,Retic%:0.54%～1.93%,Retic#:(29～104)×109/L,CHr:32.6～36.6 pg,MCVr:97.6～112.7 fL.The absolute reticulocyte of male is significantly higher than that of female;MCVr was significantly larger than mean corpuscular volume of mature erythrocytes,which was also slightly larger in male than that in female;CHr was significantly higher than mean corpuscular hemoglobin of mature erythrocytes while mean corpuscular hemoglobin concentration of large reticulocytes was lower than that of mature erythrocytes;red blood cell volume distribution width of reticulocytes was lower than that of mature erythrocytes;the hemoglobin content distribution width of mature erythrocytes has a higher uniformity compared with reticulocytes.ConclusionThe reference ranges of not commonly used parameters of reticulocytes were established,and were compared with the corresponding parameters of red blood cells.

Key words:reticulocyte;hemoglobin；mean corpuscular volume；red blood cell volume distribution width

(收稿日期：2015-12-15)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.08.014

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)08-1049-04

作者簡介：張時民，男，副主任技師，主要從事臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)血液、體液檢驗(yàn)及形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)等方面的研究。